詳細(xì)介紹
人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法 英文名稱(chēng):Human 5-hydroxyindolacetic acid,5-HIAA ELISA Kit 檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買(mǎi)本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1. 此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,按照1:100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5。
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
IL-6 白介素6規(guī)格: 0.1ml
PRKD1/PKC mu 蛋白激酶C mu型抗體規(guī)格: 0.2ml
DAO1/ABP1 阿米洛利結(jié)合蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml
CMYA2/PDE4DIP 心肌病相關(guān)蛋白2規(guī)格: 0.2ml
C19orf18 19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框18抗體規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-horse IgG/FITC FITC標(biāo)記的兔抗馬IgG規(guī)格: 0.3ml
FAST kinase Fas活化的絲/蘇氨酸激酶抗體規(guī)格: 0.1ml
BIN3 細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-IGF1R(Tyr1161) 磷酸化胰島素樣生因子1受體抗體規(guī)格: 0.1ml
ROC1/RNF75 環(huán)指蛋白75抗體規(guī)格: 0.2ml
TSARG6/DNAJB13 生細(xì)胞凋亡相關(guān)基因6抗體規(guī)格: 0.1ml
MBNL3 毒蕈堿樣蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml
VWF 管假性友病因子/管性友病因子抗體規(guī)格: 0.1ml
phospho-EGFR (Ser1166) 磷酸化表皮生因子受體抗體規(guī)格: 0.1ml
TNMD/tenomodulin 腱調(diào)蛋白抗體(軟骨調(diào)節(jié)素樣1蛋白)規(guī)格: 0.2ml
phospho-PI3K p85(Tyr458)/p55(Tyr199) 磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體規(guī)格: 0.1ml
C4orf42 4號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框42抗體規(guī)格: 0.2ml
Astrocyte 人星形膠質(zhì)細(xì)胞抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-CBL2(Tyr774) 磷酸化原蛋白CBL2抗體規(guī)格: 0.1ml
RSPO1 分泌性蛋白R(shí)SPO1抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-LATS2 (Ser83) 磷酸化瘤抑制基因LATS2抗體規(guī)格: 0.1ml黑曲霉 Aspergillus niger
大鼠胰島細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
MuM-2B(人眼脈絡(luò)黑色素瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
植物桿菌 Lactobacillus plantarum
呂宋馬杜拉放線(xiàn)菌 Actinomadura luzonensis
大鼠肝星形細(xì)胞英文名稱(chēng):HSC-T6
青春雙歧桿菌 Bifidobacterium adolensentis
黑曲霉 Aspergillus niger
大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
QGY-7701(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
桿菌屬 Lactobacillus sp.
菜豆根瘤菌 Rhizobium phaseoli
TM4(正常小鼠睪Sertoli細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. lactis
出芽短梗霉
人5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis
H4(人腦神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
酸球菌亞種 Lactococcus lactis subsp. Lactis
苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti
RWPE-2(人前列腺正常細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
戊糖桿菌 Lactobacillus pentosus