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蛋白二硫化物異構(gòu)酶A4(PDIA4)重組蛋白人

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-13 15:07:30瀏覽次數(shù):128次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D1550 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Protein Disulfide Isomerase A4 (PDIA4)
物種 Homo sapiens (Human,人)
蛋白二硫化物異構(gòu)酶A4(PDIA4)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:磷酸化非受體激酶c-Abl抗體 英文名稱:phospho-c-Abl (Tyr185) 0.1ml酪蛋白激酶1γ2抗體 英文名稱:CSNK1G2 0.2ml抑制因子FBW7抗體 英文名稱:CDC4 0.2ml

以下是相關(guān)產(chǎn)品:

顆粒酶M(GZMM)重組蛋白英文名稱:Recombinant Granzyme M (GZMM)GZM-M; LMET1; MET1; Hu-Met-1; Met-ase; Lymphocyte Met Ase 1; Met-1 serine protease; Natural killer cell granular protease物種:Rat,大鼠

脂蛋白脂酶(LPL)重組蛋白英文名稱:Recombinant Lipoprotein lipase (LPL)LIPD; Lipase, Lipoprotein物種:Mouse,小鼠

二氫乳清酸脫氫酶(DHODH)重組蛋白英文名稱:Recombinant Dihydroorotate Dehydrogenase (DHODH)DHOdehase; Dihydroorotate oxidase; Dihydroorotate dehydrogenase (quinone), mitochondrial物種:Human,人

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號(hào)

蛋白二硫化物異構(gòu)酶A4(PDIA4)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D1550

 

 

英文名稱:Recombinant Protein Disulfide Isomerase A4 (PDIA4)

PDI-A4; ERP70; ERP72; Protein Disulfide Isomerase-Associated 4; Endoplasmic reticulum resident protein 70

型號(hào):GOY-01D1550

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔

預(yù)測(cè)分子量:17.3KDa

實(shí)際分子量:17kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Phe505~Thr636 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點(diǎn):9.4

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg


蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

周期素H抗體 Cyclin H 0.2ml

凋亡相關(guān)蛋白激酶1抗體 DAPK1 0.1ml

磷酸化上皮細(xì)胞癌轉(zhuǎn)化蛋白2抗體 phospho-ECT2 (Thr790) 0.1ml

蛋白激酶受體B2抗體 EphB2 R 0.1ml

脂肪酸去飽和酶1抗體 FADS1 0.2ml

肌球蛋白XVIIIb抗體 Myosin-XVIIIb 0.2ml

β-肌動(dòng)蛋白抗體(內(nèi)參抗體) beta-Actin (Loading Control) 0.1ml

表皮生長(zhǎng)因子抗體 EGF 0.1ml

A型流感病毒-NS1抗體(神經(jīng)酶1) nonstructural protein 1/NS1 0.2ml

?;拾贝济擋C?/span>2抗體 ASAH2 0.2ml

核苷酸交換因子rasgef1a抗體 RASGEF1A 0.2ml

神經(jīng)元,肌肉特異性烯醇化酶抗體 ENO1+ENO2+ENO3 0.2ml

蛋白二硫化物異構(gòu)酶A4(PDIA4)重組蛋白人17-Methyltestosteron

透析袋夾子40mm個(gè)

Naphthalene acetic acid(NAA) α-萘乙酸5g瓶

Polyphyllin VII 重樓皂苷VII76296-75-820mg

結(jié)晶紫染色液(0.1%)500ml瓶

Geraniin 老鸛草素60976-49-020mg

PCR反應(yīng)板96孔塊

HRP標(biāo)記抗體稀釋液100ml瓶

Konjac glucomannan 魔芋膠100g瓶

細(xì)胞核提取試劑盒50T盒

Glycerol 甘油500ml瓶

Fibrinogen 原100mg瓶

 


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