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TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Alexa Fluor 647)

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更新時(shí)間:2022-04-21 12:09:42瀏覽次數(shù):236

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 20 rxn
貨號(hào) GOY-01X9626 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 公司產(chǎn)品僅供科研 英文名稱(chēng) TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 647)
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Alexa Fluor 647)公司正在出售的產(chǎn)品:CX3CL1 CX3CL1抗體位戊桂 97%
CX3CR1 趨化因子受體1抗體楊梅 98%
CXorf36 脫羧蛋白體36抗體戊酯 ≥99%
CXorf36 脫羧蛋白體36抗體2,3-丁二 98%
Cyclin A 周期A抗體丁丁酯 Standard for GC, ≥99.5% (GC)
Cyclin

詳細(xì)介紹

商品介紹:

本試劑盒應(yīng)用范圍廣,可以用于檢測(cè)冷凍或石蠟切片中的細(xì)胞凋亡情況,也可以檢測(cè)培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞的凋亡情況。

細(xì)胞在發(fā)生凋亡時(shí),會(huì)激活一些DNA內(nèi)切酶,這些內(nèi)切酶會(huì)切斷核小體間的基因組DNA。細(xì)胞凋亡時(shí)抽提DNA進(jìn)行電泳檢測(cè),可以發(fā)現(xiàn)180-200bp的DNA ladder。

TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling) 細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Alexa Fluor 647)可以用來(lái)檢測(cè)組織細(xì)胞在凋亡晚期過(guò)程中細(xì)胞核DNA的斷裂情況。其原理是在末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)的作用下,在基因組DNA斷裂時(shí)暴露出的3′-羥基(3′-OH)末端摻入Alexa Fluor 647-12-dUTP,從而可以用熒光顯微鏡或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。Alexa Fluor 647為紅色熒光染料,具有很高的穩(wěn)定性和很強(qiáng)的亮度。

試劑盒組份:

5×Equilibration Buffer——————————1.25 ml

Alexa Fluor 647-12-dUTP Labeling Mix———100 μl

Recombinant TdT Enzyme——————————20 μl

Proteinase K(2 mg/ml)———————————40 μl

注意事項(xiàng)

1) 需自備用于洗滌細(xì)胞的PBS,用于封片的抗熒光淬滅封片液,用于固定的4%多聚。

2) 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期一年。

以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:

中文名稱(chēng)

英文名稱(chēng)

產(chǎn)品規(guī)格

發(fā)貨周期

TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Alexa Fluor 647)

TUNEL Apoptosis Detection Kit (Alexa Fluor 647)

20 rxn

1~3天


操作步驟:

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。

2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測(cè)

1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):

染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測(cè):

染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。

2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

上皮中性粒細(xì)胞激活肽78(ENA78)英文名稱(chēng):ENA78 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白25抗體包裝500mg

上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)英文名稱(chēng):CDHE ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體包裝1g

上皮型脂肪結(jié)合蛋白(FABP5)英文名稱(chēng):FABP5 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28B抗體包裝5g

殺菌性/通透性增加蛋白(BPI)英文名稱(chēng):BPI ELISA Kit腫瘤/抗原74抗體包裝1g

色胺羥化2(TPH2)英文名稱(chēng):TPH2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白38抗體包裝25g

色胺羥化1(TPH1)英文名稱(chēng):TPH1 ELISA Kit7號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框72抗體包裝5g

三葉因子3(TFF3)英文名稱(chēng):TFF3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白42抗體包裝100g

三葉因子2(TFF2)英文名稱(chēng):TFF2 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白47抗體包裝25g

三肽基肽Ⅰ(TPP1)英文名稱(chēng):TPP1 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白43抗體包裝5g

三磷腺苷(ATP)英文名稱(chēng):ATP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白46抗體包裝1g

三磷肌(IP3)英文名稱(chēng):IP3 ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白63抗體包裝1g

朊病毒蛋白(PRNP)英文名稱(chēng):PRNP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白54抗體包裝5g

軟骨關(guān)聯(lián)蛋白(CRTAP)英文名稱(chēng):CRTAP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白61抗體包裝100ml

軟骨寡聚基質(zhì)蛋白(COMP)英文名稱(chēng):COMP ELISA Kit卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體包裝25ml

乳脂球表皮生長(zhǎng)因子8(MFGE8)英文名稱(chēng):MFGE8 ELISA Kit神經(jīng)酰激CERK抗體包裝100g

: AS3.2783資源名稱(chēng): 泡盛曲霉 質(zhì)量規(guī)格:純度> 98%,BR,可用于培養(yǎng)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β激蛋白22試劑盒紫檀芪;Pterostilbene

平滑假絲酵母Candida│parapsilosis 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β3試劑盒竹節(jié)參皂苷IVa;Chikusetsu

普通變形桿菌Proteus│vulgaris 質(zhì)量規(guī)格:純度>98%,BR,可用于培養(yǎng)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2試劑盒梓酚;Catalponol
TUNEL細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒(Alexa Fluor 647)枯草芽孢桿 2,3-二羥基萘-6-磺酸鈉血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體1Elisa

釀酒酵母 雙氯芬酸血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2Elisa

枯草芽孢桿 2-氨基-4-溴甲酯血管內(nèi)皮粘附分子1Elisa

熱帶假絲酵母 一氯頻哪酮血管內(nèi)皮抑Elisa

溜曲霉 2-氨基-3-溴吡啶血管黏附蛋白Elisa

棲藻海桿狀 3-基甲酯血管生成1Elisa

西蕃蓮莖基腐病 (S)-(-)-Alpha-氨基-Gamma-丁內(nèi)酯鹽血管生成2Elisa

芽孢桿 高氯酸鎳(II)六水合物, Reagent Grade血管生成受體酪氨酸激2Elisa

山柑芽孢桿 Fmoc-L-正纈氨酸血管生成樣蛋白2Elisa

假單胞屬 2-甲基-4-硝基吡啶血管生成樣蛋白3Elisa

繩狀籃狀 2-苯甲酰噻吩血管生長(zhǎng)Elisa

Bacillus  氯(4-)苯血管性血友病因子Elisa

金針菇—HP3 六水合磷酸鎂銨血紅蛋白Elisa

黑孢霉 酸鎳六水合物血紅蛋白CElisa

大腸埃希 氯化釹六水合物血紅蛋白FElisa

 


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