HaCat+luc 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

HaCat+luc 細(xì)胞專用培養(yǎng)基公司正在出售的產(chǎn)品：LS174T細(xì)胞，人結(jié)腸癌細(xì)胞 人黑色素瘤細(xì)胞,SK37細(xì)胞 人成骨肉瘤細(xì)胞;Saos-2 成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基FM-sf-prf H9c2大鼠心肌細(xì)胞(ATCC來源) 人髓母細(xì)胞瘤，D341 Med細(xì)胞 NCI-H226 [H226](人肺癌細(xì)胞) 兔原代胃成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基 小鼠原代半月板纖維軟骨細(xì)胞培養(yǎng)基

?無菌操作?：細(xì)胞培養(yǎng)需在無菌環(huán)境下進(jìn)行，使用前需對超凈工作臺進(jìn)行紫外線照射滅菌，定期清潔培養(yǎng)箱。實(shí)驗(yàn)人員需更換工作服、鞋套，戴口罩、手套。

?器材滅菌?：玻璃器皿、金屬器械等可采用高壓蒸汽滅菌，塑料制品則多選擇環(huán)氧乙烷滅菌或購買已滅菌產(chǎn)品。

?試劑選擇?：所用培養(yǎng)液、血清、緩沖液等試劑應(yīng)無菌、無污染，使用前需進(jìn)行無菌檢測。不同細(xì)胞對培養(yǎng)液成分要求有差異，應(yīng)按細(xì)胞類型選擇合適培養(yǎng)液。

?培養(yǎng)條件?：多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞適宜培養(yǎng)溫度為37℃，偏差應(yīng)控制在±0.5℃。培養(yǎng)箱應(yīng)保持良好密封性，定期檢查氣體濃度與流量，細(xì)胞培養(yǎng)通常需5%CO2以維持培養(yǎng)液pH值穩(wěn)定。培養(yǎng)箱內(nèi)濕度應(yīng)保持在95%左右。

?日常觀察?：每天在顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)、生長狀態(tài)與培養(yǎng)液顏色變化。

?定期檢測?：定期對細(xì)胞進(jìn)行支原體、細(xì)菌、真菌等污染檢測。

HaCat+luc 細(xì)胞專用培養(yǎng)基

產(chǎn)品介紹

HaCat+LUC細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化，經(jīng)過長期測試，本產(chǎn)品可保持HaCat+LUC細(xì)胞優(yōu)良的生長狀態(tài)。

本產(chǎn)品中已包含HaCat+LUC細(xì)胞生長所需的各種成分，無需添加任何成分，可直接用于HaCat+LUC細(xì)胞的培養(yǎng)。

產(chǎn)品主要成分

DMEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基                              445 ml

特級胎牛血清                                   50 ml

P/S                   5 ml

運(yùn)輸和保存

運(yùn)輸：放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸

保存方法：2℃～8℃，避光，保存2個(gè)月；?

注意僅限科研用。

培養(yǎng)體系中的一些組分是對人體健康有害的物質(zhì)，請不要用暴露的皮膚接觸培養(yǎng)體系的液體和有培養(yǎng)體系的液體殘留的容器內(nèi)部；這部分有害物質(zhì)的濃度和危害性都較低，如有接觸，立即用自來水沖洗即可。

復(fù)蘇

1) 將恒溫水浴鍋中的水預(yù)熱到 37℃；

2) 準(zhǔn)備一支 15ml 離心管，加入 5ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基，放入 37℃水浴鍋中預(yù)熱；

3) 戴上護(hù)目鏡，厚毛線手套后，從液氮罐中取出要復(fù)蘇的細(xì)胞，盡快轉(zhuǎn)入 37℃恒溫水浴鍋中

復(fù)溫晃動(dòng)凍存管以提高復(fù)溫速率；

4) 將融化了的凍存管中的細(xì)胞吸入事先準(zhǔn)備的離心管中，混勻后，1000rpm 離心 5min；

5) 準(zhǔn)備一個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，寫上細(xì)胞名稱、日期，再加入 4ml 培養(yǎng)基；

6) 離心完成后棄去上清，用 1ml 培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后，轉(zhuǎn)入 T-25 細(xì)胞培養(yǎng)中，混勻后轉(zhuǎn)入

CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)靜置。

傳代 （細(xì)胞傳代建議一傳二）

1) 當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 85%以上時(shí)，可進(jìn)行傳代。

2) 在生物安全柜內(nèi)，打開培養(yǎng)瓶瓶口，收集瓶內(nèi)的培養(yǎng)基；

3) 向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入 3ml 無菌的 1×PBS 后，水平放置培養(yǎng)瓶，使PBS 能夠浸潤到培養(yǎng)瓶底面上所有的面積，吸棄 PBS；

4) 向瓶內(nèi)加入消化液 1ml，浸潤底面后放入 37℃ CO2培養(yǎng)箱中孵育 1~2min；

5) 孵育完成后在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞是否變圓飄起，若全部消化下來則直接向培養(yǎng)瓶內(nèi)加入2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基中，將懸液吸入 15ml 離心管；

① 準(zhǔn)備一個(gè)無菌的 15ml 離心管，加入 2ml 含 10%FBS 的培養(yǎng)基；

② 將消化下來的細(xì)胞吸入①中的離心管內(nèi)中和（避免吹打③）；向之前消化的培養(yǎng)瓶中加入 1ml 繼續(xù)消化 2min 左右，輕拍培養(yǎng)瓶，95%左右細(xì)胞脫。

6) 1000rpm 離心 5min；

7) 準(zhǔn)備兩個(gè)新的 T-25 培養(yǎng)瓶，各加入 4ml培養(yǎng)基。

8) 離心完成后，棄上清，用 2ml 培養(yǎng)基重懸離心細(xì)胞，將重懸后的細(xì)胞轉(zhuǎn)入 2 個(gè) T-25 培養(yǎng)瓶，每個(gè)培養(yǎng)瓶各 1ml；

9) 水平放置培養(yǎng)瓶，震蕩混勻后，將培養(yǎng)瓶置于 37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。

凍存 （細(xì)胞凍存建議每瓶 T25 凍一支）

1）~6）參照傳代步驟

7）離心完成后，棄上清，用 1mL 凍存液重懸細(xì)胞沉淀，然后轉(zhuǎn)入 1.8ml 凍存管中；

8）將凍存管轉(zhuǎn)入填充滿異丙醇的程序降溫盒中，之后轉(zhuǎn)入-80℃冰箱中過夜降溫；

9）第二天，取出降溫完成的序降溫盒中的凍存管，盡快轉(zhuǎn)入液氮罐中保存。

豚鼠白介素1α(IL1α)試劑盒 ，英文名： IL1α ELISA Kit

Human mannose (Mannose) ELISA Kit 人甘露糖(Mannose)試劑盒

rabbitHyaluronicacid,HAELISAKit 兔子透明質(zhì)酸(HA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforATMA/TMAB(HumanAi-ThyroidMicrosomeAibody)ELISAKIT人抗甲狀腺微粒體抗體

線粒體復(fù)合物II蛋白表達(dá)ELISA定量試劑盒25次

Rabbitai-braiissueaibody,ABAbELISAKit兔抗腦組織抗體(ABAb)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA 試劑盒

Human ansforming growth factor beta 1 (TGF- beta 1) ELISA Kit 人轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGF-β1)試劑盒

HumansolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit 人可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumanIerleukin10,IL-10試劑盒人白介素10(IL-10)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織抗壞血酸比色法定量試劑盒20次

Humanisletamyloidpolypeptide,IAPPELISAKit人胰島淀粉樣多肽(IAPP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人粘蛋白2(MUC2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human MUC2 (Mucin 2) ELISA Kit

人粘蛋白20(MUC20)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human MUC20 (Mucin 20) ELISA Kit

人腦素受體(C1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human C1 (Cannabinoid Receptor 1, Brain) ELISA Kit

人腺苷酸環(huán)化酶相關(guān)蛋白1(CAP1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒   Human CAP1 (Adenylate Cyclase Associated Protein 1) ELISA Kit

泛素結(jié)合酶E2蛋白A抗體

乳腺癌抗雌激素耐藥蛋白1

HA重組甲型流感 H7N9 (A/Pigeon/Shanghai/S1069/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

phospho-NFKB p65 (pSer536 0.5mgphospho-NFKB p65 (pSer536) peptide 0酸化細(xì)胞核因子/0酸化k基因結(jié)合核因子抗原

CRABP2重組人 CRABP2 蛋白 Protein

GYPA Protein Human 重組人 GYPA / CD235a / Glycophorin A 蛋白

PVR???

HaCat+luc 細(xì)胞專用培養(yǎng)基Shiga-like toxin IIe variant subunit A[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素菌體蛋白(O139菌型 0.5mgShiga-like toxin IIe variant subunit A[Escherichia coli 0139] 大腸桿菌志賀樣毒素菌體蛋白(O139菌型)

IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / IL17F 蛋白

HA重組甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

F11R Protein Human 重組人 JAM-A / F11R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

REG1A重組人 REG1A / PSPS 蛋白 Protein