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下列是產(chǎn)品的訂購信息!產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 貨號 |
BalbTaq DNA Polymerase | 200U|1000U | GOY-F10289 |
產(chǎn)品詳細介紹:
BalbTaq DNA Polymerase簡稱BalbTaq酶,是一種兼顧了高保真性和高擴增效率的DNA聚合酶,是我司優(yōu)先推薦的基因PCR克隆用酶。 BalbTaq酶可以催化5′至3′方向的依賴于DNA模板的脫氧核苷酸的聚合。同時BalbTaq酶有3′→5′的外切酶活性(proofreading activity)。另外,BalbTaq酶有5'→3'外切酶活性,但BalbTaq酶沒有反轉(zhuǎn)錄酶活性。 由于BalbTaq酶有3′→5′的外切酶活性,因此在PCR擴增過程中出錯的幾率大大降低,出錯率為1.6×10-6,略低于Pfu酶的2.6×10-6。 BalbTaq酶的DNA擴增效率大大高于Pfu酶,和Taq酶的擴增效率比較接近。因此BalbTaq酶很好地兼顧了擴增效率和擴增的準(zhǔn)確性。 BalbTaq酶常用于高保真PCR (high fidelity PCR)、點突變、T載體克隆等各種常規(guī)PCR反應(yīng)。用BalbTaq酶擴增產(chǎn)生的PCR產(chǎn)物帶有3′-dA overhangs,可以用于基于T載體的PCR片斷克隆。BalbTaq酶可以擴增長度達5kb的DNA片斷,長可以擴增長達10kb的DNA片斷。通常適合擴增3kb以下的DNA片斷。 儲存條件:-20℃ |
DNA提取流程圖:
實驗步驟
(1)實驗開始前將RNA提取液于65℃水浴鍋中預(yù)熱,離心管中加入ME(巰基乙),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)
(2)取約0.8g菌絲體(液體培養(yǎng)獲得的菌絲用真空抽濾即可!固體培養(yǎng)就更好說了),在液氮中迅速磨成精細粉末,裝入50mL離心管,按1g材料8mL的量加入預(yù)熱的RNA提取液,顛倒混勻
(3)65℃水浴3-10 min,期間混勻2-3次
(4)加入等體積的酚(注意是酸酚pH4.5)::異戊(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(5)取上清,等體積的:異戊(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)
(6)加入1/4V體積10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或過夜)
(7)10,000rpm,4℃離心20min
(8)棄上清,用500ul SSTE溶解沉淀
(9)酚::異戊(25:24:1)抽提兩次,:異戊(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)
(10)加2V體積的無水乙,在-70℃冰箱沉淀30min以上
(11)12,000rpm,4℃離心20 min
(12)棄上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥
(13)加200ul的DEPC處理水溶解
(14)用非變性瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計掃描檢測RNA的質(zhì)量
(在抽提過程中,若蛋白質(zhì)含量或其它的雜質(zhì)還較多,可以增加抽提次數(shù))
操作步驟:
1. 勻漿處理:a.組織 將組織在液氮中磨碎,每50-100mg組織加入1ml TRIzol,用勻漿儀進行勻漿處理。樣品體積不應(yīng)超過TRIzol體積10℅。
b.單層培養(yǎng)細胞 直接在培養(yǎng)板中加入TRIzol裂解細胞,每10cm2面積(即3.5cm直徑的培養(yǎng)板)加1ml,用移液器吸打幾次。TRIzol的用量應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)板面積而定,不取決于細胞數(shù)。TRIzol加量不足可能導(dǎo)致提取的RNA有DNA污染。
c.細胞懸液 離心收集細胞,每5-10×106動物、植物、酵母細胞或1×107細菌細胞加入1ml TRIzol,反復(fù)吸打。加TRIzol之前不要洗滌細胞以免mRNA降解。一些酵母和細菌細胞需用勻漿儀處理。
2.將勻漿樣品在室溫(15-30℃)放置5分鐘,使核酸蛋白復(fù)合物*分離。
3.可選步驟:如樣品中含有較多蛋白質(zhì),脂肪,多糖或胞外物質(zhì)(肌肉,植物結(jié)節(jié)部分等)可于2-8℃10000×g離心10分鐘,取上清。離心得到的沉淀中包括細胞外膜,多糖,高分子量DNA,上清中含有RNA。處理脂肪組織時,上層有大量油脂應(yīng)去除。取澄清的勻漿液進行下一步操作。
5. 每使用1ml TRIzol加入0.2ml,劇烈振蕩15秒,室溫放置3分鐘。
6. 2-8℃10000×g離心15分鐘。樣品分為三層:底層為黃色有機相,上層為無色水相和一個中間層。RNA主要在水相中,水相體積約為所用TRIzol試劑的60℅。
7. 把水相轉(zhuǎn)移到新管中,如要分離DNA和蛋白質(zhì)可保留有機相,進一步操作見后。用異丙沉淀水相中的RNA。每使用1ml TRIzol加入0.5ml異丙,室溫放置10分鐘。
8. 2-8℃10000×g離心10分鐘,離心前看不出RNA沉淀,離心后在管側(cè)和管底出現(xiàn)膠狀沉淀。移去上清。
人 Apelin(Apelin) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Ampicillin Trihydrate 中文名:氨芐西林三水酸 分子式:C16H19N3O4S 度:98.0%
熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA試劑盒 3-Hydroxycatalponol 中文名: 分子式:C15H18O3 度:97.0%
熱休克蛋白70 英文名稱: Heat shock protein 70 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: HSP70 Palmitone 502-73-8 中文名:棕櫚酮 分子式:C31H62O 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
熱休克蛋白27 英文名稱: Heat shock protein 27 規(guī)格: 48T/96T 英文縮寫: HSP27 Palmitone 中文名:棕櫚酮 分子式:C31H62O
熱休克蛋白 70(HSP70) 作用: ELISA 規(guī)格: 48T/96T 進口分裝 Panaxydiol 63910-76-9 中文名: 分子式:C17H24O2 度:% 關(guān)鍵詞:
構(gòu)樹堿A(標(biāo)準(zhǔn)品) Broussonetine A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratthrombin-aithrombincomplex,TATELISAKit大鼠凝血酶抗凝血酶復(fù)合物(TAT)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Oleanolic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl (1→2)-α-L-arabinopyranoside Oleanolic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl (1→2)-α-L-arabinopyranoside 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 LEIBOVITZ’SL15培養(yǎng)基1/10升(片劑)
Sapindoside A Sapindoside A 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 PlaVitaminK1,VK1ELISA試劑盒植物K1(VK1)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
卡博替尼蘋果酸鹽 ;XL184(S)-malate Cabozantinib (S)-malate(BMS907351-(S)-malate) 質(zhì)量規(guī)格:>99%,廣譜酪激酶抑制劑 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/Gelatinase A)ELISA 試劑盒
Presapogenin CP4 Presapogenin CP4 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Rat soluble vascular cell adhesion molecule 1 (sVCAM-1) ELISA Kit 大鼠可溶性血管細胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒
12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate 12-O-Tiglylphorbol-13 –isobutyrate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Humanconnectivetissue-activatingpeptideⅢ,CTAPⅢELISAKit 人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝
佛波12-十四酸酯13-乙酸酯 Phorbol 12-myristate 13-acetate 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 Humanai-immunodeficiencyvirusaibody,HIVELISA試劑盒人抗人類缺陷病毒抗體(HIV)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
藤黃酸(標(biāo)準(zhǔn)品) Gambogic acid 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥97%,標(biāo)準(zhǔn)品 植物硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒20
五味子酚(標(biāo)準(zhǔn)品) schisanhenol 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品 HumanVascularEndothelialcellGrowthFactor,VEGFELISAKit人血管內(nèi)皮細胞生長因子(VEGF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
FMOC-3,5-二-L-酪 FMoc-Tyr(3,5-I2)-OH 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP2)ELISA試劑盒 ,英文名: MMP2 ELISA Kit
BalbTaq DNA聚合酶組織羧酸酯酶(carboxylesterase;CE)活性比色法定量檢測試劑盒
細胞羧酸酯酶(carboxylesterase;CE)活性比色法定量檢測試劑盒
組織半胱(CASPASE)總活性熒光定量檢測試劑盒
細胞半胱(CASPASE)總活性熒光定量檢測試劑盒
組織半胱(CASPASE)總活性比色法定量檢測試劑盒