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小鼠腎素(Renin)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2017-03-15 13:04:00瀏覽次數(shù):165次

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小鼠腎素(Renin)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法     英文名稱:Mouse Renin ELISA Kit      檢測(cè)方法:elisa酶聯(lián)免疫分析法ELISA生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。凡購(gòu)買本公司試劑盒非人為質(zhì)量問(wèn)題,收貨后十五個(gè)工作日內(nèi)包退換。
小鼠腎素(Renin)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法一、標(biāo)本要求 
1
.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。 
2
.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
小鼠腎素(Renin)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法二、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
2. 使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
3. 濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
4. 濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
5. 若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于28℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
6. 在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低精確度,造成吸光度偏離的假像。
7. 加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
8. 試劑盒保存于28℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。
三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水119倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水14倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,按照1100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)
小鼠腎素(Renin)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法操作步驟:
1.編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照 2 孔、陽(yáng)性對(duì)照 2 孔、空白對(duì)照 1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)
2.加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照 50µl。然后在待測(cè)樣品孔先 加樣品稀釋液 40µl,然后再加待測(cè)樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,
3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.配液:將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此 重復(fù) 5 次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
7.溫育:操作同 3。
8.洗滌:操作同 5
9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
15 分鐘.
10.
終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11.測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD 值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止 液后 15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

Prostaglandin F2α Alcohol (50 mg)1,9。alpha。,11。alpha。,15S-tetrahydroxyprosta-5Z,13E-diene; AGN190190|PGF2α-OH|ZK 62717; Prostaglandin F2α Alcohol

11β-13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F2α (50 ug)9。alpha。,11。beta。-dihydroxy-15-oxo-prost-5Z-en-1-oic acid; 11β-13,14-dihydro-15-keto PGF2α|11-epi 13,14-dihydro-15-keto PGF2α; 11β-13,14-dihydro-15-keto Prostaglandin F2α

17-phenyl trinor Prostaglandin F2α amide (1 mg)9。alpha。,11。alpha。,15S-trihydroxy-17-phenyl-18,19,20-trinor-prosta-5Z,13E-dien-1-amide; 17-phenyl trinor PGF2α amide|Bimatoprost amide; 17-phenyl trinor Prostaglandin F2α amide

Prostaglandin I2 (sodium salt) (5 mg)6,9α-epoxy-11α,15S-dihydroxy-prosta-5Z,13E-dien-1-oic acid, monosodium salt; Epoprostenol|Prostacyclin|PGI2; Prostaglandin I2 (sodium salt)

20-carboxy Leukotriene B4 (250 ug)5S,12R-dihydroxy-6Z,8E,10E,14Z-eicosatetraene-1,20-dioic acid; 20-carboxy LTB4; 20-carboxy Leukotriene B4

15(S)-HEPE (25 ug)15S-hydroxy-5Z,8Z,11Z,13E,17Z-eicosapentaenoic acid; 15(S)-HEPE

8(S)-HETrE (25 ug)8S-hydroxy-9E,11Z,14Z-eicosatrienoic acid; 8(S)-HETrE

Acetic Anhydride (5 ea)Acetic Anhydride

Prostaglandin D2 Express EIA Standard (1 ea)Prostaglandin D2 Express EIA Standard

COX Inhibitor Screening Assay COX-1 (ovine) (1 ea)COX-1 (ovine); COX Inhibitor Screening Assay COX-1 (ovine)

Nonidet P-40 Assay Reagent (10%) (6 ml)Nonidet P-40 Assay Reagent (10%)

Saline Sodium Citrate Stock Solution (10X, pH 7。0) (500 mL)SSC Buffer; Saline Sodium Citrate Stock Solution (10X, pH 7。0)

Pyrrolidino PAF C-16 (5 mg)1-O-hexadecyl-2-O-acetyl-sn-glyceryl-3-phosphoryl-N-methyl-pyrrolidinium ethanol; Pyrrolidino PAF C-16

Sphingosine-1-Phosphate (10 mg)2S-ami-(dihydrogen phosphate)-4E-octadecene-1,3R-diol; S1P|Sphingosine-1-Phosphoric Acid; Sphingosine-1-Phosphate白靈側(cè)耳 Pleurotus nebrodensis

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

桿菌屬 Lactobacillus sp.

桿菌屬 Lactobacillus sp.

桔青霉

Lane Marker Loading Buffer(5x)/蛋白示蹤上樣緩沖液(非還原,5x)5ml5ml

田菇屬 Agrocybe sp.

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

肺鱗英文名稱:NCI-H520

熱帶假絲酵母 Candida tropicalis

金頂側(cè)耳 Pleurotus citrinopileatus

人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus

解脂亞羅酵母 Yarrowia lipolytica

大鼠表皮黑色素細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

人皮膚肥大細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL

嗜酸桿菌 Lactobacillus acidophilus

大鼠小腸引窩上皮細(xì)胞英文名稱:IEC-6

BT-549(人腺管細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

小鼠腎素(Renin)elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)方法中慢生華癸根瘤菌 Mesorhizobium huakuii

HGC-27人胃細(xì)胞

WI-38(人胚肺細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

青霉屬 Penicillium sp.

293T全細(xì)胞裂解液100μg100μg

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