CDK抑制劑(Roscovitine)

CDK抑制劑(Roscovitine)公司*的產(chǎn)品：HCV-NS1 型肝炎病-NS1（抗原）氫氟 ACS
HCV-NS3 型肝炎病-NS3（抗原）氫氟 電子級，49wt. % in H2O，≥99.99998%metals basis
HCV-NS4a 型肝炎病-NS4a（抗原）異 standard for GC，≥99.9% (GC)
HEV 戊型肝炎?。乖┊?for HPL

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：CDK抑制劑(Roscovitine)

英文名稱：Roscovitine

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg|200mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

擬青霉DISC1 C端抗體Human PLAC1 (Placenta-specific protein 1) ELISA KIT人Tau蛋白免疫試劑盒

球孢白僵菌DISC1 N端抗體Human PRLR(Prolactin receptor) ELISA Kit人TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP/TDP43)免疫試劑盒

布氏蟲草多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體Human PRLHR(Prolactin-releasing peptide receptor) ELISA Kit人s腺苷同型半胱(SAH)免疫試劑盒

Sphingopyxis contaminans 結(jié)腸直腸癌缺失基因抗體Human PGM5 (Phosphoglucomutase-like protein 5) ELISA KIT人Syndecan-3/(SDC3)免疫試劑盒

產(chǎn)克雷伯氏菌多巴脫羧抗體Human PGM3 (Phosphoacetylglucosamine mutase) ELISA KIT人Syndecan-1/CD138(SDC1)免疫試劑盒

灰黃青霉防御β1/Defensin β1抗體Human PRPS2 (Ribose-phosphate pyrophosphokinase 2) ELISA KIT人SWI/SNF相關(guān), 基質(zhì)關(guān)聯(lián),肌動蛋白依賴染色質(zhì)調(diào)控因子,亞家族c,成員1(SMARCC1)免疫試劑盒

猴頭抗體Human PEAR1 (Plaet endothelial aggregation receptor 1) ELISA KIT人STEAP家族成員4(Steap4)免疫試劑盒

Bacillus myloliquefaciens subsp. plantarum DLX4抗體Human MYOM3(Myomesin-3) ELISA Kit人STEAP家族成員1(Steap1)免疫試劑盒

青霉屬DTX1抗體Human PCLO (Protein piccolo) ELISA KIT人Stathmin 1(STMN1)免疫試劑盒

Pestalotiopsis neglecta絲裂原活化蛋白激磷-1抗體Human PIEZO1(Piezo-type mechanosensitive ion channel component 1) ELISA Kit人STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)免疫試劑盒

紅色紅曲霉絲裂原活化蛋白激磷-2抗體Human SMG1 (Serine/threonine-protein kinase SMG1) ELISA KIT人Spondin-2 免疫試劑盒

短桿狀馬賽菌質(zhì)分裂付出蛋白1抗體Human PIGW (Phosphatidylinositol-glycan biosynthesis class W protein) ELISA KIT人SPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合蛋白2(SMOC2)免疫試劑盒

土星孢青霉腦表皮生長因子跨膜蛋白DNER抗體Human PID1 (PTB-containing, cubilin and LRP1-interacting protein) ELISA KIT人SPARC相關(guān)模塊化鈣結(jié)合蛋白1(SMOC1)免疫試劑盒

柱形矛束霉DUX3蛋白抗體Human CACNA1A(Voltage-dependent P/Q-type calcium channel subunit alpha-1A) ELISA Kit人SMAD3 免疫試劑盒

費雷生枝霉死亡相關(guān)蛋白1抗體Human PITPNC1 (Cytoplasmic phosphatidylinositol transfer protein 1) ELISA KIT人SMAD2 免疫試劑盒

平臍儒孢菌軸絲動力蛋白重鏈9抗體Human PIGW (Phosphatidylinositol-glycan biosynthesis class W protein) ELISA KIT人SHC轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)免疫試劑盒

致病性大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：100µg/mL,基體:1%HNO3黑介子苷

毛柄金錢菌(金針菇)Flammulina│velutipes 質(zhì)量規(guī)格：1000µg/mL,基體：10%HCL維生B5

根瘤菌Rhizobium│yanglingense Tan et al. 質(zhì)量規(guī)格：1000μg/ml枸杞多糖
CDK抑制劑(Roscovitine)黑曲霉 噻吩并[3,2-b]噻吩色氨酸羥化1Elisa

金黃殼囊孢 (R)-(-)-3-甲酸乙酯原癌基因c-Met蛋白Elisa

日本曲霉 (R)-(-)-3-甲酸早期生長反應(yīng)因子4Elisa

肺炎克雷伯氏 2-雙環(huán)己基膦-2 '-甲基聯(lián)苯ED-1;sCD68分子Elisa

枝孢霉 2,5-二溴噻吩[3,2-b]噻吩次-鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移Elisa

栗色牛肝 1-溴-4-環(huán)己基苯鳥嘌呤脫氨Elisa

豬丹絲 3,5-二甲基異惡唑-4-羧酸羧化基質(zhì)谷氨酸蛋白Elisa

香蕉 3-乙炔基吡啶HMG-CoA還原Elisa

褐球固氮 N-Boc-N'-succinyl-4,7,10-trioxa-1,13-tridecanediam過氧化物還原1Elisa

法氏沃氏黃桿 聚己內(nèi)酰粉Janus激1Elisa

土曲霉 聚己內(nèi)酰粉Janus激3Elisa

毛木耳 聚己內(nèi)酰粉次-鳥嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移Elisa

多變毛霉 聚己內(nèi)酰粉磷脂酰肌糖生物合成類F蛋白Elisa

產(chǎn)氣莢膜梭       C型 1,3-二(2,6-二異基苯基)化咪唑過氧化物還原6Elisa

蠟狀芽孢桿 N-(叔丁氧羰基)-1-(2,4-二基)-L-組氨酸過氧化物還原6Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)