伯氏疏螺旋體（BB）核酸檢測(cè)試劑盒方法

伯氏疏螺旋體（BB）核酸檢測(cè)試劑盒方法是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強(qiáng)劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進(jìn)行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。

反應(yīng)五要素:
伯氏疏螺旋體(BB)核酸檢測(cè)試劑盒方法參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

產(chǎn)品名稱	規(guī)格	分類
伯氏疏螺旋體(BB)核酸檢測(cè)試劑盒方法	48T	PCR檢測(cè)試劑盒

樣本采集、存放及運(yùn)輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h，-70℃以下可長(zhǎng)期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運(yùn)輸：采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
伯氏疏螺旋體(BB)核酸檢測(cè)試劑盒方法15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書                                   1份

3-氯-5-硝三氟甲分子式：225.55分子量： C7H3ClF3NO2英文名稱：3- -5- nitro threeCAS號(hào)：401-93-4

4-硝吲唑分子式：163.13分子量： C7H5N3O2英文名稱：4- nitroindazoleCAS號(hào)：2942-40-7

二十三英文名稱：Twenty-three acidCAS號(hào)：2433-96-7分子式：354.61分子量： C23H46O2

1,3-二氟分子式：114.09分子量： C6H4F2英文名稱：Two - 1,3-CAS號(hào)：372-18-9

4-溴甲砜分子式：235.1分子量： C7H7BrO2S英文名稱：4- bromo methyl sulfoneCAS號(hào)：3466-32-8

1-異喹啉分子式：205.26分子量： C15H11N英文名稱：1- phenyl ISOCAS號(hào)：3297-72-1

2'--1,1',3',1''-三聯(lián)分子式：356.2分子量： C18H13I英文名稱：2'- -1,1', 3', 1''- threeCAS號(hào)：82777-09-1

4,8-二氯-2-三氯甲喹啉分子式：315.41分子量： C10H4Cl5N英文名稱：4,8- two -2- threeCAS號(hào)：93600-66-9

糠莫美他松英文名稱：Bran acid is not the United States he is pineCAS號(hào)：83919-23-7分子式：615.5分子量： C32H32Cl2O8

4,7-二溴-5-氟-2,1,3-并噻二唑分子式：311.95分子量： C6HBr2FN2S英文名稱：4,7- dibromo -5- fluoro -2,1,3- benzo thiadiazole was twoCAS號(hào)：1347736-74-6

派洛寧Y英文名稱：Luoning YCAS號(hào)：92-32-0分子式：302.81分子量： C17H19N2OCl

伯氏疏螺旋體(BB)核酸檢測(cè)試劑盒方法NCX1/SLC8A1  鈉鈣交換蛋白1抗體 0.1ml

IL-17RD  白介素17受體D抗體 0.1ml

CD8 alpha  CD8抗體 0.1ml

Salmonella typhimurium O  傷寒沙門氏菌體蛋白O抗原抗體 0.2ml

phospho-DOK1(Tyr362)  磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體 0.1ml

CD44v6  CD44V6抗體 0.1ml

CD23/Fc EpsilonR II  CD23抗體 0.2ml

C12orf23  第12號(hào)染色體開放閱讀框23抗體 0.2ml

Menin/Men1  Menin抑癌蛋白抗體 0.2ml

IGF1R/CD221  胰島素樣生長(zhǎng)因子I受體抗體 0.1ml

Donkey Anti-human IgG/PE-Cy3  PE-Cy3標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml

NARG2  谷氨酸受體調(diào)節(jié)蛋白2抗體 0.2ml