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目錄:愛必信(上海)生物科技有限公司>>細(xì)胞生物學(xué)>>細(xì)胞/組織處理>> abs47048223胰蛋白酶
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更新時間:2024-07-08 19:25:57瀏覽次數(shù):1331評價
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貼壁細(xì)胞的消化:1、吸去培養(yǎng)液,用無菌的 PBS、Hanks 液或無血清培養(yǎng)液洗滌細(xì)胞一次,以去除殘余的血清。2、加入少量胰酶細(xì)胞消化液,略蓋過細(xì)胞即可,室溫放置 30 秒至 2 分鐘。不同的細(xì)胞消化時間有所不同。3、顯微鏡下觀察,細(xì)胞明顯收縮,并且肉眼觀察培養(yǎng)器皿底部發(fā)現(xiàn)細(xì)胞的形態(tài)發(fā)生明顯的變化,或者用槍吹打細(xì)胞發(fā)現(xiàn)細(xì)胞剛好可以被吹打下來此時吸除胰酶細(xì)胞消化液,加入含血清的*細(xì)胞培養(yǎng)液,吹打下細(xì)胞,即可直接用于后續(xù)實驗。4、如果發(fā)現(xiàn)消化不足,則加入胰酶細(xì)胞消化液重新消化。5、如果發(fā)現(xiàn)細(xì)胞消化時間過長,未及時吹打細(xì)胞,細(xì)胞已經(jīng)有部分直接從培養(yǎng)器皿底部脫落,直接用胰酶細(xì)胞培養(yǎng)液把細(xì)胞全部吹打下來。1000-2000g 離心 1 min,沉淀細(xì)胞,盡量去除胰酶細(xì)胞消化液后,加入含血清的*培養(yǎng)液重新懸浮細(xì)胞,即可用于后續(xù)實驗。
組織的消化:不同的組織需要消化的時間相差很大,通常以消化后可以充分打散組織為宜。
1、由于不同的組織或者細(xì)胞對胰酶的作用反應(yīng)不一樣,因此操作人員應(yīng)根據(jù)實際情況,確定最佳消化時間;消化細(xì)胞時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁和生長狀況;2、使用本產(chǎn)品時應(yīng)注意無菌操作,避免污染;3、不宜長時間放置于室溫環(huán)境或4℃長期保存;4、2℃~8℃中解凍,搖勻后使用,切忌反復(fù)凍融,用量較少時建議分裝凍存。5、本產(chǎn)品僅用于科研或進一步研究使用,不用于診斷和治療。
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