Hoechst33258染色試劑盒

Hoechst33258染色試劑盒公司正在出售的產(chǎn)品：Phospho-PKA C (Thr197) 化蛋白激C亞性抗體四 ACS，>99.5% (GC)
PKB/AKT-1 蛋白激B（小鼠來源抗體）四烯 CP，97%
PLASTIN3/T Plastin 絲束蛋白T Plastin抗體硫代 AR,90.0%
PLC beta 3/Phospholipase C beta 3 酯Cβ3抗體

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
川射干（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 4-Methylumbelliferyl N-acetyl-β-D-galactosaminide磷化粘著斑激抗體包裝1g

川烏（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 4-Nitrobenzyl alcohol磷化粘著斑激抗體包裝25g

川西獐牙菜（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 4S Green Nucleic Acid Stain 4S Green下頜發(fā)育不良綜合征相關(guān)蛋白FAKD3抗體包裝5g

川芎（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5,5-Dimethyl-1,3-cyclohexanedioneFAM134B蛋白抗體包裝25g

川芎(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： 5-Fluorocytidine磷化范可尼貧血組蛋白A抗體包裝5g

川續(xù)斷皂苷VI（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-Methylindole范可尼綜合征相關(guān)蛋白FANCC抗體包裝100g

川續(xù)斷皂苷乙（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 5-NitroguaiacolFXYD離子轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子6抗體包裝25g

穿山（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 6-Bromo-2-naphtholFyn結(jié)合蛋白抗體包裝5g

穿山龍（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 6-Dimethylallylamino purine riboside鋅指蛋白FYCO1抗體包裝100g

（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 6-MethylcoumarinFYTTD1蛋白抗體包裝25g

內(nèi)酯（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 7-Aminocephalosporanic acidRNA結(jié)合蛋白9抗體包裝5g

船形烏頭（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 8-Hydroxyquinaldine巖藻糖轉(zhuǎn)移11抗體包裝1g

垂盆草（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 9,10-Dibromoanthracene干擾誘導(dǎo)蛋白15抗體包裝25g

椿皮（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 9,9-Bis(4-hydroxyphenyl) fluorineP38相互作用蛋白抗體包裝5g

慈溪麥冬皂苷A英文名稱： Acid blue 29鈣粘樣蛋白28抗體包裝1g

鮑曼不動桿菌Acinetobacter│baunannii 質(zhì)量規(guī)格：進分,97%,一腎上腺髓質(zhì)前體試劑盒去氫鉤藤堿;Corynoxeine

16930=LMG22726資源名稱: 羽扇豆蒼白桿菌 質(zhì)量規(guī)格：UV法含量測定；一物腎上腺髓質(zhì)試劑盒3-氫化去氫松苓;Dehydrotra

: ATCC9642CBS246.65CMI91855IFO6342NRRL3536資源名稱: 黑曲霉 質(zhì)量規(guī)格：純度≥98%,BR腎上腺能a1A受體試劑盒羥基酪;3,4-Dihydroxyph
Hoechst33258染色試劑盒釀酒酵母 3-氨基-2,6-二酮鹽酸鹽腸道病71型IgM抗體Elisa

大腸埃希氏 對氟肉桂核轉(zhuǎn)錄因子p52Elisa

Acinetobacter toroneri 4-氟肉桂COL12A1Elisa

蠟狀芽孢桿 辛基縮水甘油布魯氏桿抗體Elisa

瓜類炭疽盤孢* 2,5-二叔丁基-1,糖化鐵蛋白Elisa

湘坪鏈霉 4-氯-3-氟抗核糖體抗體Elisa

鹽地桿 2,5-二甲氧苯PL7抗體；抗蘇氨酰tRNA合成Elisa

胡椒枯萎病 異煙酸甲酯外信號調(diào)節(jié)激Elisa

短小芽孢桿 2-吡啶甲酸甲酯γ氨基丁酸A型受體Elisa

嗜鹽噬冷 富馬酸單乙酯Ⅷ型膠原α2Elisa

薛瓦酵母 1,3-二氧雜環(huán)己烷-2-酮抗膜DNA抗體Elisa

小孢擬盤多毛孢 月桂酸鋅抗著絲點抗體Elisa

水稻節(jié)桿 2-氟-5-氯吡啶-3-甲抗α-胞襯蛋白抗體IgG；IgAElisa

膠孢 異尿酸三縮水甘油酯Abl交互子3Elisa

釀酒酵母 炔基腫瘤壞死因子受體γElisa