DNA電泳分子量標準系列

DNA電泳分子量標準系列原理是由一對引物介導，能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增，經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增，擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴增效率＝倍，使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。

特異性強

　　PCR反應的特異性決定因素為：

　?、僖锱c模板DNA特異正確的結(jié)合；

　?、趬A基配對原則；

　?、跿aq DNA聚合酶合成反應的忠實性；

   ④靶基因的特異性與保守性。

組成及試劑配制:

1、酶標板：一塊（96孔）

2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

特點 ：

本試劑盒可用于檢測食品或其他材料中是否有的成分?，F(xiàn)代食品加工工藝改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性，因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無法對食材的真?zhèn)芜M行準確的鑒定。同時部分食材還有致敏性，因此基于基因檢測的快速靈敏的食材來源檢測技術(shù)將對食品監(jiān)管和安全提供重要的保障。本產(chǎn)品就是為滿足這一需求根據(jù) PCR 原理開發(fā)的產(chǎn)品，它具有下列特點：

1. 一管式操作，用戶只需要提供樣品即可。

2. 根據(jù)大豆熱休克蛋白基因保守區(qū)域設(shè)計引物，能專一性檢測出樣品中的大豆成分，但不能檢測其他非大豆成分。

3. 快速，整個檢測過程（按一個樣品計）所需時間僅為 2.0 小時。

4. 只需要普通 PCR 儀和凝膠電泳儀，無需配置貴重儀器設(shè)備。

5. 對混合樣品中大豆成分的檢測下限為 0.1%，對樣品中大豆成分的核酸檢測下限為 1.0ng/μL。

6. 本只能用于科研，足夠 50 次 40uL 體系的常規(guī) PCR。

特點優(yōu)勢：

    1. 特異性：所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。

    2.   重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。

    3.   靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。

    4.   實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。

    5.   優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。

    6.   優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結(jié)果。

反應五要素:

參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

angiotension Ⅱ receptor 1 Antibody,ATⅡR1 Ab ELISA Kit貓FT4 elisa檢測試劑盒Coniferyl alcohol

ANGⅡR-1 ELISA Kit貓GH elisa檢測試劑盒Methyl 3,4,5-trimethoxycinnamate

angiotensin Ⅱ,ANG-Ⅱ ELISA Kit貓IFN-α elisa檢測試劑盒1-(4-Hydroxyphenyl)propan-1-one

angiotensin II(2-7)ELISA Kit貓IL-12 elisa檢測試劑盒Cinnamyl cinnamate

Angiotensin Ⅰ Converting Enzyme,ACEⅠ ELISA Kit貓IL-2 elisa檢測試劑盒Syringin

angiotension I receptor Antibody,ANG-ⅠR antibody ELISA Kit貓IL-4 elisa檢測試劑盒Docosyl caffeate

angiotension Ⅰ,Ang-Ⅰ ELISA Kit貓IL-6 elisa檢測試劑盒Cinnamic acid

Angiotension 1-7,Ang1-7 ELISA Kit貓IL-6R elisa檢測試劑盒2,3-Dihydroxy-3-(4-hydroxyphenyl)propanoic acid

VIP ELISA Kit貓LH elisa檢測試劑盒Dihydroconiferyl alcohol

AMOT ELISA Kit貓MCP-1 elisa檢測試劑盒Coniferin

Trichinella antibody ELISA Kit貓P27 elisa檢測試劑盒3-(4-Hydroxyphenyl)-1-propanol

bromodeoxyuridine,BrdU ELISA kit貓PROG elisa檢測試劑盒3-(4-Hydroxy-3-methoxyphenyl)propyl tetracosanoate

Androstenedione,ASD ELISA Kit貓PTH elisa檢測試劑盒Octacosyl (E)-ferulate

thymus-dependent antigen,TD-Ag ELISA Kit貓T elisa檢測試劑盒β-Hydroxypropiovanillone

Thymopentin,TP-5 ELISA Kit貓T3 elisa檢測試劑盒o-Hydroxycinnamaldehyde

Thymosin β4 ELISA Kit貓T4 elisa檢測試劑盒trans-4-Hydroxycinnamic acid
DNA電泳分子量標準系列PLC gamma 2(Tyr753)  磷酸化磷酯酶Cγ2抗體規(guī)格 0.1ml

PLC gamma 2 (Tyr759)  磷酸化磷酯酶Cγ2抗體規(guī)格 0.1ml

PLC gamma 1/PLCG1(Tyr775)  磷酸化磷酯酶Cγ1抗體規(guī)格 0.1ml

PLC gamma 1(Ser1248)  磷酸化磷酯酶Cγ1抗體規(guī)格 0.1ml

PLC gamma 1 (Tyr771)  磷酸化磷酯酶Cγ1抗體規(guī)格 0.1ml

PLC beta3 (Ser537)  磷酸化磷酯酶Cβ3抗體規(guī)格 0.1ml

PLC beta3 (Ser1105)  磷酸化磷酯酶Cβ3抗體規(guī)格 0.1ml
使用方法：

注：所有試劑使用前需*解凍，混合均勻，6,000rpm離心數(shù)秒后使用。

1.樣本處理（樣本處理區(qū)）

待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等，具體提取方法請參照相關(guān)說明書；陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取，可直接使用。

2. 擴增試劑準備（PCR前準備區(qū)）

取N個（N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品）PCR反應管，每管分別加入FMD RT-PCR反應液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應液、RT-PCR酶所需總量，兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應管)。

組分每頭份用量FMD  RT-PCR反應液19 μlRT-PCR酶。

1 .將所有PCR反應管于6,000rpm離心30s，轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。

2.加樣（樣本處理區(qū)）

3.在上述的PCR反應管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl，蓋緊管蓋，于6,000rpm離心10s，轉(zhuǎn)移至擴增區(qū)。