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產(chǎn)品型號(hào)
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廠商性質(zhì)經(jīng)銷(xiāo)商
所 在 地上海市
更新時(shí)間:2023-03-20 12:10:27瀏覽次數(shù):264次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
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貨號(hào) | GOY-01D2579 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | Recombinant Death Associated Protein Kinase 2 (DAP |
物種 | Homo sapiens (Human,人) |
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng) | 物種 | 貨號(hào) |
死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶2(DAPK2)重組蛋白人 | Homo sapiens (Human,人) | GOY-01D2579 |
英文名稱(chēng):Recombinant Death Associated Protein Kinase 2 (DAPK2)
DRP-1; DAP-kinase-related protein 1
型號(hào):GOY-01D2579
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::分泌
預(yù)測(cè)分子量:30.5kDa
實(shí)際分子量:31kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Met1~Thr235 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):5.2
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg
蛋白表達(dá)及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。
2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。
4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。
交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:
組織S(CTSS)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Cathepsin S (CTSS)CTS-S物種:Mouse,小鼠
70kDaζ鏈關(guān)聯(lián)蛋白激酶(zAP70)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Zeta Chain Associated Protein Kinase 70kDa (zAP70)STD; SRK; Syk-related tyrosine kinase; Tyrosine-protein kinase ZAP-70物種:Mouse,小鼠
溶血磷脂酸酸性磷酸酶(ACP6)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Acid Phosphatase 6, Lysophosphatidic (ACP6)LPAP; ACPL1; PACPL1; Acid phosphatase-like protein 1; Lysophosphatidic acid phosphatase type 6物種:Mouse,小鼠
操作步驟:
Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細(xì)胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個(gè) | 0.5 mL~1 mL |
5×106個(gè) | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。
公司正在出售的產(chǎn)品:
費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii異旋孢腔菌 Cochliobolus heterostrophus
庚二(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Pimelic acid
mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞結(jié)腸
聚維 質(zhì)量規(guī)格:BR Poly(vinylpyrrolidone)–Iodine complex
金耳 Tremella aurantialba乙酰短桿菌 Brevibacterium acetylicum
酒石氫鉀(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC Potassium hydrogen tartrate
少根根霉 Rhizopus arrhizus人腦血管平滑肌細(xì)胞
聚二 質(zhì)量規(guī)格:BR Polypropylene glycol 2000
小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna
乙基黃原鉀(>95%,BC) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BC Potassium O-ethyl xanthate
大鼠子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基Hs68(人男性正常龜細(xì)胞)
油鉀(>96%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BR Potassium oleate
異常漢遜酵母 Hansenula anomala瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus
氫二鉀三水(分子生物學(xué)級(jí)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,分子生物學(xué)級(jí) Potassium phosphate, dibasic, trihydrate
涇陽(yáng)鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis吸水鏈霉菌紫色變種 Streptomyces hygroscopicus var. violaceus
三鉀三水(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC Potassium phosphate, tribasic trihydrate
死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶2(DAPK2)重組蛋白人人妊娠皰疹抗體(HG)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝
250mL Zinc-Formalin Zinc-Formalin 常溫保存
貓三碘甲狀腺原(T3)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
50T 牛肺炎支原體PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
2 ug pENTR pENTR 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
平板計(jì)數(shù)肉湯(PCB) 250g
100U 熱啟動(dòng)Taq DNA聚合 Hot Start Taq DNA Polymerase -20℃保存
R2A液體培養(yǎng)基 R2A Liquid Medium 250g
犬P選擇素(SELP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝
100mL RNase-free EDTA溶液,0.5 M,pH 8.0 常溫
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