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養(yǎng)原代細(xì)胞需要注意的細(xì)節(jié)有哪些?

時(shí)間:2017/11/7閱讀:707
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 養(yǎng)原代細(xì)胞可謂是個(gè)精細(xì)活,從事養(yǎng)細(xì)胞的人都知道養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候一旦不注意,就很容易造成細(xì)胞污染,所以想要養(yǎng)好細(xì)胞除了小心謹(jǐn)慎以外,還要提前做好準(zhǔn)備:
       細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備
       1)在帶上手套開始細(xì)胞培養(yǎng)之前,先檢查一下移液管和瓶子的數(shù)量是否充足,以免在開始實(shí)驗(yàn)后再次出入操作臺,這樣可以降低細(xì)胞污染的風(fēng)險(xiǎn)。
       2)細(xì)胞培養(yǎng)基也應(yīng)先預(yù)熱,選擇只預(yù)熱部分培養(yǎng)基而非整瓶加熱,不但可以節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間,而且可以避免因反復(fù)加熱培養(yǎng)基而造成的蛋白質(zhì)降解。

       3)結(jié)束操作后,別忘了培養(yǎng)基對光敏感,應(yīng)盡可能避光保存。

       細(xì)胞培養(yǎng)的定期檢查
       1)定期檢查培養(yǎng)細(xì)胞的形態(tài),即形狀和外觀,對于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)取得成功至關(guān)重要。
       2)除確認(rèn)細(xì)胞的健康狀態(tài)外,每次操作細(xì)胞時(shí)通過肉眼和顯微鏡檢查細(xì)胞還可早期發(fā)現(xiàn)污染征象,避免污染擴(kuò)散至實(shí)驗(yàn)室其他細(xì)胞。
       細(xì)胞變質(zhì)的征象
       1)原代細(xì)胞變質(zhì)的征象包括核周出現(xiàn)顆粒、細(xì)胞與基質(zhì)解離以及細(xì)胞質(zhì)空泡形成。
       2)這些變質(zhì)征象可能為多種原因所致,例如:培養(yǎng)物污染、細(xì)胞系衰老或培養(yǎng)基中存在毒性物質(zhì),或者這些征象僅表明培養(yǎng)物需要更換培養(yǎng)基。

       3)變質(zhì)嚴(yán)重時(shí)將會成為不可逆的變化。
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原代細(xì)胞

 

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