商品介紹:
蘇木素(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色,簡(jiǎn)稱(chēng)HE染色,是病理學(xué)常規(guī)制片中基本的染色方法,應(yīng)用極其廣泛。蘇是從原產(chǎn)中南美的洋蘇木中提取出來(lái)的淺黃褐色的結(jié)晶,是一種堿性染色劑,它在被氧化后生成蘇木素,同媒染劑(常用的是三價(jià)的鋁或鹽鐵)一起使用,能夠使細(xì)胞核染色。 蘇木素染色液是采用進(jìn)口的高純度蘇、氧化劑等優(yōu)質(zhì)試劑原料和經(jīng)典配方配制,染色液內(nèi)不使用汞、甲醇等有毒試劑,其特點(diǎn)是不易產(chǎn)生沉淀和金屬; 應(yīng)用范圍廣,可以用于人、動(dòng)物、畜牧、水產(chǎn)等領(lǐng)域,用于組織切片或培養(yǎng)細(xì)胞的染色。蘇木素染色液染色后細(xì)胞核呈藍(lán)紫色。本染色液可以重復(fù)使用,直至效果不佳時(shí)再換用新的染色液。 伊紅染色液是采用優(yōu)質(zhì)試劑原料和經(jīng)典配方配制,用于組織切片或培養(yǎng)細(xì)胞的染色。伊紅染色液染色后細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。本染色液可以重復(fù)使用,直至效果不佳時(shí)再換用新的染色液。 儲(chǔ)存條件:室溫避光保存。 有效期:一年。 |
以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
中文名稱(chēng) | 英文名稱(chēng) | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
蘇木素伊紅染色試劑盒 |
| 200ml | 1~3天 |
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀(guān)察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀(guān)察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
甘草苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Benzene-D6FMS樣酪激3配體抗體包裝5g
甘草(左旋)英文名稱(chēng): Benzene-D6F-box富含亮重復(fù)蛋白4抗體包裝1g
甘草(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Benzene-D6免疫球蛋白E受體Fc ε RIγ抗體包裝250mg
甘草單銨鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Benzene-D6Fcγ免疫球蛋白IgG結(jié)合蛋白抗體包裝5g
甘草二銨鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Benzene-D6磷肌結(jié)合蛋白1抗體包裝1g
甘草異黃A英文名稱(chēng): Dimethyl Sulfoxide-D6磷化成纖維生長(zhǎng)因子受體3抗體包裝5g
甘木通(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dimethyl Sulfoxide-D6叉頭相關(guān)結(jié)構(gòu)域包含蛋白1抗體包裝1g
甘青青蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dimethyl Sulfoxide-D6串珠狀纖維結(jié)構(gòu)蛋白1抗體包裝25g
甘松(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dimethyl Sulfoxide-D6纖維調(diào)節(jié)蛋白抗體包裝5g
甘遂(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dimethyl Sulfoxide-D6磷化FANCD2抗體包裝100g
甘西鼠尾草英文名稱(chēng): Dimethyl Sulfoxide-D6范可尼貧血相關(guān)蛋白E抗體包裝25g
甘油三油酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dimethyl Sulfoxide-D6范可尼貧血相關(guān)蛋白M抗體包裝5g
苷松新(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dimethyl Sulfoxide-D6軟骨Ezrin樣蛋白抗體包裝100g
橄欖苦苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Dimethyl Sulfoxide-D6慢性粒白血病33抗體包裝25g
崗梅(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Ammonium acetate白血病病C亞類(lèi)受體蛋白FLVCR抗體包裝500g
流產(chǎn)布魯氏菌Brucella│abortus 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品三官能亞基β,線(xiàn)粒體試劑盒5-羥基色;5-Hydroxytry
木荷迪茨氏菌Dietzia│schimae 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR三狀腺原試劑盒奇壬;kirenol
鏈霉菌Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品腮腺炎病IgM 去異波爾定;Laurolitsine
蘇木素伊紅染色試劑盒輪紋大莖點(diǎn) 西洛多辛α淀粉1Elisa
云芝栓孔(變色栓) Iniparib (BSI-201)堿性唾液脯氨酸豐富蛋白3Elisa
貝倫格葡萄座腔梨生專(zhuān)化型 Nelfinavir Mesylate原粒蛋白16同源物BElisa
鐮孢 Everolimus (RAD001)白彈性蛋白抑制因子Elisa
Aureimonas ureilytica Perifosine (KRX-0401)短腭肺鼻腔上皮癌關(guān)聯(lián)蛋白2Elisa
霉擬蠟孔 波生坦(水合物)鳥(niǎo)苷三磷酸環(huán)化水解1Elisa
薄黑孔 Licofelone周期B1Elisa
干草鞘氨單胞 利托那韋白介36受體Elisa
抗霉鏈霉 Plerixafor 8HCl (AMD3100 8HCl)碳酸酐Elisa
秀珍菇 Pancuronium dibromide絲氨酸;蘇氨酸蛋白激B-rafElisa
尿酸氧化節(jié)桿 LY294002/PI3K抑制劑SARSIgG抗體Elisa
枯草芽胞桿 2-(4-嗎啉基)-4H-萘并[1,2-B]吡喃-4-酮激肽釋放5Elisa
大腸埃希 阿比特龍肌原纖蛋白1Elisa
傳染性支氣管炎病 醋酸阿比特龍L-同型半胱氨酸Elisa
親和鏈霉 瑞替加濱肺炎鏈球IgG抗體Elisa