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組織相容性2-K1-K 區(qū)進(jìn)口試劑盒?操作步驟

閱讀:224          發(fā)布時(shí)間:2021-10-12

組織相容性2-K1-K 區(qū)進(jìn)口試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。

2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。

5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。

7. 溫育:操作同3。

8. 洗滌:操作同5。

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。

11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

凋亡相關(guān)因子配體(FASL)重組蛋白

凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)重組蛋白

毒蕈堿型膽堿受體M1(CHRM1)重組蛋白

毒蕈堿型膽堿受體M2(CHRM2)重組蛋白

端粒酶關(guān)聯(lián)蛋白1(TEP1)重組蛋白

多巴胺受體D1(DRD1)重組蛋白

多巴胺受體D2(DRD2)重組蛋白

多巴胺受體D3(DRD3)重組蛋白

多巴色素異構(gòu)酶(DT)重組蛋白

多功能肽酶2(LMP2)重組蛋白

多聚免疫球蛋白受體(PIGR)重組蛋白

多效生長因子(PTN)重組蛋白

多藥耐藥關(guān)聯(lián)蛋白1(MRP1)重組蛋白

二胺氧化酶(DAO)重組蛋白

二氫二醇脫氫酶2(DDH2)重組蛋白

二氫硫辛酸脫氫酶(DLD)重組蛋白

二氫硫辛酸轉(zhuǎn)乙酰基酶(DLAT)重組蛋白

發(fā)動(dòng)蛋白2(DNM2)重組蛋白

泛素(Ub)重組蛋白

泛素激活酶樣蛋白(UBE1L)重組蛋白

泛素交叉反應(yīng)蛋白(UCRP)重組蛋白

泛素結(jié)合酶E2A(UBE2A)重組蛋白

泛素連接酶E3A(UBE3A)重組蛋白

防御素β103B(DEFβ103B)重組蛋白


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