MTH1(NUDT1)抑制劑（TH588）

MTH1(NUDT1)抑制劑（TH588）公司*的產(chǎn)品：M-CSF/FITC 熒光標(biāo)記巨噬克隆激因子抗體IgG纖維 18-22mPa.s, 5%苯/異80:20
M-CSF Receptor/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠巨噬集落激因子受體抗體IgG纖維 45-55mPa.s, 5%苯/異80:20
Mcpt7/Tryptase Beta1/FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠肥大蛋

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：MTH1(NUDT1)抑制劑（TH588）

英文名稱：TH588

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|25mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

尖孢鐮孢人游離狀腺原Anti-USP40 Antibody人髓磷脂堿性蛋白(MBP)

費比恩畢赤酵母人新生甲狀腺Anti-USP38 Antibody人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)

解脂亞羅酵母人胰島Anti-USP42 Antibody人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)

釀酒酵母人C肽Anti-USP45 Antibody人結(jié)蛋白(Des)

巴氏微桿菌人絨毛膜促性腺激Anti-USP42 Antibody人結(jié)蛋白(Des)

暗色環(huán)紋炭團菌人絨毛膜促性腺激βAnti-USP43 Antibody人S100蛋白(S-100)

origami 2(DE3)人促黃體激Anti-USP44 Antibody人S100蛋白(S-100)

印度洋兩面神菌人潑尼松龍Anti-USP48 Antibody人S100B蛋白(S-100B)

金色鏈霉菌人瘦Anti-USP50 Antibody人S100B蛋白(S-100B)

地衣形芽孢桿菌人苗條受體Anti-USP45 Antibody人巨噬炎性蛋白2(MIP-2)

茄鏈格孢菌人生長激Anti-USP53 Antibody人巨噬炎性蛋白2(MIP-2)

麥芽糖假絲酵母人紅生成Anti-USP6NL Antibody人凝膠原蛋白(gelson)

根瘤菌人紅生成受體Anti-UTP14A Antibody人凝膠原蛋白(gelson)

地衣芽孢桿菌人β-微管蛋白Anti-VANGL1 Antibody人踝蛋白(talin)

枯草芽孢桿菌人前列腺F2αAnti-VAMP1 Antibody人踝蛋白(talin)

古巴栓孔菌人總前列腺特異抗原Anti-UTS2 Antibody人角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)

尾加壓2相關(guān)肽抗體多形炭角菌（斜面）人牙齦成纖維細(xì)胞

上調(diào)基因4抗體N端腐皮殼屬牛胚氣管細(xì)胞

B淋巴細(xì)胞前體蛋白1抗體灰略紅鏈霉菌新生牛睪丸支持細(xì)胞系

血管炎性蛋白2抗體維及尼鏈霉菌外周血淋巴細(xì)胞
MTH1(NUDT1)抑制劑（TH588）膠紅酵母 金黃三羧酸

釀酒酵母 2-氨基吖啶酮

乙酸鈣不動桿 蘿卜硫苷

發(fā)酵絲孢酵母 噻唑橙

短密青霉 藜蘆

卷枝毛霉卷枝變型 堿性木

蠟樣芽胞桿 (蠟狀芽胞桿) 硫秋水仙苷

大腸埃希 羥基萘藍(lán)

豬鏈球 固紅B二磺酸萘鹽

膠孢 5(6)-羧基二乙酸熒光琥珀酰亞酯

枯草芽孢桿 輪環(huán)藤寧

直絲淡紫灰鏈霉 固紅B

海水紅色桿 龍膽山酮

彎孢節(jié)叢孢 直接N

釀酒酵母 二水還原茚三酮