小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽（ⅠCTP）elisa試劑盒操作步驟

小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)elisa試劑盒操作步驟     英文名稱：Mouse Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type Ⅰ collagen,ⅠCTP ELISA Kit       檢測方法：elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗是一種敏感性高，特異性強，重復性好的實驗方法。其試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。凡購買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問題，收貨后十五個工作日內(nèi)包退換。 
英文名稱：Mouse Cross-linked Carboxy-terminal opeptide of type Ⅰ collagen,ⅠCTP ELISA Kit  
規(guī)格：96T/48T
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
性狀：盒裝液體
人白介素2受體（IL-2R)Elisa測定試劑盒用途：科研與實驗試劑，不得用于臨床診斷。
標本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)elisa試劑盒操作步驟實驗材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標儀（使用前預熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 緩沖液使用：加5ul 的緩沖液于50ul 的樣品中，如果樣品量不夠或者不確定，緩沖液和樣品的混合比例不要小于1:10即可。 混勻，靜置1小時備用（如果標本是血清或者血漿，此步驟忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液備用。
小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)elisa試劑盒操作步驟樣品收集、處理及保存
1. 細胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2. 細胞：用PBS反復洗滌細胞3次，調(diào)整細胞濃度達到104 -106 /ml 左右，通過反復凍融，使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份，或 者細胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3. 血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上 清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6. 組織標本：切取組織標本，稱取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標本勻漿，以2000-3000 rmp離心20 分鐘，收集上清進行檢測。
7. 樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
8. 保存：如果樣品不能立即檢測，應將其分裝，-70 ℃保存，避免反復冷凍。保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心。血液標 本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解 凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)elisa試劑盒操作步驟操作步驟：
1. 取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置 30 分鐘。
2. 分組：取出 96 孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標準 品組（6 個濃度）、空白孔、待測樣品組。 注：為減少實驗誤差，保證準確性，建議設(shè)置復孔。
3. 加樣：依照標準品的順序分別加入 50ul 的標準品溶液于空白微孔中；空白對照孔加入 50ul 的蒸餾水；其余微孔中加入 50ul 的待測樣本。
4. 加酶標溶液：標準品組、待測樣本組各孔中加入 100ul 的酶標溶液（空白對照孔除外）。
5. 溫育：酶標板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于 37℃恒溫孵育 1 小時。
6. 洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置 15-30s，充分清洗酶標板 5 次，用吸水紙*拍干。
7. 顯色：各孔加入顯色劑 A 液 50ul 后，再加入顯色劑 B 液 50ul。
8. 終止：25-37℃下避光反應 10-15 分鐘，加入 50ul 終止液。 9. 讀板：在 450nm 波長讀取各孔的 OD 值。 
注意事項：
1. 實驗操作中必須使用一次性吸頭，避免交叉污染。
2. 加樣：加樣時，要控制加樣速度，避免*孔與zui后一孔間的時間間隔過大，否則將會導致不同的預孵育時間，從而影響 實驗的準確性以及重復性。
3. 孵育：嚴格按照說明書上規(guī)定的孵育時間和溫度進行。
4. 反應時間的控制：加入底物后請定時觀察反應孔的顏色變化，如果顏色較深，請?zhí)崆凹尤虢K止液終止反應。
5. 建議實驗前預測樣品含量，如樣品濃度過高，應對樣品進行稀釋，計算結(jié)果時乘以相應的稀釋倍數(shù)。
6. 建議使用本試劑盒時先做預實驗（即先做標準曲線，試用幾個標本），如果對本試劑盒有任何疑問，可和所購經(jīng)銷商， 如果因運輸過程導致試劑盒失效，可要求調(diào)換，但概不承擔產(chǎn)品本身以外的任何損失。
小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)elisa試劑盒操作步驟安全性
1． 避免人體直接接觸顯色劑A、B和終止液。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要進食、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

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Sphingomyelinase Phosphorylcholine Standard （1 ea）Sphingomyelinase Phosphorylcholine Standard

Pyruvate Assay Enzyme Mixture （1 ea）Pyruvate Assay Enzyme Mixture

Indomethacin N-octyl amide （1 mg）N-octyl-1-（4-chlorobenzoyl）-5-methoxy-1H-indole-3-acetamide； Indomethacin N-octyl amide

Hydrogen Peroxide （urinary） Standard （1 ea）Hydrogen Peroxide； Hydrogen Peroxide （urinary） Standard

U-0126 （25 mg）2，3-bis[amino[（2-aminophenyl）thio]methylene]-butanedinitrile； U-0126

Developing Reagent 1 （1 ea）Developing Reagent 1

7-Nitroindazole （50 mg）7-nitro-1H-indazole； 7-Nitroindazole

DAF-2 （100 ug）2-（3，6-dihydroxy-4，5-diamino-9H-xanthen-9-yl）-benzoic acid； 4，5-Diaminofluorescein； DAF-2

（S）-（-）-Acenocoumarol （1 mg）4-hydroxy-3-[（1S）-1-（4-nitrophenyl）-3-oxobutyl]-2H-1-benzopyran-2-one； （S）-（-）-Acenocoumarin|（S）-（-）-Nicoumalone； （S）-（-）-Acenocoumarol

PtdIns （4）-P1-fluorescein （ammonium salt） （10 ug）1-（1-octadecanoyl-fluorescein-2R-octadecanoylphosphatidyl）inositol-4-phosphate， triethylammonium salt； PtdIns （4）-P1-fluorescein （ammonium salt）

JWH 073 N-（4-hydroxybutyl） metabolite （1 mg）（1-（4-hydroxybutyl）-1H-indol-3-yl）（naphthalen-1-yl）-methanone； JWH 073 N-（4-hydroxybutyl） metabolite

小鼠Ⅰ型膠原交聯(lián)羧基末端肽(ⅠCTP)elisa試劑盒操作步驟AM2201 N-（3-fluoropentyl） isomer （500 ug）（1-（3-fluoropentyl）-1H-indol-3-yl）（naphthalen-1-yl）methanone； AM2201 N-（3-fluoropentyl） isomer

3-Ethylmethcathinone （hydrochloride） （5 mg）1-（3-ethylphenyl）-2-（methylamino）propan-1-one， monohydrochloride； 3-EMC； 3-Ethylmethcathinone （hydrochloride）

20-HETE （100 ug）20-hydroxy-5Z，8Z，11Z，14Z-eicosatetraenoic acid； 20-hydroxy Arachidonic Acid； 20-HETE