詳細介紹
產(chǎn)品名稱:肝癌細胞;QGY-7701
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9697
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產(chǎn)品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數(shù)生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統(tǒng)的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數(shù)量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據(jù)不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
Phospho-PAK1 (Thr423)/PAK2 (Thr402) /FITC 熒光素標記磷酸化p21激活激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Goat Guinea IgG 羊抗豚鼠IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
γ1氨基丁酸受體α1抗體 GABA-ARα1 0.1ml
Goat rabbit IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標記的羊抗兔IgG 0.1ml
FLNC 英文名稱: 細絲蛋白2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-SRF (Ser103) 磷酸化生長釋放因子抗體(血清應答因子) 規(guī)格 0.1ml
Goat Guinea IgG 羊抗豚鼠IgG (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
NR1/NMDAR1 human 人N-甲基-D-天冬氨酸受體-1Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
CK5 細胞角蛋白5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh NRG1/HRG beta 1 癌細胞分化因子P45抗體 Heregulinβ 規(guī)格 0.1ml
Protein Marker 次高蛋白分子量標準(43-200kDa)/5條帶 10次(100ul)
TNIP1 英文名稱: 壞死因子誘導蛋白3相互作用蛋白1抗體 0.2ml
C8orf74 英文名稱: 8號染色體開放閱讀框74抗體 0.2ml
CK5 細胞角蛋白5抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.1ml
SOX11 英文名稱: 轉錄因子SOX-11蛋白抗體 0.2ml
FGF17 英文名稱: 成纖維細胞生長因子17抗體 0.1ml
Nogo受體作用蛋白抗體 Lingo-1 0.2ml
Rb/P105 RB/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠成視網(wǎng)膜細胞瘤抑癌蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-PLB(Ser16) 磷酸化心臟磷蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
CCP peptide (cyclic citrullinated peptide,CCP) 瓜氨酸環(huán)肽Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
肝癌細胞;QGY-7701二氫獼猴桃內酯,奇異果內酯蒼術素食物碳水化合物比色法定量檢測試劑盒
馬西替坦;ACT064992藏紅花酸果菜纖維素酶解法定量檢測試劑盒
組蛋白去乙?;敢种苿?/span>(M 344)岑酮食物纖維素酶解法定量檢測試劑盒
2-氯-5-甲酰苯;GW 9662柴胡皂苷C谷類纖維素酶解法定量檢測試劑盒
2-硝基咪唑 蟾靈 麥子纖維素酶解法定量檢測試劑盒
4-(三氟甲基)-1H-咪唑 蟾他靈豆類纖維素酶解法定量檢測試劑盒
2-甲基-4-三氟甲基咪唑 長春 酒類氨含量光譜法定量檢測試劑盒
2-氨基咪唑硫酸鹽 長春地辛 飲料氨含量光譜法定量檢測試劑盒