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肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白小鼠

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更新時間:2023-03-02 14:23:13瀏覽次數(shù):173

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D85 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)
物種 Mus musculus (Mouse,小鼠)    
肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白小鼠公司正在出售的產(chǎn)品:人鈣粘蛋白7 (Cadherin-7) ELISA試劑盒96T 0.312-20 ng/mL人細(xì)胞色素P450 3A5(Cytochrome P450 3A5)ELISA試劑盒96T 0.156-10 ng/mL人封閉蛋白2(Claudin-2)ELISA試劑盒96T 0.78-50 ng/mL

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白小鼠

Mus musculus (Mouse,小鼠)

GOY-01D85

 

 

產(chǎn)品名稱:肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白小鼠

英文名稱:Recombinant Creatine Kinase, Muscle (CKM)

CK-MM; CKMM; CK3; CK-M; MM-CK; M-CK; Creatine kinase M-type, N-terminally processed

型號:GOY-01D85

酶與激酶

心腦血管

物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::細(xì)胞質(zhì)

預(yù)測分子量:41.8kDa

實(shí)際分子量:45kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Lys11~Leu367 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):6.6

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

英文名稱:Recombinant Proteinase 3 (PR3)  產(chǎn)品名稱:3(PR3)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

英文名稱:Recombinant Proteinase 3 (PR3)  產(chǎn)品名稱:3(PR3)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

英文名稱:Recombinant Tyrosine Hydroxylase (TH)  產(chǎn)品名稱:羥化酶(TH)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Recombinant Tyrosine Hydroxylase (TH)  產(chǎn)品名稱:羥化酶(TH)重組蛋白物種:Mus musculus (Mouse,小鼠)

英文名稱:Recombinant Tyrosine Hydroxylase (TH)  產(chǎn)品名稱:羥化酶(TH)重組蛋白物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

英文名稱:Recombinant Placental Protein 13 (PP13)  產(chǎn)品名稱:胎盤蛋白13(PP13)重組蛋白物種:Homo sapiens (Human,人)

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

BLAME抗體 BLAME

丁酰酯酶抗體(C端) BCHE (CT)

巴曲霉毒素單克隆抗體 Batroxobin(5H4)

蛇毒巴曲酶抗體 Batroxobin

溴脫氧尿苷抗體 BrdU

腫瘤/睪抗原2.2抗體 BAGE2

腫瘤/睪抗原2.3抗體 BAGE3

腫瘤/睪抗原2.4抗體 BAGE4

B Raf抗體 B-Raf

乳腺癌易感基因1抗體 BRCA1

腦鈉素/利鈉肽抗體 BNP

乳腺癌易感基因2抗體 FANCB

肌肌酸激酶(CKM)重組蛋白小鼠大鼠肺成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基100mL

大豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium japonicum

彈性(含100mL酶解緩沖液)10mL

NCI-H520(人肺鱗細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

ACHN(人腎細(xì)胞)大鼠肝動脈平滑肌細(xì)胞培養(yǎng)基

豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vignaC6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

BEL-7402(人肝細(xì)胞)釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)

MG-63(人骨肉瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2

宇佐美曲霉變種 Aspergillus usamii var.枯草芽胞桿菌 Bacillus subtilis

UMR-106(大鼠骨肉瘤細(xì)胞)KP-N-NS(人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移))

嗜熱鏈球菌 Streptococcus thermophilus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

 


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