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死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶2(DAPK2)重組蛋白人

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2023-03-20 12:10:27瀏覽次數(shù):264次

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供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
貨號(hào) GOY-01D2579 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研實(shí)驗(yàn) 英文名稱(chēng) Recombinant Death Associated Protein Kinase 2 (DAP
物種 Homo sapiens (Human,人)
死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶2(DAPK2)重組蛋白人公司正在出售的產(chǎn)品:EFHA1蛋白抗體 英文名稱(chēng):EFHA1 0.1ml磷酸化轉(zhuǎn)錄因子E2F-1抗體 英文名稱(chēng):phospho-E2F1 (Ser364) 0.1mlEFHC2蛋白抗體 英文名稱(chēng):EFHC2 0.2ml

產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱(chēng)

物種

貨號(hào)

死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶2(DAPK2)重組蛋白人

Homo sapiens (Human,人)

GOY-01D2579

 

 

英文名稱(chēng):Recombinant Death Associated Protein Kinase 2 (DAPK2)

DRP-1; DAP-kinase-related protein 1

型號(hào):GOY-01D2579

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::分泌

預(yù)測(cè)分子量:30.5kDa

實(shí)際分子量:31kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Met1~Thr235 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點(diǎn):5.2

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

圖片3.png
蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動(dòng)物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過(guò)瞬時(shí)表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過(guò)親和,離子交換,疏水及凝膠過(guò)濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過(guò)SDS-PAGE電泳檢測(cè)每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過(guò)Western-blot驗(yàn)證目標(biāo)蛋白正確性。

交付內(nèi)容:純化好的目標(biāo)蛋白及純化報(bào)告。可按客戶要求提供含純化標(biāo)簽(Tag)或切除純化標(biāo)簽(Tag)的最終蛋白,純度最高可達(dá)90%以上。
以下是相關(guān)產(chǎn)品:

組織S(CTSS)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Cathepsin S (CTSS)CTS-S物種:Mouse,小鼠

70kDaζ鏈關(guān)聯(lián)蛋白激酶(zAP70)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Zeta Chain Associated Protein Kinase 70kDa (zAP70)STD; SRK; Syk-related tyrosine kinase; Tyrosine-protein kinase ZAP-70物種:Mouse,小鼠

溶血磷脂酸酸性磷酸酶(ACP6)重組蛋白英文名稱(chēng):Recombinant Acid Phosphatase 6, Lysophosphatidic (ACP6)LPAP; ACPL1; PACPL1; Acid phosphatase-like protein 1; Lysophosphatidic acid phosphatase type 6物種:Mouse,小鼠

操作步驟:

Ⅰ 實(shí)體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動(dòng)勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

 

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個(gè)

0.5 mL~1 mL

5×106個(gè)

0.2 mL~0.5 mL

 

 

5.置于4℃搖床平臺(tái)上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

公司正在出售的產(chǎn)品:

費(fèi)氏中華根瘤菌 Sinorhizobium fredii異旋孢腔菌 Cochliobolus heterostrophus

庚二(>98%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR Pimelic acid

 mRTEC, 小鼠腎小管上皮細(xì)胞結(jié)腸

聚維 質(zhì)量規(guī)格:BR Poly(vinylpyrrolidone)–Iodine complex

 金耳 Tremella aurantialba乙酰短桿菌 Brevibacterium acetylicum

酒石氫鉀(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC Potassium hydrogen tartrate

 少根根霉 Rhizopus arrhizus人腦血管平滑肌細(xì)胞

聚二 質(zhì)量規(guī)格:BR Polypropylene glycol 2000

 小鼠淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞培養(yǎng)基豇豆慢生根瘤菌 Bradyrhizobium vigna

乙基黃原鉀(>95%,BC) 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BC Potassium O-ethyl xanthate

 大鼠子宮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基Hs68(人男性正常龜細(xì)胞)

油鉀(>96%,BR) 質(zhì)量規(guī)格:>96%,BR Potassium oleate

 異常漢遜酵母 Hansenula anomala瑞士桿菌 Lactobacillus helveticus

氫二鉀三水(分子生物學(xué)級(jí)) 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,分子生物學(xué)級(jí) Potassium phosphate, dibasic, trihydrate

 涇陽(yáng)鏈霉菌 Streptomyces jingyangensis吸水鏈霉菌紫色變種 Streptomyces hygroscopicus var. violaceus

三鉀三水(>98%,BC) 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BC Potassium phosphate, tribasic trihydrate

死亡關(guān)聯(lián)蛋白激酶2(DAPK2)重組蛋白人人妊娠皰疹抗體(HG)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

250mL Zinc-Formalin  Zinc-Formalin  常溫保存

貓三碘甲狀腺原(T3)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

小鼠單核細(xì)胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

50T 牛肺炎支原體PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

2 ug pENTR pENTR 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

平板計(jì)數(shù)肉湯(PCB)  250g

100U 熱啟動(dòng)Taq DNA聚合 Hot Start Taq DNA Polymerase -20℃保存

R2A液體培養(yǎng)基 R2A Liquid Medium 250g

P選擇素(SELP)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

100mL RNase-free EDTA溶液,0.5 M,pH 8.0  常溫

 


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