培養(yǎng)人類胚胎腫瘤細(xì)胞的研究者們發(fā)現(xiàn)，核型正常的細(xì)胞在植板（plating）之后只有少數(shù)能夠分裂，而且它們的子細(xì)胞還會(huì)出現(xiàn)持續(xù)性的死亡，很少能形成可以長期增殖的克隆。

Sheffield大學(xué)的Peter Andrews教授和Daniel Coca教授領(lǐng)導(dǎo)研究團(tuán)隊(duì)，對單個(gè)人類胚胎干細(xì)胞進(jìn)行了延時(shí)成像，并由此鑒定了限制干細(xì)胞生長的主要瓶頸。研究顯示，在長期培養(yǎng)過程中發(fā)生了適應(yīng)性突變的干細(xì)胞，受到的生長限制有所緩解，能夠進(jìn)行更有效的擴(kuò)增。

Sheffield大學(xué)的Dr Ivana Barbaric說：“我們研究胚胎干細(xì)胞，是因?yàn)樗鼈冇谐蔀槿魏渭?xì)胞類型的潛力。通過體外培養(yǎng)獲得大量未分化的胚胎干細(xì)胞，是用這些細(xì)胞進(jìn)行治療的前提。問題是這些細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)容易大量死亡，擴(kuò)增效率比較低。”

“在長期體外培養(yǎng)的條件下，胚胎干細(xì)胞能夠通過自發(fā)突變，提高自己的生長能力。為了安全使用這些細(xì)胞進(jìn)行治療，我們需要了解培養(yǎng)條件對細(xì)胞的影響，以及細(xì)胞對此做出的適應(yīng)。”

研究人員將延時(shí)顯微成像、單細(xì)胞追蹤技術(shù)和數(shù)學(xué)模型結(jié)合起來，對普通胚胎干細(xì)胞和已經(jīng)適應(yīng)培養(yǎng)的干細(xì)胞進(jìn)行了比較。他們從中確定了影響克隆形成的三個(gè)主要瓶頸：植板后的細(xì)胞生存情況、細(xì)胞進(jìn)入有絲分裂的情況、以及分裂后的細(xì)胞死亡情況。

研究顯示，在同樣的培養(yǎng)條件下，已經(jīng)適應(yīng)培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞在上述三個(gè)方面表現(xiàn)更好，能夠形成更多的克隆。此外，增加細(xì)胞間的接觸或者添加促進(jìn)細(xì)胞生存的化合物，也能緩解這三方面的問題。
5,5-二甲基-1-吡咯啉-N-氧化物;5,5-二甲基-1-氧化吡咯啉    3317-61-1    CAS號：    5,5-DiMethyl-1-pyrroline-N-oxide;DMPO    英文名稱：
5,6,7,8-四氫-2-萘酚;β-四氫萘酚    1125-78-6    CAS號：    5,6,7,8-Tetrahydro-2-naphthol;β-Tetralol;2-Tetralol;6-Hydroxy-1,2,3,4-tetrahydronaphthalene;6-Hydroxytetralein    英文名稱：
5,6-二甲基苯并咪唑    582-60-5    CAS號：    5,6-DiMethylbenziMidazole    英文名稱：
5，7，4’－三羥基黃酮(-20℃)    520-36-5    CAS號：    Apigenin    英文名稱：
5.7-二羥基-4-甲氧基黃酮    480-44-4    CAS號：    Acacetin    英文名稱：
5’-脫氧-5’-甲硫腺苷(-20℃)        CAS號：    NA    英文名稱：
501鍵合型硅膠擔(dān)體        CAS號：    NA    英文名稱：
腫瘤細(xì)胞