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內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)重組蛋白犬

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產(chǎn)品型號

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-17 11:50:34瀏覽次數(shù):232次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號 GOY-01D2137 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱 Recombinant Endothelial NOS (eNOS)
物種 Canis familiaris; Canine (Dog,犬)
內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)重組蛋白犬公司正在出售的產(chǎn)品:CENTD1蛋白抗體 英文名稱:CENTD1 0.1mlCENTG3蛋白抗體 英文名稱:CENTG3 0.1ml中心體蛋白1+2抗體 英文名稱:Centrin-1+Centrin-2 0.1ml

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱

物種

貨號

內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)重組蛋白犬

Canis familiaris; Canine (Dog,犬)

GOY-01D2137

 

 

英文名稱:Recombinant Endothelial NOS (eNOS)

NOS3; ECNOS; NOS III; E-NOS; C-NOS; ENOS; CNOS; Constitutive NOS; Nitric Oxide Synthase 3, Endothelial

型號:GOY-01D2137

酶與激酶

心腦血管

物種:Canis familiaris; Canine (Dog,犬)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::Membrane, caveola. Cytoplasm, cytoskeleton. Golgi apparatus. Cell membrane

預(yù)測分子量:23.8kDa

實(shí)際分子量:-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Ala522~Phe705 (Accession # Q9TUX8) with

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):6.8

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

圖片3.png
蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告??砂纯蛻粢筇峁┖兓瘶?biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白英文名稱:Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)CA-II; CAII; Car2; CAC; Carbonate dehydratase II; Carbonic anhydrase C物種:Mouse,小鼠

天冬氨酰tRNA合成酶(DARS)重組蛋白英文名稱:Recombinant Aspartyl tRNA Synthetase (DARS)AspRS; PIG40; Aspartate tRNA Ligase 1,Cylasmic; Cell proliferation-inducing gene 40 protein物種:Human,人

高溫需求因子A4(HTRA4)重組蛋白英文名稱:Recombinant High Temperature Requirement Factor A4 (HTRA4)HtrA Serine Peptidase 4物種:Human,人

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

黃芪甲苷人食管細(xì)胞

硝基四唑紫(INT) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Iodonitrotetrazolium chloride(INT)

 大鼠肝星形細(xì)胞培養(yǎng)基ACHN, 人腎細(xì)胞腺細(xì)胞

乙基紫 質(zhì)量規(guī)格:80%,進(jìn)分 Ethyl Violet

 涇陽鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis香菇 Lentinula edodes

皂黃 質(zhì)量規(guī)格:AR Metanil yellow

 釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae屎腸球菌 Enterococcus faecium

性紫49 質(zhì)量規(guī)格:IND,進(jìn)分 Acid Violet 49

 NCI-H446(人小細(xì)胞肺細(xì)胞)CHL(倉鼠肺細(xì)胞)

橙黃G;性橙10 質(zhì)量規(guī)格:BS Orange G

 肉桂色曲霉 Aspergillus cinnamomeus釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae

橙黃Ⅱ 質(zhì)量規(guī)格:AR OrangeⅡ

 苜蓿中華根瘤菌 Sinorhizobium meliloti紫團(tuán)孢鏈霉菌 Streptomyces violaceoagglomeratus

柯衣定 質(zhì)量規(guī)格:AR  Chrysoidin

 NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L](小鼠成纖維人內(nèi)臟脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基

日落黃 質(zhì)量規(guī)格:BS Sunset Yellow FCF

內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)重組蛋白犬10g N ,N- 雙 (2-  )  Bicine 室溫干燥保存

小鼠雌激素硫酸轉(zhuǎn)移(SULT1E1)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

肝浸粉 Liver Infusion 100g

小鼠腺二核苷酸(NADH)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪激1(Tie-1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

小鼠尿激型纖溶原激活物受體(PLAUR/uPAR)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

500mL Sodium Phosphate Buffer(鈉緩沖液),0.2M,pH8.0  Sodium Phosphate Buffer,0.2M,pH8.0  常溫保存

1 mg  U0126(MEK1/2抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

200次  ATP檢測試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

2 ug pMETα C pMETα C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

 


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