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詳細介紹
產(chǎn)品屬性：
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
| 小鼠胚胎肝母細胞 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | GOY-01X1331 |
商品介紹：
名稱 小鼠胚胎肝母細胞 2.組織來源：胚胎；肝臟 3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 4.細胞簡介： 小鼠胚胎肝母細胞分離自胚胎肝組織；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用；肝臟也消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機體內臟里最大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟起源于腹側前腸內胚層細胞（一種多潛能干細胞）。在 ED8.5 的小鼠和 ED9.5 的大鼠，前腸的原始上皮細胞接觸心肌中胚層后快速增殖，形成肝原基。大約1d后，原始上皮細胞侵入原始橫膈，繼續(xù)分化為幼稚肝臟上皮細胞，這些細胞先表達 AFP 然后是ALb。幼稚肝臟上皮細胞很快成熟，并進一步分化為肝細胞或膽管上皮細胞，因為此期的肝臟上皮細胞其具有向這兩種肝實質細胞雙向分化的潛能，所以又稱肝母細胞。 5.方法簡介： 實驗室分離的小鼠胚胎肝母細胞采用膠原酶消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測： 實驗室分離的小鼠胚胎肝母細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養(yǎng)信息： 包被條件鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2） 培養(yǎng)基含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 產(chǎn)品貨號CM-M224 換液頻率每2-3天換液一次 生長特性貼壁 細胞形態(tài)上皮細胞樣 傳代特性可傳1-2代左右 消化液0.25%胰蛋白酶 培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5% |
冷凍保存細胞之方法？
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
實驗要點及說明：
1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；
2．所使用的蓋玻片應該為優(yōu)質玻璃，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；
5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將成1mm3左右大??；
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
食蟹猴 / 恒河猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
食蟹猴 IFNGR / IFNGR1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CD150 / SLAM / SLAMF1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 SIRP alpha / CD172a 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
大鼠 CLEC4D / CLECSF8 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
雪貂 IFNG / Interferon Gamma 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠 GM-CSF / CSF2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 細胞裂解液 (陽性對照) (變性)
小鼠胚胎肝母細胞2-氯乙基 98%醋酸丁酸纖維素 30-35%Tie2(Porcine tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2) 上皮生長因子樣域激2抗原
1-氯-3-甲氧基烷 98%1,4-環(huán)己烷二甲（順+反異構體混合物） 99%Rarres2/TIG2/Chemerin(Retinoic acid receptor responder protein 2) 受體應答蛋白2抗原
4-基苯甲酸 98%一縮二 99%TLR3 (Toll-like receptor 3) Toll樣受體3抗原
4-氯丁酰氯 98%二乙乙 99%TLR4/CD284 (Toll-like receptor 4) Toll樣受體4抗原
6-氯-1-己 95%N,N-二甲基乙酰 ≥99.8%TLR5/CD285 (Toll-like receptor 5) Toll樣受體5抗原
98%N,N-二甲基乙 CP,98.0% TM(Thrombomodulin) 血栓調節(jié)蛋白多肽
2,3,5-基吡 99%正癸酸 CP，98%Tn-C(Tenascin-C)C-Terminus 腱糖蛋白-C(固生蛋白)C端抗原
二正 99%二甲基二甲氧基硅烷 97%TNF-alpha 腫瘤壞死因子-α抗原
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