商品介紹:
ISCK03是特異性的SCF/c-Kit抑制劑。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):945526-43-2 純度:98.82% 分子量:355.45 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
產(chǎn)品屬性:
中文名稱:SCF/c-Kit抑制劑(ISCK03)
英文名稱:ISCK03
產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg
發(fā)貨周期:1~3天
公司產(chǎn)品僅用于科研
細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括:
①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究;
②生物膜與細(xì)胞器的研究;
③細(xì)胞骨架體系的研究;
④細(xì)胞增殖及其調(diào)控;
⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控;
⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡);
⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化;
⑧細(xì)胞工程.
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將1mm3左右大??;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
操作規(guī)程
1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).
2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無(wú)570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。
8、結(jié)果分析
a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無(wú)細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無(wú)細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)
鏈格孢菌CD3抗體Human MT-CO1(Cytochrome c oxidase subunit 1) ELISA Kit人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌CP2相關(guān)轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體Human LAMB1(Laminin subunit beta-1) ELISA Kit人抗縮(ALD)自身抗體免疫試劑盒
膠孢電壓依賴型N型鈣通道α1B抗體Human FBN2(Fibrillin-2) ELISA Kit人抗鞘磷脂抗體(IgM)免疫試劑盒
科貝特氏菌屬煙堿型乙酰膽堿受體A2(神經(jīng)型)抗體Human TGFBR1(TGF-beta receptor type-1) ELISA Kit人抗鞘磷脂抗體(IgG) 免疫試劑盒
魯氏毛霉C型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體Human PRKCE(Protein kinase C epsilon type) ELISA Kit人抗鞘磷脂抗體(IgA)免疫試劑盒
蜂房類芽孢桿菌γ干擾誘導(dǎo)單核因子抗體Human PRKCG(Protein kinase C gamma type) ELISA Kit人抗浦肯野抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)免疫試劑盒
牛邊緣無(wú)漿體(德株)血小板因子4抗體Human NRGN(Neurogranin) ELISA Kit人抗平滑肌抗體(ASMA)免疫試劑盒
球孢白僵菌血小板趨化因子7蛋白抗體Human IFITM10(Interferon-induced transmembrane protein 10) ELISA Kit人抗皮膚抗體(ASA)免疫試劑盒
缺陷短波單胞菌干擾誘導(dǎo)T趨化因子抗體Human IL2RG(Cytokine receptor common subunit gamma) ELISA Kit人抗旁瘤抗原Ma2(PNMA2)抗體免疫試劑盒
金針菇B-淋巴趨化因子抗體Human DSG3(Desmoglein-3) ELISA Kit人抗凝脂(PL)抗體(IgM)免疫試劑盒
黑腐病黃色單胞菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體Human NOX1(NADPH oxidase 1) ELISA Kit人抗凝脂(PL)抗體(IgG)免疫試劑盒
冷水金黃桿菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體Human LAD1(Ladinin-1) ELISA Kit人抗凝血抗體(aPT1/aPT2)免疫試劑盒
黑曲霉肌激M型抗體Human ITGA5(Integrin alpha-5) ELISA Kit人抗凝血-磷脂酰絲復(fù)合物(RTH-PS)抗體免疫試劑盒
擬盤多毛孢屬NK受體BY55抗體Human XBP1(X-box-binding protein 1) ELISA Kit人抗凝血III(AT III)免疫試劑盒
紅菇CD229抗體Human DKK2(Dickkopf-related protein 2) ELISA Kit人抗凝血Ⅲ抗體免疫試劑盒
Pseudomonas guariconensis 凝集胎盤蛋白1抗體Human C19orf10(UPF0556 protein C19orf10) ELISA Kit人抗釀酒酵母抗體(IgG)免疫試劑盒
: K48/39資源名稱: 阿麥斯福特沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:AR20S蛋白體試劑盒9’’’-丹酚B單酯
葉氏假交替單胞菌Pseudoalteromonas│elyakovii 質(zhì)量規(guī)格:ACS2,3-二磷甘油試劑盒9’-丹酚B單酯
熱土厭氧棒菌Anaerobaculum│thermoterrenum 質(zhì)量規(guī)格:指示劑級(jí)2,3Dinor血栓烷B2試劑盒丹酚B二酯
SCF/c-Kit抑制劑(ISCK03)生長(zhǎng)釋放多肽(GHRP)檢測(cè)試劑盒英文名稱:GHRP ELISA Kit載脂蛋白L3抗體包裝25g
生長(zhǎng)(GH)檢測(cè)試劑盒英文名稱:GH ELISA Kit腫瘤/抗原81抗體包裝5g
生長(zhǎng)分化因子15(GDF15)檢測(cè)試劑盒英文名稱:GDF15 ELISA Kit共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣2抗體包裝20MG
腎損傷分子1(Kim-1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Kim-1 ELISA Kit鹽耐藥蛋白ARS2抗體包裝1g
腎前體(renin precursor)檢測(cè)試劑盒英文名稱:renin precursor ELISA Kit芳香基硫酯1抗體包裝1g
腎(Renin)檢測(cè)試劑盒英文名稱:Renin ELISA Kit鹽轉(zhuǎn)運(yùn)三磷腺苷抗體包裝25g
腎上腺髓質(zhì)(ADM)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ADM ELISA Kit精tRNA的蛋白轉(zhuǎn)移1抗體包裝5g
腎上腺能a1A受體(ADRA1A)檢測(cè)試劑盒英文名稱:ADRA1A ELISA Kit共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣1抗體包裝100g
腎上腺(EPI)檢測(cè)試劑盒英文名稱:EPI ELISA Kit孤獨(dú)癥易感基因2蛋白抗體(自閉癥相關(guān)蛋白1)包裝25g
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子4(NT-4)檢測(cè)試劑盒英文名稱:NT-4 ELISA Kit脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)2型蛋白抗體包裝5g
神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT-3)檢測(cè)試劑盒英文名稱:NT-3 ELISA Kit芳香基硫酯H抗體包裝250mg
神經(jīng)型一氧化氮合成(nNOS/NOS1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:nNOS/NOS1 ELISA Kit溴區(qū)結(jié)構(gòu)域相鄰鋅指蛋白1A抗體包裝1g
神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1(NCAM1)檢測(cè)試劑盒英文名稱:NCAM1 ELISA Kit載脂蛋白1抗體包裝100g
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白4(NRG4)檢測(cè)試劑盒英文名稱:NRG4 ELISA Kit突觸融合結(jié)合蛋白6抗體包裝25g
神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3(NRG3)檢測(cè)試劑盒英文名稱:NRG3 ELISA Kit精1抗體包裝500g