抗壞血酸氧化酶（AAO）微量法測(cè)試盒

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產(chǎn)品名稱(chēng)：抗壞血酸氧化酶（AAO）微量法測(cè)試盒
規(guī)格 : 100管/96樣
測(cè)試方法: 微量法
貨號(hào)：GOY-01S6394
分類(lèi)：維生素代謝系列
商品介紹：
AAO是定位于植物細(xì)胞壁的糖蛋白，屬“藍(lán)銅氧化酶"家族。細(xì)胞壁內(nèi)的抗壞血酸和AAO與細(xì)胞壁的代謝和生長(zhǎng)有著密切的聯(lián)系。AAO 氧化 AsA 所形成的 MDHA 可通過(guò)質(zhì)膜上的細(xì)胞色素b還原，該過(guò)程中電子的跨膜運(yùn)輸能夠促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。

測(cè)定原理：

AAO可直接氧化AsA，通過(guò)測(cè)定AsA的氧化量，可計(jì)算得AAO活力。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備：

低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器、研缽、冰、蒸餾水。
試劑的組成和配制
提取液一：液體50mL×1瓶，4℃保存。
提取液二：液體50mL×1瓶，4℃保存。
試劑一：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入40mL試劑四充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑二：液體18μL×1瓶，4℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑三：粉劑×1瓶，-20℃保存；臨用前加入2.5mL蒸餾水充分溶解待用，用不完的試劑4℃保存；
試劑四：液體50mL×1瓶， 4℃保存；
測(cè)定步驟
1、 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至340nm，蒸餾水調(diào)零。
2、 將試劑一、二、三37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)預(yù)熱10分鐘。
3、 加樣表：

樣本的前處理
①總FBP酶提?。航ㄗh稱(chēng)取約0.1g樣本，加入1mL提取液一，冰浴勻漿后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時(shí)間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測(cè)定。
②胞漿和葉綠體FBP酶的分離：按照植物組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5～10的比例（建議稱(chēng)取約0.1g樣本，加入1mL提取液一），冰浴勻漿后于4℃，200g離心5min，棄沉淀，取上清在4℃，8000g離心10min，取上清用于測(cè)定胞漿FBP酶活性，取沉淀加1mL提取液二，震蕩溶解后超聲破碎（冰浴，200W，破碎3s，間歇7s，總時(shí)間1min），然后4℃，8000g離心10min，取上清測(cè)定葉綠體中FBP酶活性。
建議測(cè)定總FBP酶活性，按照步驟①提取粗酶液，若需要分別測(cè)定胞漿和葉綠體中的FBP，則按照步驟②提取粗酶液。
β1，3半乳糖轉(zhuǎn)移酶3抗體     胰島素樣生長(zhǎng)因子ⅡmRNA結(jié)合蛋白1抗體

BarX1蛋白抗體     胰島素樣生長(zhǎng)因子2受體抗體

Bcl-2同源結(jié)構(gòu)域樣蛋白1抗體     胰島素樣生長(zhǎng)因子2 mRNA 結(jié)合蛋白3抗體

染色體相關(guān)蛋白CAP抗體     胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體相互作用蛋白1抗體

骨/軟骨蛋白多糖1抗體     胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體抗體
大鼠環(huán)孢素A(CsA)elisa檢測(cè)試劑盒

大鼠環(huán)加氧酶1(COX-1)elisa分析檢測(cè)試劑盒

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抗壞血酸氧化酶（AAO）微量法測(cè)試盒一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 中 pH)30 次  IPTG 干粉2.5g

一站式蛋白質(zhì)非變性 PAGE 套裝 ( 低 pH)30 次  Ionomycin( 鈣離子載體 )250nmol

高 pH 緩沖液套裝30 次  Insulin18mg

中 pH 緩沖液套裝30 次  Indo-1，五銨鹽1mg

低 pH 緩沖液套裝30 次  Indo-1 AM1mg
FBP活性計(jì)算：
（1）按樣本蛋白濃度計(jì)算
單位的定義：每mg組織蛋白每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(V樣×Cpr) ÷T=321.5×ΔA÷Cpr
（2）按樣本鮮重計(jì)算
單位的定義：每g組織每分鐘生成1 nmol的NADPH定義為一個(gè)酶活力單位。
FBP（nmol/min/g 鮮重）＝[ΔA×V反總÷（ε×d）×109]÷(W ×V樣÷V樣總) ÷T=321.5×ΔA÷W
V反總：反應(yīng)體系總體積，1×10-3 L；ε：NADPH摩爾消光系數(shù)，6.22×103 L / mol /cm；d：比色皿光徑，1cm；V樣：加入樣本體積，0.1 mL；V樣總：加入提取液體積，1mL；T：反應(yīng)時(shí)間，5 min；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/mL；W：樣本質(zhì)量，g。