骨肉瘤細(xì)胞;HOS

骨肉瘤細(xì)胞;HOS公司正在銷售的產(chǎn)品：周期素依賴性酶2抗體Anti-Annexin I/FITC 熒光素標(biāo)記人、大、小鼠膜粘連蛋白 I抗體IgG
周期素依賴性酶4抗體Anti-Annexin II/FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白-2抗體IgG
周期素依賴性酶5抗體Anti-Annexin III /FITC 熒光素標(biāo)記膜粘連蛋白 Ⅲ抗體IgG
1號(hào)染色體開放閱讀框200抗體Anti-Anne

產(chǎn)品名稱：骨肉瘤細(xì)胞;HOS

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9866

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

WIG-1/FITC 熒光素標(biāo)記野生型p53誘導(dǎo)基因1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Collagen I( Collagen Type I) I型膠原蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

三磷酸腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員2抗體  ABCG2/BCRP/BXP-21 0.1ml

5HT2C Receptor 英文名稱： 5-羥色胺受體2C抗體 0.1ml

EGFL6 英文名稱： 表皮生長(zhǎng)因子樣蛋白6抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-FLT3 (Tyr842) 磷酸化FMS樣酪激酶3 規(guī)格 0.1ml

Collagen I( Collagen Type I) I型膠原蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

MAG-a/b (Myelin associated glycoprotein; L / S -MAG;) 髓鞘相關(guān)糖蛋白a/b(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 CD31/PECAM-1 血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh PAFAH1B3/PAFAHG 血小板衍化生長(zhǎng)因子γ抗體 規(guī)格 0.2ml

AXL Kit Mouse 小鼠 Axl Kinase ELISA配對(duì)抗體 ELISA

TET2 英文名稱： 甲基雙加氧酶TET2抗體 0.2ml

C20ORF141 英文名稱： 20號(hào)染色體開放閱讀框141抗體 0.2ml

 CD31/PECAM-1 血小板內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子-1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Donkey  Goat IgG/Bio 生物素標(biāo)記的驢抗羊IgG 0.1ml

phospho-FOXL2 (Ser263) 英文名稱： 磷酸化叉頭蛋白L2抗體 0.1ml

神經(jīng)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43  GAP-43 0.1ml

 Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化核糖體S6蛋白激酶β2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh phospho-SNAI2(Ser155+Ser158+Ser160+Tyr164+Tyr169) 磷酸化鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat  human IgM 羊抗人IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
骨肉瘤細(xì)胞;HOS石蠟切片組織組織化學(xué)檢測(cè)試劑盒10/20次大鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽（GIP）ELISA試劑盒,

細(xì)胞調(diào)亡DNA條帶檢測(cè)試劑盒10次大鼠胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1（IGFBP-1）ELISA試劑盒,

G-B細(xì)胞活力和凋亡檢測(cè)試劑盒50次大鼠前列腺素F（PGF）ELISA試劑盒,

ATP生物發(fā)光法細(xì)胞繁殖與毒性定量檢測(cè)試劑盒50次山羊白介素4（IL-4）ELISA試劑盒,

R-G細(xì)胞活力和凋亡檢測(cè)試劑盒50次兔Bcl-2相關(guān)X蛋白（BAX）ELISA試劑盒,

ANNEXIN V－FITC標(biāo)記法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒10/20次兔白介素17（IL-17）ELISA試劑盒,

Phalloidin－FITC標(biāo)記法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒10次兔子生長(zhǎng)素釋放多肽（GHRP）ELISA試劑盒,

核抗原－FITC標(biāo)記法細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒10次膽囊收縮素/縮膽囊素八肽（CCK-8）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)（DNA合成抑制）試劑盒20次現(xiàn)貨L-丙

細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)（DNA損傷）試劑盒20次N-乙酰-L-谷氨酰

細(xì)胞凋亡誘導(dǎo)（DNA酶抑制）試劑盒20次L-高丙乙酯鹽酸鹽

細(xì)胞衰老試劑專題D-天冬酰一水物

名稱規(guī)格1, 5-O-二咖啡酰奎寧酸 1,5-Dicaffeoylqunic acid

BrdU標(biāo)記法細(xì)胞繁殖流式細(xì)胞儀檢測(cè)試劑盒10/20次人分泌性白蛋白酶抑制因子（SLPI）ELISA試劑盒,

BrdU標(biāo)記法細(xì)胞繁殖比色法定量檢測(cè)試劑盒10/50 次人嗜酸性粒陽離子蛋白（ECP）ELISA試劑盒,

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。