HIV蛋白酶抑制劑（Saquinavir）

HIV蛋白酶抑制劑（Saquinavir）公司*的產(chǎn)品：Anti-Layilin/FITC 熒光素標(biāo)記透明質(zhì)酸受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-phospho-Src (Tyr418)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化Src原癌基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh A

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：HIV蛋白酶抑制劑（Saquinavir）

英文名稱：Saquinavir

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大??；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

大黃英文名稱： Coniferyl alcohol磷化整合連接激1抗體包裝5g

大黃(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Acetyl coenzyme A sodium salt  磷化整合連接激1抗體包裝1g

大戟因子L1(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Disodium 5'-Inosinate磷化胰島受體底物1抗體包裝25g

大薊（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ciclesonide磷化間粘附分子1抗體包裝5g

大薊苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Ciclesonide磷化整合β3抗體包裝25g

大麥芽堿(標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： L-Tyrosine amide磷化胰島樣生長(zhǎng)因子1受體抗體包裝5g

大青葉（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： saponin磷化胰島樣生長(zhǎng)因子1受體抗體包裝100g

大蒜，二烯基二硫英文名稱： Norethindrone磷化胰島樣生長(zhǎng)因子1受體抗體包裝25g

大血藤（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Norethindrone磷化整合β3抗體包裝500g

大葉骨碎樸（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Cortisone免疫球蛋白A誘導(dǎo)同源蛋白抗體包裝1g

大葉茜草英文名稱： Cortisone白介2抗體包裝25g

大葉茜草英文名稱： 2-Hydroxy-N-(4-hydroxyphenyl)-benzamide白介2抗體包裝5g

大葉紫珠（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 2-Hydroxy-N-(4-hydroxyphenyl)-benzamideDNA結(jié)合抑制因子4抗體包裝1g

大棗（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Reboxetine mesylate胰島樣生長(zhǎng)因子2受體抗體包裝25g

大皂角（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ketanserin鋅指蛋白Aiolos抗體包裝5g

鴨瘟病毒Alphaherpesvirinae│Duck plague virus 質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品可溶性CD28試劑盒黃楊堿;Cyclovirobuxine

: H38資源名稱: 羊布氏菌 質(zhì)量規(guī)格：≥98.0%(T),進(jìn)口標(biāo)準(zhǔn)品可溶性CD276分子試劑盒茴香腦;cis-Anethol

: =NRRLA-7421資源名稱: 卷枝毛霉lusitanicus變型 質(zhì)量規(guī)格：≥600 I.U. /mg,USP,BR可溶性CD21試劑盒黃柏;obacunone
HIV蛋白酶抑制劑（Saquinavir）魚類白介1α絞股藍(lán)（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

腺病 IgG 混合型(間接法二步法)絞股藍(lán)皂苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Human

腺病 IgM 混合型(間接法二步法)絞股藍(lán)皂苷A(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse

EB 病 IgG(間接法二步法)絞股藍(lán)皂苷XLIX（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse, Rat

EB 病 IgM(間接法二步法)節(jié)裂角茴香（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

肺炎支原體 IgG(間接法二步法)結(jié)石草（標(biāo)準(zhǔn)品）Human

肺炎支原體 IgM(間接法二步法)介芬Human

流感病A IgG(間接法二步法) ELISA Kit芥子（標(biāo)準(zhǔn)品）Human, Mouse

流感病A IgM(間接法二步法)ELISA Kit芥子Human, Mouse, Rat 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)