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白蛋白(ALB)放免試劑盒實驗中給檢測樣本加樣的步驟詳解
1.細胞上清:前處理必須是細胞離心去除,每孔直接加100p1即可。如果濃度太高需稀釋時,用標準品稀釋液直接稀釋。
2.腦脊液:前處理必須是細胞離心去除,每孔直接加100W1即可。如果濃度太高需稀釋時,用標準品稀釋液直接稀釋。
3.血清血漿:加入50u山樣本分析緩沖液后加50u標本如稀釋量大,請將樣本與樣本分析緩神液等量加入,不足部分用標準品稀釋液補充至100u
①血清標本應(yīng)是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液
②血漿標本,推薦用EDTA的方法收集若待測樣本不能及時檢測,標本收集后請分裝凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融
③血清標本不應(yīng)添加任何防腐劑或抗凝劑
④標本應(yīng)清澈透明,檢測前樣本中如有懸浮物應(yīng)通過離心去除
⑤請勿使用溶血,高血脂或污染的標本檢測,否則結(jié)果將不準確
4.組織勻漿液的樣本:要制備過程中需要在緩沖液中加入蛋白酶抑制劑,防止蛋白成份被內(nèi)源性蛋白酧降解,造成檢測結(jié)果的值偏低。因組織勻漿液的樣本蛋白種類多,含量豐富,驗參照血清血漿標本的處理方法進行,否則就會影響實驗結(jié)果。具體是加入50u樣本分析緩沖液后加50u標本,需稀釋時,請將樣本與樣本分析緩神液等量加入,不足部分用標準品稀釋液補充至100ul。
結(jié)果判定
標準曲線的繪制與計算
用酶標儀測得每孔的光密度值(A),繪制標準曲線。通過準曲線,可準確定量樣品中ZEN 含量。
標準曲線:橫坐標為ZEN 標準濃度的對數(shù),縱坐標為百分比(即各標準品孔和樣品孔光密度值除以0 ng/mL 標準品孔光密度值(A0)再乘以100%所得, 光密度值(標準孔或樣品孔) /光密度值(A0)×100%=%(縱坐標))。相應(yīng)每個樣品的ZEN 濃度可從曲線上獲得。
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