κ opioid受體激動劑(Asimadoline)

κ opioid受體激動劑(Asimadoline)公司正在出售的產(chǎn)品：Anti-FasL/FITC 熒光素標(biāo)記FasL蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Anti-Ephrin B (phospho Tyr331) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化Ephrin B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
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以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹：

商品介紹：

公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細(xì)胞處理：

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

操作步驟：

1. 樣品染色

1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。

2) 對于懸浮細(xì)胞，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

對于貼壁細(xì)胞，要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來時，加入細(xì)胞培養(yǎng)液，將細(xì)胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細(xì)胞。

3) 收集細(xì)胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細(xì)胞，共洗滌兩次。

4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細(xì)胞，使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。

5) 吸取100μl細(xì)胞懸液（細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。

2. 樣品檢測

1) 流式細(xì)胞儀檢測：

染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。

建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo)，PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光，早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光，晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>

2) 熒光顯微鏡檢測：

染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞，細(xì)胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
釀酒酵母FAHD1蛋白抗體Human CNTLN (Centlein) ELISA KIT牛過氧化物體增殖因子活化受體γ(PPARG)免疫試劑盒

解淀粉芽孢桿菌磷化粘著斑激抗體Human CHPT1 (Cholinephosphotransferase 1) ELISA KIT牛過氧化氫(CAT)免疫試劑盒

釀酒酵母磷化粘著斑激抗體Human CHKB (Choline/ethanolamine kinase) ELISA KIT牛果糖(FRA)免疫試劑盒

施氏假單胞菌下頜發(fā)育不良綜合征相關(guān)蛋白FAKD3抗體Human DAB1(Disabled homolog 1) ELISA Kit牛胱抑C(CST3/Cys-C)免疫試劑盒

弗雷德里克斯堡假單胞菌FAM134B蛋白抗體Human CENPT (Centromere protein T) ELISA KIT牛胱天蛋白9(Casp-9)免疫試劑盒

地下枝芽孢桿菌磷化范可尼貧血組蛋白A抗體Human CDCA7L (Cell division cycle-associated 7-like protein) ELISA KIT牛胱天蛋白8(Casp-8)免疫試劑盒

青霉屬范可尼綜合征相關(guān)蛋白FANCC抗體Human CGREF1 (Cell growth regulator with EF hand domain protein 1) ELISA KIT牛胱天蛋白7(Casp-7)免疫試劑盒

雙倒卵形紅冬孢酵母菌FXYD離子轉(zhuǎn)運調(diào)節(jié)因子6抗體Human CHKA (Choline kinase alpha) ELISA KIT牛胱天蛋白6(Casp-6)免疫試劑盒

葡萄座腔菌Fyn結(jié)合蛋白抗體Human CHKB (Choline/ethanolamine kinase) ELISA KIT牛胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒

泡盛曲霉鋅指蛋白FYCO1抗體Human CHPT1 (Cholinephosphotransferase 1) ELISA KIT牛胱天蛋白1(Casp-1)免疫試劑盒

布氏乳桿菌FYTTD1蛋白抗體Human CNTLN (Centlein) ELISA KIT牛骨鈣/骨谷蛋白(OT/BGP)免疫試劑盒

MethylobacteriumRNA結(jié)合蛋白9抗體Human CHRM1 (Muscarinic acetylcholine receptor M1) ELISA KIT牛骨成型蛋白受體1B(BMPR-1B)免疫試劑盒

產(chǎn)單核李氏桿菌巖藻糖轉(zhuǎn)移11抗體Human CENPT (Centromere protein T) ELISA KIT牛谷胱甘肽過氧化(GSH-Px)免疫試劑盒

香菇屬干擾誘導(dǎo)蛋白15抗體Human CENPV (Centromere protein V) ELISA KIT牛谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移A1(GSTA1)免疫試劑盒

白靈側(cè)耳P38相互作用蛋白抗體Human ABCA1(ATP-binding cassette sub-family A member 1) ELISA Kit牛鉤端螺旋體(Leptospira)抗體(IgG)免疫試劑盒

無花果曲霉鈣粘樣蛋白28抗體Human CHEK1 (Serine/threonine-protein kinase Chk1) ELISA KIT牛睪(T)免疫試劑盒

花臉香蘑Lepista│sordida 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC ,≥99.5%(GC)維生B12

泡盛曲霉Aspergillus│awamori 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥99.5%(GC)維生B1

小單孢菌屬Micromonospora│sp. 質(zhì)量規(guī)格：Standard for GC,≥98.0%(GC)維生A
κ opioid受體激動劑(Asimadoline)鞣小檗堿（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Azure I橋粒芯糖蛋白2抗體包裝250g

乳果糖（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Azure II發(fā)育相關(guān)蛋白DAZL抗體包裝50g

乳鈣（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Azure A chloride DNA聚合γ抗體包裝250mg

乳依沙吖啶（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Triclosan死亡受體5抗體包裝250mg

乳糖（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Resazurin橋粒芯糖蛋白4抗體包裝1g

瑞格列奈（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Celestine blue自然殺傷激活受體相關(guān)蛋白DAP12抗體包裝250mg

瑞舒伐他汀鈣/羅蘇伐他汀鈣（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Azure B eosinate自然殺傷激活受體相關(guān)蛋白DAP12抗體包裝250mg

塞克硝唑（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Limaprost無精癥缺失基因4抗體包裝1g

塞來昔布，塞內(nèi)昔布（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Azure II eosinate多能發(fā)育相關(guān)基因4抗體包裝5g

噻奈普汀;噻奈普汀(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Filipin complex from Streptomyces filipinensis鋅指蛋白DZIP1抗體包裝1g

三(羥基)基甘（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： RosuvastatinNotch信號通路Delta樣配體1抗體包裝250mg

三雙脒（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sudan I/Solvent Yellow 14同源轉(zhuǎn)錄因子DLX1抗體包裝100mg

三基間三酚（1,3,5-三氧基）（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Sudan II /Solvent Orange 7Hsp90輔助伴侶分子CDC37抗體包裝1g

三化釓六合物英文名稱： Sudan3肌營養(yǎng)不良蛋白抗體包裝5g

三生(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： Sudan IV/Solvent Red 24金屬離子轉(zhuǎn)運體1抗體包裝1g