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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | GOY-XP4733 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工 |
| 主要用途 | 僅用于科研 |
詳細(xì)介紹
細(xì)胞實(shí)驗(yàn)步驟：
一、細(xì)胞復(fù)蘇
1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養(yǎng)瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺(tái)，紫外燈照射30min后再通風(fēng)30min；
2.預(yù)熱培養(yǎng)基；
3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；
4.將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出；
5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動(dòng)使其融化；
6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；
7.吸取9ml培養(yǎng)基到50ml離心管中；
8.用1ml槍頭吸取解凍的細(xì)胞懸液于離心管中；
9.1000r/min,離心5min；
10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺(tái)；
11.吸棄上清液；
12.吸取1ml培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使細(xì)胞分布均勻，并做好標(biāo)記；
13.在顯微鏡下觀察復(fù)蘇的細(xì)胞密度及狀態(tài)；
14.將細(xì)胞放回二氧化碳培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | MDA-MB-436 細(xì)胞專用培養(yǎng)基 | 規(guī)格 | 1*125ml/500ml |
英文名稱 | MDA-MB-436 | 貨號(hào) | GOY-XP4733 |
產(chǎn)品介紹
MDA-MB-436細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過(guò)長(zhǎng)期測(cè)試，本產(chǎn)品可保持MDA-MB-436細(xì)胞優(yōu)良的生長(zhǎng)狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含 MDA-MB-436 細(xì)胞生長(zhǎng)所需的各種成分，無(wú)需添加任何成分，可直接用于MDA-MB-436 細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分
L15 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 444.5 ml
特級(jí)胎牛血清 50 ml
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?
注意事項(xiàng)：
僅限科研用。
培養(yǎng)體系中的一些組分是對(duì)人體健康有害的物質(zhì)，請(qǐng)不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來(lái)水沖洗即可。
細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
?細(xì)胞復(fù)蘇?：
從液氮罐中取出凍存細(xì)胞，迅速放入37℃水浴中解凍。
解凍后，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到含有新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，輕輕搖動(dòng)使細(xì)胞均勻分布。
放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細(xì)胞換液?：
吸除或倒掉培養(yǎng)皿內(nèi)的舊培養(yǎng)液。
加入PBS緩沖液，輕輕漂洗細(xì)胞，以去除懸浮在細(xì)胞表面的碎片，重復(fù)幾次。
加入新的培養(yǎng)基。
?細(xì)胞傳代?：
當(dāng)細(xì)胞長(zhǎng)到80%~90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
吸除或倒掉瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液，加入PBS緩沖液漂洗。
加入消化液，輕輕搖動(dòng)使消化液流遍所有細(xì)胞表面。
將培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱中靜止幾分鐘，觀察細(xì)胞變化。當(dāng)細(xì)胞間隙增大后，加入含有血清的培養(yǎng)液終止消化。
吹打細(xì)胞使其成為懸液，轉(zhuǎn)移到離心管中離心。
棄上清，加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞。
按比例分裝到新的培養(yǎng)皿中，補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基。
做好標(biāo)記，放入37℃、5%CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
?細(xì)胞凍存?：
選擇對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞進(jìn)行凍存。
將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到離心管中離心，棄上清。
加入適量的凍存液（如90%的培養(yǎng)基+10%的DMSO），輕輕吹打重懸細(xì)胞。
將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到冷凍保存管中，標(biāo)記后放入程序降溫盒，再放入-80℃冰箱凍存。幾小時(shí)后或過(guò)夜轉(zhuǎn)至液氮罐保存。
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