細(xì)胞作為生命體結(jié)構(gòu)與功能的最小獨立單元,始終是生命科學(xué)研究的基石,在探索生命奧秘的征程中占據(jù)核心地位: 1、科研領(lǐng)域:細(xì)胞的增殖分化、信號傳導(dǎo)、代謝調(diào)控等動態(tài)過程,為解析生理機(jī)制與疾病發(fā)生提供關(guān)鍵靶點,是揭秘生命進(jìn)程的核心工具; 2、藥物研發(fā):細(xì)胞模型是高通量篩選、毒性評估及藥效驗證的核心載體,從早期化合物篩選到臨床前研究,細(xì)胞活性檢測貫穿全程。隨著基因編輯(如 CRISPR)及細(xì)胞治療技術(shù)的革新,細(xì)胞更成為攻克疾病的前沿 “藥物"; 3、生產(chǎn)領(lǐng)域:細(xì)胞化身微型生物工廠,為科研工作者高效產(chǎn)出抗體、蛋白、多肽等科研試劑與藥物,驅(qū)動生命科學(xué)研究與產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)化。
“我培養(yǎng)的細(xì)胞生長狀況如何?",這是在實驗中當(dāng)細(xì)胞暴露于某種物質(zhì)或影響因素下,科研工作者要問的首要問題。這個問題可以通過對多種指征細(xì)胞活性的指標(biāo)進(jìn)行檢測來回答,接下來小編將帶大家全面了解檢測細(xì)胞活性的三大類(共六種)方法,助力大家更好的選擇合適的方法,快速搞定細(xì)胞活力檢測。 1.明星方法,基于檢測細(xì)胞中ATP含量的方式測定細(xì)胞活性
細(xì)胞內(nèi)ATP(腺苷三磷酸)的含量是細(xì)胞能量代謝的直接指標(biāo)。ATP生物發(fā)光法通過測量細(xì)胞內(nèi)ATP的水平來評估細(xì)胞活性。這種方法操作簡便,整個方案簡化成“加入-孵育-讀取"三步驟,并且具有高靈敏度和寬動態(tài)范圍的特點,尤其適合于需要高通量,且需要高靈敏度檢測的實驗。  熒光素酶法檢測細(xì)胞活性原理圖
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 特點 | abs50065 | 2D Luminescent Cell Viability Assay Kit | 100 & 1000 ml | 基礎(chǔ)款 | abs50059 | 2D/3D/Organoid ATP Viability Assay Kit | 10 & 100 ml | 針對類器官優(yōu)化 | abs50192 | CTG-LTM 2D細(xì)胞活力檢測試劑盒 | 10 & 100 ml | 信號更強(qiáng) | abs50190 | CTG-LTM 3D細(xì)胞活力檢測試劑盒 | 10 & 100 ml | 針對類器官優(yōu)化 | abs50189 | CTG-LTM 2D細(xì)胞活力檢測試劑盒2.0 | 100 & 500 ml | 更穩(wěn)定 |
2.可與CTG-L試劑聯(lián)用,基于活細(xì)胞蛋白酶活性,非裂解熒光法測定細(xì)胞活性
對于細(xì)胞活性檢測,有時需要有內(nèi)參對照,由此產(chǎn)生 multiplex 分析需求,即對同一樣本進(jìn)行多種分析方法同時檢測,且要求分析檢測方法相互不干擾,彼此檢測機(jī)理不同,如此可以進(jìn)行相關(guān)對比,從而排除實驗因素外的數(shù)據(jù)差異。本試劑檢測原理是檢測活細(xì)胞內(nèi)一種保守蛋白酶,活性僅與完好的活細(xì)胞有關(guān)??纱┩讣?xì)胞膜的活性底物進(jìn)入活細(xì)胞后,被活細(xì)胞蛋白酶切割,產(chǎn)生熒光信號,信號的強(qiáng)度與活細(xì)胞數(shù)量呈正比。當(dāng)細(xì)胞膜的完整性喪失,并漏出到周圍培養(yǎng)基后,該活細(xì)胞蛋白酶的活性會由于環(huán)境與細(xì)胞內(nèi)環(huán)境不同而消失。本試劑與CTG-L系列熒光素酶試劑盒檢測原理不同,檢測方法也不同,可以檢測到更早期的輕微的細(xì)胞損害,兩個檢測試劑相容性好,可以進(jìn)行 multiplex 檢測。此方法操作步驟簡單,“加入-孵育-讀取"三步驟即可完成實驗,適合高通量檢測。  活細(xì)胞蛋白酶活性檢測原題圖
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 特點 | abs50193 | CTF-LTM 2D熒光細(xì)胞活力檢測試劑盒 | 10 & 50×2 ml | Ex380/Em510,熒光法,非裂解 |
3.傳統(tǒng)經(jīng)典方法,基于線粒體脫氫酶還原性,測定細(xì)胞活性
基于線粒體脫氫酶活性的細(xì)胞活性檢測方法,其機(jī)制主要依賴于線粒體脫氫酶在細(xì)胞代謝過程中的關(guān)鍵作用。這種酶位于線粒體內(nèi)膜,能夠催化底物(通常是涉及氧化還原反應(yīng)的化合物)的脫氫過程,將電子轉(zhuǎn)移給特定的電子受體(如MTT試劑中的顯色底物)。
當(dāng)細(xì)胞具有活性時,線粒體功能正常,脫氫酶活性較高,能夠高效地將底物還原,使底物發(fā)生顏色變化(如MTT被還原為紫色結(jié)晶甲瓚)。而當(dāng)細(xì)胞失去活性或活性降低時,線粒體功能受損,脫氫酶活性下降,底物還原反應(yīng)程度減弱,顏色變化程度也隨之降低。
由于檢測底物不同,此類方法又可細(xì)分為: ①MTT法:使用前需兩種組分預(yù)混,工作液可被線粒體脫氫酶催化產(chǎn)生不容易水的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan),需換液溶解產(chǎn)物,測定570 nm吸光度; ②MTS法,MTT升級產(chǎn)品,使用前需兩種組分預(yù)混,工作液可被線粒體脫氫酶催化產(chǎn)生溶于水的甲瓚(Formazan)產(chǎn)物,無需更換溶液,更簡便,需測定490 nm吸光度; ③CCK-8法,MTT升級產(chǎn)品,可以直接加入到細(xì)胞樣品中,不需要預(yù)配各種成分,檢測快速,毒性非常低,其有效底物WST-8在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的脫氫酶還原生成橙黃色的甲臜染料,無需更換溶液,更簡便,需測定450 nm吸光度。 ④阿爾瑪藍(lán)(Alamar Blue)法,主要成分為刃天青(resazurin),是一種細(xì)胞膜滲透性、無毒性且弱藍(lán)色熒光的指示劑,做為MTT的替代物,氧化態(tài)的刃天青呈紫藍(lán)色且基本無熒光,其還原態(tài)產(chǎn)物試鹵靈(resorufin)轉(zhuǎn)變?yōu)榉奂t色且高度熒光,產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度與呼吸活細(xì)胞數(shù)量呈正比。阿爾瑪藍(lán)的顏色變化可通過普通分光光度計檢測吸光度變化,檢測波長為570 nm,參考波長為600 nm;阿爾瑪藍(lán)的熒光變化可通過熒光光度計檢測,激發(fā)波長在530~560 nm之間,發(fā)射波長為590 nm。  基于線粒體脫氫酶活性檢測細(xì)胞活性原理圖
貨號 | 品名 | 規(guī)格 | 特點 | abs50010 | MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒 | 500 T | 需預(yù)混,需換液 | abs50011 | 細(xì)胞增殖檢測試劑盒(MTS) | 500 & 2500 T | 需預(yù)混,無需換液 | abs50003 | CCK-8試劑盒 | 500 & 5000 T | 無需預(yù)混及換液 | abs47047610 | Alamar Blue 阿爾瑪藍(lán)細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑 | 500 & 1000 & 5000 T | 無需預(yù)混及換液,可吸光可熒光 |
以上三類就是目前檢測細(xì)胞活性的主要方法,小編也在這里匯總了這些方法的特點,更方便大家根據(jù)實際需求去選擇。
方法 | 貨號 | 品名 | 產(chǎn)品特點 | 信號半衰期 | 方法特點 | 通量 | 靈敏度 | 檢測所需時間 | ATP法檢測 | abs50065 | 2D Luminescent Cell Viability Assay Kit | 初代CTG產(chǎn)品,快速,高效 | 生物發(fā)光 >0.5h | 裂解法 終點測定 | 96/384 | 100個細(xì)胞 | 10 min | abs50059 | 2D/3D/Organoid ATP Viability Assay Kit | 初代CTG產(chǎn)品,3D類器官優(yōu)化 | 生物發(fā)光 >0.5h | 裂解法 終點測定 | 96/384 | 100個細(xì)胞 | 30 min | abs50192 | CTG-LTM 2D細(xì)胞活力檢測試劑盒 | 升級款CTG,信號更強(qiáng),窗口更大 | 生物發(fā)光 >1h | 裂解法 終點測定 | 96/384 | 50個細(xì)胞 | 10 min | abs50190 | CTG-LTM 3D細(xì)胞活力檢測試劑盒 | 升級款CTG,3D類器官優(yōu)化 | 生物發(fā)光 >1h | 裂解法 終點測定 | 96/384 | 50個細(xì)胞 | 30 min | abs50189 | CTG-LTM 2D細(xì)胞活力檢測試劑盒2.0 | 升級款CTG,穩(wěn)定性更強(qiáng) | 生物發(fā)光 >2h (2-4h) | 裂解法 終點測定 | 96/384 | 50個細(xì)胞 | 10 min | 活細(xì)胞蛋白酶 | abs50193 | CTF-LTM 2D熒光細(xì)胞活力檢測試劑盒 | 熒光檢測,可以與CTG系列產(chǎn)品進(jìn)行multiplex聯(lián)合分析 | 熒光, Ex: 380nm Em: 510nm | 非裂解 可伴隨檢測 | 96/384 | 100個細(xì)胞 | 0.5-3h | 線粒體脫氫酶 | abs50010 | MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒 | 經(jīng)典方法,需換液,加入溶劑溶解后測定; | 吸光度, OD570 nm | 非裂解 需換液,有損失風(fēng)險 | 96 | 1000個細(xì)胞 | 4h | abs50011 | 細(xì)胞增殖檢測試劑盒(MTS) | MTT升級方法,無需換液,可伴隨檢測 | 吸光度, OD490 nm | 非裂解 可伴隨檢測 | 96/384 | 500個細(xì)胞 | 1-4h | abs50003 | CCK-8試劑盒 | MTT升級方法,無需換液,可伴隨檢測,靈敏度更高 | 吸光度, OD450 nm | 非裂解 可伴隨檢測 | 96/384 | 200個細(xì)胞 | 1-4h | abs47047610 | Alamar Blue 阿爾瑪藍(lán)細(xì)胞增殖及毒性檢測試劑 | MTT升級方法,無需換液,可伴隨檢測,可選擇吸光度檢測,也可選擇熒光檢測 | 吸光度, OD570 nm 熒光, Ex: 560nm Em: 590nm | 非裂解 可伴隨檢測,可熒光,可吸光 | 96/384 | 100個細(xì)胞 | 1-4h |
今天的講解就到這里,后續(xù)還會有細(xì)胞凋亡和毒性的檢測方法匯總,敬請期待~
Absin文獻(xiàn)獎勵重磅升級!

Absin產(chǎn)品線:
爆款產(chǎn)品:試劑盒(mIHC、IHC、凋亡、ELISA、ChIP、Co-IP、TR-FRET、生化檢測、殘留檢測、多因子檢測);細(xì)胞培養(yǎng)(類器官試劑盒+基質(zhì)膠,胎牛血清+培養(yǎng)添加劑+細(xì)胞因子)、分化試劑盒;分子(mRNA合成服務(wù)+提取試劑盒);化合物大包裝;輔助試劑、耗材/儀器、定制服務(wù)(抗體/多肽/蛋白/標(biāo)記/檢測)... 特色產(chǎn)品:雞胚提取物CEE、B27、N2、霍亂毒素B亞單位CTB、牛腦垂體提取物BPE、百日咳毒素PTX、重組人胰島素Insulin、人源低密度脂蛋白LDL... |
立即詢價
您提交后,專屬客服將第一時間為您服務(wù)