詳細(xì)介紹
樣本采集、存放及運(yùn)輸:
1、空腸彎曲菌(CJ)核酸檢測(cè)試劑盒方法樣本采集:各類(lèi)型樣本按照常規(guī)方法采集;
2、存放:樣本在2~8℃條件下保存應(yīng)不超過(guò)72h,-70℃以下可長(zhǎng)期保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融(zui多凍融3次);
3、運(yùn)輸:采用泡沫箱加冰密封進(jìn)行運(yùn)輸。
普通PCR反應(yīng)流程:
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使用及效果:
將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子(約1/4 黃豆大小)或直徑約為0.5-0.7 cm(或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保溫10-15 分鐘,加入0.1 mL 溶液B,混勻,直接取上清液(相當(dāng)于PCR 體積的1/10)作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 分類(lèi) |
空腸彎曲菌(CJ)核酸檢測(cè)試劑盒方法 | 48T | PCR檢測(cè)試劑盒 |
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標(biāo)板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標(biāo)儀:用于微量樣品比色分析
儲(chǔ)存條件:
14℃或-20℃
準(zhǔn)備物品
清理液(A) 毫升
染色液(t B) 微升
稀釋液(C) 毫升
溶解液(tD) 毫升
產(chǎn)品說(shuō)明書(shū) 1份
反應(yīng)五要素:
空腸彎曲菌(CJ)核酸檢測(cè)試劑盒方法參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。
直接紅81英文名稱(chēng):Direct red 81CAS號(hào):259636分子式:675.6分子量: C29H19N5Na2O8S2
乙紅英文名稱(chēng):Yi JihongCAS號(hào):76058-33-8分子式:297.35分子量: C17H19N3O2
3,5-二氟吡分子式:115.08分子量: C5H3F2N英文名稱(chēng):3,5- twoCAS號(hào):71902-33-5
溴酚紅英文名稱(chēng):DibromophenolCAS號(hào):2800-80-8分子式:512.17分子量: C19H12Br2O5S
克拉維酸鉀分子式:237.25分子量: C8H8KNO5英文名稱(chēng):Carat potassiumCAS號(hào):61177-45-5
1-甲-5-硝-2-羥甲咪唑分子式:157.13分子量: C5H7N3O3英文名稱(chēng):1- methyl -5- nitro -2-CAS號(hào):936-05-0
溴分子式:157.01分子量: C6H5Br英文名稱(chēng):BromophenylCAS號(hào):108-86-1
4--3,5-二氯吡分子式:163分子量: C5H4Cl2N2英文名稱(chēng):4- two -3,5-CAS號(hào):22889-78-7
9-甲酰咔唑分子式:271.32分子量: C19H13NO英文名稱(chēng):9- benzoyl carbazoleCAS號(hào):19264-68-7
石吊蘭素英文名稱(chēng):NevadensinCAS號(hào):152743-19-6分子式:344.32分子量:C18H16O7
6-氯-4-羥豆素英文名稱(chēng):6- -4- hydroxyCAS號(hào):19484-57-2分子式:196.59分子量: C9H5ClO3
空腸彎曲菌(CJ)核酸檢測(cè)試劑盒方法Donkey anti-human IgG whole serum 驢抗人IgG抗血清 1ml
Secretin receptor 分泌素受體抗體 0.2ml
NIR1/RDGBA3 膜相關(guān)磷脂轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體 0.2ml
PAR3 非典型蛋白激酶C特定相互作用蛋白抗體 0.1ml
PELO PELO蛋白抗體 0.2ml
CACH3/CaV1.3 L型鈣通道蛋白a1亞型3抗體 0.2ml
PHAPI2/APRIL 酸性核磷蛋白32家族B抗體 0.2ml
SERPIN A11 絲氨酸蛋白酶抑制劑A11抗體 0.2ml
NFAM1/CNAIP NFAM1抗體 0.2ml
phospho-ROCK2(Thr396) 磷酸化Rho相關(guān)蛋白激酶2抗體 0.1ml
Nociceptin receptor 孤菲肽受體/痛敏肽受體抗體 0.2ml
RAR gamma/Retinoic Acid Receptor gamma 維受體γ抗體 0.2ml