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細(xì)胞消化液的操作和使用

閱讀:2751      發(fā)布時間:2023-5-17
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  Accutase 細(xì)胞消化液是包含蛋白水解酶和膠原酶活性的一種細(xì)胞消化液,不含任何動物和細(xì)菌來源組分。作為胰酶-EDTA 消化液的替換產(chǎn)品,用于從常規(guī)組織培養(yǎng)器皿、粘附包被培養(yǎng)器皿和聚合物上消化細(xì)胞。Accutase 比哺乳動物源的胰酶和膠原酶更加有效,因其所含活性成分濃度更低,對細(xì)胞傷害更小且更溫和,但能維持相同效力。
 
  使用方法:
 
  1、4 ℃或冰浴融解Accutase,之后進(jìn)行分裝保存。
 
  【注】:不可37 ℃融化本品,否則會影響酶活。
 
  2、使用不含鈣、鎂的1×Dulbecco's PBS潤洗細(xì)胞一次;
 
  3、以無菌操作的方式,按 75 cm2表面積加入10 mL的Accutase覆蓋貼壁細(xì)胞;
 
  4、重新放入37 ℃培養(yǎng)箱內(nèi),消化5-10 min;
 
  【注】:消化時間可自行調(diào)整。大部分細(xì)胞處于Accutase中高達(dá)1小時,對細(xì)胞狀態(tài)無影響。
 
  5、消化結(jié)束后,輕輕敲擊培養(yǎng)皿,使細(xì)胞與皿底部脫離,依照常規(guī)操作進(jìn)行細(xì)胞計數(shù)和傳代。
 
  【注】:不需另做清洗和酶活終止步驟。
 
  細(xì)胞消化液的注意事項(xiàng):
 
  1、Accutase™融化后4℃保存,至少2個月穩(wěn)定。不可室溫保存。也可分裝成單次用量,放到-80 ℃凍存,有效期2年。
 
  2、為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
 
  3、本產(chǎn)品主要用于科研領(lǐng)域,不宜用于臨床診斷或其他用途。

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