支原體在光學(xué)顯微鏡下也無法看見，它被稱為小的細(xì)菌。但它沒有細(xì)胞壁，形態(tài)多樣。它可粘附在細(xì)胞表面，汲取細(xì)胞培養(yǎng)液和細(xì)胞內(nèi)的各種營(yíng)養(yǎng)，嚴(yán)重影響細(xì)胞代謝和基因表達(dá)。

科研中細(xì)胞實(shí)驗(yàn)是chang用的科研手段。由于支原體普遍為人體所攜帶，而且容易在空氣中形成氣溶膠，因此在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，常規(guī)應(yīng)至少一周檢測(cè)一次支原體。

支原體檢測(cè)有多種方法，如PCR法（含實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)）、恒溫?cái)U(kuò)增法、DNA染色法、培養(yǎng)法、支原體酶檢測(cè)法、ELISA法，以及細(xì)胞感應(yīng)變色法等。

這些方法各有長(zhǎng)短，有的結(jié)果直觀，有的省時(shí)，有的精que，有的靈敏度高。因此，這些方法應(yīng)取長(zhǎng)補(bǔ)短。

其中，設(shè)計(jì)較好的PCR方法能達(dá)到10CFU/ml的檢測(cè)限，靈敏度優(yōu)于其他方法，故為藥廠所青睞。PCR方法還有內(nèi)控對(duì)照，可反映檢測(cè)過程是否正常。同時(shí)，PCR方法能覆蓋上百種支原體物種，不容易有假陽性和假陰性，操作也較為省事，不用再去培養(yǎng)細(xì)胞，因而應(yīng)用較為多見。

有些PCR方法檢測(cè)限能達(dá)到20個(gè)基因組拷貝數(shù)/PCR反應(yīng)，也相當(dāng)靈敏。

Robustness（穩(wěn)定性或耐用性）也是方法評(píng)價(jià)的指標(biāo)之一，可反映方法的可靠性和得出結(jié)果的穩(wěn)定性。PCR方法也具有較好的穩(wěn)定性，不受操作過程的因素波動(dòng)。

PCR檢測(cè)細(xì)胞上清中的支原體時(shí)，只需2ul就可檢測(cè)。如果是用于藥廠的放行檢測(cè)，則樣本需加10ul。

圖. 支原體檢測(cè)試劑盒(PCR法)

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