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技術(shù)文章

活化T-細(xì)胞核因子2(NFATC2)ELISA試劑盒?洗滌方法

閱讀:133          發(fā)布時間:2021-11-18

活化T-細(xì)胞核因子2(NFATC2)ELISA試劑盒洗滌方法:

1. 自動洗板機(jī):每孔加入洗滌液350μl,注入與吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板:甩盡孔內(nèi)液體,在潔凈的吸水紙上拍干,每孔加洗滌液350μl,浸泡1-2分鐘,吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體,在厚的吸水紙上拍干。洗板5次。

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,并盡量避免起泡。

1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣時將樣品加于酶標(biāo)板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。給酶標(biāo)板覆膜,37℃孵育2小時。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.棄去液體,甩干,每個孔中加入Detection Ab工作液 100μl(在使用前15分鐘內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜,37℃溫育1小時。

3.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約350μl /每孔,甩干并在吸水紙上輕拍將孔內(nèi)液體拍干。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨用前15分鐘內(nèi)配制)100μl,加上覆膜,37℃溫育1小時。

5.棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光孵育15分鐘左右(根據(jù)實際顯色情況酌情縮短或延長,但不可超過30分鐘。當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔出現(xiàn)明顯梯度時,即可終止)。

7.每孔加終止液50μl,終止反應(yīng),此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應(yīng)提前打開酶標(biāo)儀電源,預(yù)熱儀器,設(shè)置好檢測程序。

9.實驗完畢后將未用完的試劑按規(guī)定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結(jié)束。

小鼠環(huán)磷酸腺苷(mouse cAMP)

小鼠環(huán)磷酸鳥苷(mouse cGMP)

小鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(mouse CNTF)

小鼠可溶性CD36分子(mouse sCD36)

小鼠sCD40配體(mouse sCD40 Ligand)

小鼠CD34(mouse CD34)

小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(mouse sCD40L)

小鼠補(bǔ)體C3a(mouse C3a)

小鼠補(bǔ)體C5a(mouse C5a)

小鼠血清總補(bǔ)體(mouse CH50)

小鼠肌酸激酶(mouse CK)

小鼠肌酸激酶同工酶(mouse CK-MB)

小鼠羥甲基賴氨酸(mouse CML)

小鼠C-肽(mouse C-peptide)

小鼠心肌鈣蛋白T(mouse cTnT)

小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(mouse G-CSF)

小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse GM-CSF)

小鼠巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse M-CSF)

小鼠細(xì)胞色素C(mouse Cytochrome C)

小鼠雙鏈DNA(mouse dsDNA)

小鼠多巴胺(mouse Dopamine)

小鼠二胺氧化酶(mouse DAO)

小鼠D-二聚體(mouse D-Dimer)

小鼠二肽基肽酶Ⅳ(mouse DPP4)

小鼠β內(nèi)啡肽(mouse β-EP)

小鼠表皮生長因子(mouse EGF)

小鼠表皮生長因子受體(mouse EGF R)

小鼠內(nèi)皮素-1(mouse Endothelin-1)

小鼠噬酸性粒細(xì)胞趨化因子(mouse Eotaxin)

小鼠促紅細(xì)胞生成素(mouse EPO)


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