Hoechst 33258染色液

Hoechst 33258染色液公司正在出售的產(chǎn)品：phospho-GAB2(Ser623) 化接頭蛋白Gab2抗體硒粉 99.9% metals basis,200目
phospho-GAB2 (Tyr452) 化接頭蛋白Gab 2抗體硒粉 ≥99.99% metals basis,200目
phospho-GAB2 (Tyr643) 化接頭蛋白Gab2抗體硒粉 ≥99.999% meta

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無(wú)菌去離子水）。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí)，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái)，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè)：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)（1小時(shí)內(nèi)檢測(cè)）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點(diǎn)圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí)，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè)：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
Toll樣受體4(TLR4)英文名稱(chēng)：TLR4 ELISA Kit表面趨化因子受體1抗體包裝1g

Toll樣受體3(TLR3)英文名稱(chēng)：TLR3 ELISA Kit表面趨化因子受體2抗體包裝100g

Toll樣受體2(TLR2)英文名稱(chēng)：TLR2 ELISA Kit表面趨化因子受體3抗體包裝25g

Thy1細(xì)胞表面抗原(Thy1)英文名稱(chēng)：Thy1 ELISA Kit表面趨化因子受體4抗體包裝500g

TGFβ誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1(TIEG1)英文名稱(chēng)：TIEG1 ELISA Kit活化半胱蛋白蛋白-3抗體包裝25ml

TATA框結(jié)合蛋白關(guān)聯(lián)因子12(TAF12)英文名稱(chēng)：TAF12 ELISA Kit抗Ⅵ型膠原抗體包裝5ml

SRC/FGR/YES相關(guān)FYN癌基因(FYN)英文名稱(chēng)：FYN ELISA Kit半胱蛋白8抗體包裝25g

Smad同源物7(Smad7)英文名稱(chēng)：Smad7 ELISA Kit信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白亞基8抗體包裝5g

Smad同源物3(Smad3)英文名稱(chēng)：Smad3 ELISA Kit表面趨化因子受體10抗體包裝1g

Smad同源物2(Smad2)英文名稱(chēng)：Smad2 ELISA Kit轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體包裝5g

Smad同源物1(Smad1)英文名稱(chēng)：Smad1 ELISA Kit鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體2抗體包裝1g

Slit同源物3(Slit3)英文名稱(chēng)：Slit3 ELISA Kit周期檢測(cè)點(diǎn)激1抗體包裝25g

Slit同源物2(Slit2)英文名稱(chēng)：Slit2 ELISA Kit鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1抗體包裝5g

Slit同源物1(Slit1)英文名稱(chēng)：Slit1 ELISA Kit尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子2/3抗體包裝1g

Sideroflexin1蛋白(SFXN1)英文名稱(chēng)：SFXN1 ELISA Kit周期H抗體包裝5g

白色鏈霉菌Streptomyces│albus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A1試劑盒亞麻;Gamma linolenic

香菇Lentinula│edodes 質(zhì)量規(guī)格：>98%,國(guó)產(chǎn)美侖異質(zhì)性胞核核糖核蛋白A0試劑盒野漆樹(shù)苷;Rhoifolin

ATCC43308資源名稱(chēng): 鰻弧菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,異質(zhì)核糖核蛋白Q試劑盒葉黃制菌;Xanthatin
Hoechst 33258染色液藤黃微球 鹽酸阿洛司瓊琥珀酸脫氫Elisa

土生哈薩克斯坦酵母 1-BOC-吡咯烷-3-甲酰類(lèi)嗜TⅠ型病Elisa

短波單胞 1-Boc-3-吡咯烷甲酸甲酯類(lèi)T白血病病抗體Elisa

凍土毛霉 2,6-二溴-4,8-雙[(2-乙基己基)氧基]-苯并[1,2-B:4,5-B']二噻吩α1受體自身抗體Elisa

柑橘莖點(diǎn) 4-甲氧基-7-氮雜半胱氨酸Elisa

變幻青霉 2-哌甲酸甲酯相關(guān)蛋白A抗體Elisa

紅根須腹 4-氯-3-甲氧基-2-甲基吡啶 N-氧化物幽門(mén)螺旋桿抗體Elisa

康寧木霉 2-乙酰氧基-2,4-二氟苯乙酮葡萄糖Elisa

總狀毛霉 N,N’-二-（2-辛基十二烷基）-2,3,6,7-四溴-1,4,5,8-萘四羧酸二酰乳酸Elisa

蟲(chóng)草屬 3-叔丁氧羰基氨基-1-甲酸叔丁酯蛋白激C結(jié)合蛋白1Elisa

四川散斑殼 9,10-二基蒽內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白抑制劑Elisa

馬賽 對(duì)氯甲酸叔丁酯血管緊張轉(zhuǎn)化Elisa

白地霉 4-辛氧基苯酸端粒Elisa

糙皮側(cè)耳 5-溴-3-(三氟甲基)-2-基吡啶膳食纖維Elisa

釀酒酵母 1-BOC-哌-2-甲酸膜聯(lián)蛋白-VElisa