牛科研（BCV）核酸檢測試劑盒圖片

?？蒲?BCV)核酸檢測試劑盒圖片使用及效果：
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

樣本采集、存放及運輸：
1、樣本采集：各類型樣本按照常規(guī)方法采集；
2、存放：樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過72h，-70℃以下可長期保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融（zui多凍融3次）；
3、運輸：采用泡沫箱加冰密封進行運輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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自備物品：
?？蒲?BCV)核酸檢測試劑盒圖片15毫升錐形離心管：用于制備樣品的容器
比色皿：用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板：用于比色的容器
分光光度儀：用于比色分析
酶標(biāo)儀：用于微量樣品比色分析
儲存條件：
14℃或－20℃
準(zhǔn)備物品
清理液（A）                                   毫升
染色液（t B）                                   微升
稀釋液（C）                                   毫升
溶解液（tD）                                   毫升
產(chǎn)品說明書                                   1份

鬼臼毒素英文名稱：PodophyllotoxinCAS號：518-28-5分子式：414.41188分子量：C22H22O8

4-溴-2-甲吡分子式：172.02分子量： C6H6BrN英文名稱：4- -2- methyl pyridineCAS號：22282-99-1

丙二丁英文名稱：Propylene glycol butyl etherCAS號：29387-86-8分子式：132.20074分子量： C7H16O2

氯代氫三(三膦)釕(II)甲加合物分子式：分子量：英文名稱：Three (three phenyl phosphate) ruthenium (II) toluene adductCAS號：217661-36-4

溶劑藍35英文名稱：Solvent blue 35CAS號：17354-14-2分子式：350.45分子量： C22H26N2O2

鈣黃綠素英文名稱：CalceinCAS號：1461-15-0分子式：622.55分子量： C30H26N2O13

2-噻唑啉分子式：102.16分子量： C3H6N2S英文名稱：2- aminothiazolineCAS號：1779-81-3

隱綠原英文名稱：Chlorogenic acidCAS號：905-99-7分子式：354.31分子量：C16H18O9

5-溴-2-羥甲吡分子式：188.02分子量： C6H6BrNO英文名稱：5- bromide -2-CAS號：88139-91-7

3--4-吡唑分子式：108.1分子量： C4H4N4英文名稱：3- -4- cyano amino pyrazoleCAS號：16617-46-2

1,8-二氮-9-芴酮(DFO)英文名稱：1,8- two n -9- fluorenone (DFO)CAS號：54078-29-4分子式：182.18分子量： C11H6N2O

牛科研(BCV)核酸檢測試劑盒圖片phospho-p107/RBL1(Ser975)  磷酸化視網(wǎng)膜母細胞瘤樣蛋白p107抗體 0.1ml

EST1A  端粒酶結(jié)合蛋白EST1A抗體 0.2ml

Rabbit Anti-pig IgG/Cy3  Cy3標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml

Mouse Anti-rabbit IgG/PE-Cy7  PE-Cy7標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 0.1ml

Phospho-TLK1(Ser695)  磷酸化調(diào)節(jié)染色體組裝激酶1抗體 0.1ml

ERdj5/DNAJC10  Erdj5/DNAJC10蛋白抗體 0.2ml

ENC1/KLHL35  外胚層神經(jīng)皮層蛋白1抗體 0.2ml

Caspase 2  半胱胺酸蛋白酶-2抗體 0.1ml

BMPER  BMP內(nèi)皮細胞調(diào)節(jié)蛋白抗體 0.2ml

THRA1  甲狀腺激素受體α1抗體 0.2ml

RAP1GDS1  G蛋白GTP-GDP解離刺激因子1抗體 0.2ml

Mouse Anti-human IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗人IgG 0.1ml

反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是末及倒數(shù)第二個堿基，應(yīng)嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。