PDE4抑制劑((S)-(+)-Rolipram)

PDE4抑制劑((S)-(+)-Rolipram)公司*的產(chǎn)品：Anti-SDF-1/CXCL12 /FITC 熒光素標(biāo)記基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Phospho-p90RSK (Thr359/Ser363)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化絲氨酸/蘇氨酸激酶p90RSK蛋白抗體IgGMulti-class antibo

商品介紹：

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PDE4抑制劑((S)-(+)-Rolipram)

英文名稱：(S)-(+)-Rolipram

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無(wú)菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

路德酵母7號(hào)染色體開放閱讀框13抗體Human B4GALT5(Beta-1,4-galactosyltransferase 5) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白1β(MIP-1β/CCL4)免疫試劑盒

藍(lán)色犁頭霉7號(hào)染色體開放閱讀框29抗體Human CAMKK2(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2) ELISA Kit人巨噬炎性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)免疫試劑盒

貪噬菌屬8號(hào)染色體開放閱讀框72抗體Human CBLB(E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B) ELISA Kit人巨噬來(lái)源的趨化因子(MDC/CCL22)免疫試劑盒

賴芽孢桿菌7號(hào)染色體開放閱讀框30抗體Human CD5L(CD5 antigen-like) ELISA Kit人巨噬集落激因子受體(M-CSFR)免疫試劑盒

奇異球菌7號(hào)染色體開放閱讀框57抗體Human FAM3B(Protein FAM3B) ELISA Kit人巨噬集落激因子(M-CSF)免疫試劑盒

膠紅酵母7號(hào)染色體開放閱讀框36抗體Human MYOF(Myoferlin) ELISA Kit人巨噬激蛋白(MSP)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○1547號(hào)染色體開放閱讀框42抗體Human GFRA1(GDNF family receptor alpha-1) ELISA Kit人巨泌乳免疫試劑盒

馬腺疫鏈球菌獸疫亞種7號(hào)染色體開放閱讀框43抗體Human GLIPR1(Glioma pathogenesis-related protein 1) ELISA Kit人鹽抵抗的性磷(TRAP)免疫試劑盒

冷海水黃桿菌7號(hào)染色體開放閱讀框44抗體Human HSD3B1(3 beta-hydroxysteroid dehydrogenase/Delta 5–>4-isomerase type 1) ELISA Kit人相關(guān)抗原9(SPAG9)抗體免疫試劑盒

暗產(chǎn)色鏈霉菌*8號(hào)染色體開放閱讀框40抗體Human ATG12(Ubiquitin-like protein ATG12) ELISA Kit人相關(guān)抗原7(SPAG7)免疫試劑盒

亮白曲霉8號(hào)染色體開放閱讀框37抗體Human FOLR2(Folate receptor beta) ELISA Kit人精脒/精N(1)-乙酰轉(zhuǎn)移樣蛋白1(SATL1)免疫試劑盒

枇杷葉點(diǎn)霉8號(hào)染色體開放閱讀框45抗體Human CBLB(E3 ubiquitin-protein ligase CBL-B) ELISA Kit人精合成(SRM)免疫試劑盒

膠柱頭孢霉屬8號(hào)染色體開放閱讀框80抗體Human B4GALT5(Beta-1,4-galactosyltransferase 5) ELISA Kit人精酰-tRNA合成(RARS)免疫試劑盒

Paenibacillus taichungensis9號(hào)染色體開放閱讀框3抗體Human CAMKK2(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase kinase 2) ELISA Kit人精脫羧(ADC)免疫試劑盒

植物乳桿菌8號(hào)染色體開放閱讀框47抗體Human NOTCH2(Neurogenic locus notch homolog protein 2) ELISA Kit人精2(ARG2)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌8號(hào)染色體開放閱讀框48抗體Human NOTCH4(Neurogenic locus notch homolog protein 4) ELISA Kit人精(Arg)免疫試劑盒

尖鐮孢萎蔫專化型（棉花枯萎病菌）Fusarium│oxysporum f. sp. vasinfectum 質(zhì)量規(guī)格：IND Liprin alpha 1 ELISA Kit三七皂苷R2(S型)

藍(lán)色鏈霉菌Streptomyces│cyaneus 質(zhì)量規(guī)格：IND KIAA1199 ELISA Kit異夏佛塔苷

假木豆根瘤菌Rhizobium│sp. 質(zhì)量規(guī)格：AR,90%白頭翁皂苷E-3
PDE4抑制劑((S)-(+)-Rolipram)磷肌3激(PI3K)檢測(cè)試劑盒英文名稱：PI3K ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白4D抗體包裝25g

磷化腺苷活化蛋白激(pAMPK)檢測(cè)試劑盒英文名稱：pAMPK ELISA Kit自噬相關(guān)蛋白9A抗體包裝5g

磷化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激(p-ERK)檢測(cè)試劑盒英文名稱：p-ERK ELISA Kit縮C抗體包裝500mg

磷化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激(pERK)檢測(cè)試劑盒英文名稱：pERK ELISA Kit谷草轉(zhuǎn)抗體包裝100g

磷化酪蛋白激JAK3(pJAK3)檢測(cè)試劑盒英文名稱：pJAK3 ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員5抗體包裝25g

磷化核因子-κB(p-NF-κB)檢測(cè)試劑盒英文名稱：p-NF-κB ELISA Kit三磷腺苷結(jié)合轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G超家族成員8抗體包裝500g

磷化蛋白激C(P-PKC)檢測(cè)試劑盒英文名稱：P-PKC ELISA Kit?；摎溟L(zhǎng)鏈抗體包裝25g

磷化蛋白激B(P-PKB)檢測(cè)試劑盒英文名稱：P-PKB ELISA Kit?；摎渲墟溈贵w包裝5g

磷化表皮生長(zhǎng)因子受體(pEGFR)檢測(cè)試劑盒英文名稱：pEGFR ELISA Kit酰基脫氫短鏈抗體包裝1g

磷化基末端蛋白激(P-JNK)檢測(cè)試劑盒英文名稱：P-JNK ELISA Kit過(guò)氧化物?；趸?抗體包裝25g

細(xì)胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)檢測(cè)試劑盒英文名稱：Lptn/LTN/XCL1 ELISA Kit磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體包裝5g

細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)檢測(cè)試劑盒英文名稱：LFA-3/CD58 ELISA Kit轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β誘導(dǎo)蛋白3抗體（半胱和絲富含核蛋白1）包裝1g

亮腦啡肽(Leu-ENK)檢測(cè)試劑盒英文名稱：Leu-ENK ELISA Kit有絲分裂激A/B/C抗體包裝5g

粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)檢測(cè)試劑盒英文名稱：GM-CSF ELISA Kit蛋白酪激ATK抗體包裝1g

粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)檢測(cè)試劑盒英文名稱：G-CSF ELISA Kit長(zhǎng)鏈脂肪連接1/2抗體包裝1g