PDE4抑制劑（AN-2728）

PDE4抑制劑（AN-2728）公司*的產(chǎn)品：ABP(Human Androgen Binding Protein) ELISA Kit 人雄激素結(jié)合蛋白Multi-class antibodies規(guī)格： 48T
Anti-phospho-AKT/PKB (Ser473) 磷酸化蛋白激酶B抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh

公司產(chǎn)品僅用于科研

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個(gè)方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：PDE4抑制劑（AN-2728）

英文名稱：AN-2728

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

發(fā)貨周期：1～3天

商品介紹：

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

山扁豆生棒孢α2C-AR腎上腺能受體抗體Human CAMK2B(Calcium/calmodulin-dependent protein kinase type II subunit beta) ELISA Kit豬D二聚體(D2D)免疫試劑盒

瑞氏青霉中心體蛋白AZI1抗體Human CDCA8(Cell division cycle-associated protein 8) ELISA Kit豬C肽(C-Peptide)免疫試劑盒

大麗花輪枝孢α蛋白激3抗體（心肌）Human MAP4K4 ELISA Kit豬C反應(yīng)蛋白(CRP)免疫試劑盒

葡枝根霉表皮型脂氧合3抗體（魚鱗病相關(guān)蛋白）Human MAP4K5 ELISA Kit豬c-fos 免疫試劑盒

研究團(tuán)隊(duì)節(jié)桿菌錨蛋白重復(fù)域28抗體Human Matrilin 2 ELISA Kit豬B淋巴瘤因子2(Bcl-2)免疫試劑盒

芽孢八疊球菌屬淋巴相關(guān)AF4樣蛋白抗體Human MAPK11(Mitogen-activated protein kinase 11) ELISA Kit豬Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)免疫試劑盒

乳酒假絲酵母錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體Human MAP7 ELISA Kit豬Apelin(APLN)免疫試劑盒

玫煙色棒束孢錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白13A抗體Human MAP7 ELISA Kit豬5羥色(5-HT)免疫試劑盒

秀珍菇錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體Human MAPK12 ELISA Kit豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)免疫試劑盒

冷溫木拉克酵母錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白1A抗體Human MAPK4 ELISA Kit豬Ⅲ型前膠原基末端肽(PⅢNP)免疫試劑盒

樹脂殼菌脂肪特定轉(zhuǎn)錄因子2抗體Human MAPK13 ELISA Kit豬Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)免疫試劑盒

金黃紅色球菌載脂蛋白L3抗體Human MAPK7 ELISA Kit豬Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)免疫試劑盒

釀酒酵母腫瘤/抗原81抗體Human MAPK6 ELISA Kit豬25羥基維生D3(25 HVD3)免疫試劑盒

芽胞桿菌共濟(jì)失調(diào)蛋白7樣2抗體Human MAPKBP1 ELISA Kit豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)免疫試劑盒

釀酒酵母鹽耐藥蛋白ARS2抗體Human Marcks ELISA Kit豬17羥孕(17-OHP)免疫試劑盒

約氏乳桿菌芳香基硫酯1抗體Human MAPRE2 ELISA Kit豬1,25二羥基維生D3(1,25 DHVD3)免疫試劑盒

大腸埃希氏菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR二試劑盒異橙黃

巴斯德畢赤酵母Pichia│pastoris 質(zhì)量規(guī)格：>98%，BR轉(zhuǎn)/谷轉(zhuǎn)試劑盒月桂氮卓

枯草芽孢桿菌Bacillus│subtilis 質(zhì)量規(guī)格：>99%,AR別孕烯/3α,5α-四氫孕試劑盒油
PDE4抑制劑（AN-2728）蓮心堿高鹽（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 3,4-DihydroxybenzaldehydeLRIG1抗體包裝25mg

蓮須（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： 3,4-DihydroxybenzaldehydeLRIG3抗體包裝5mg

蓮子（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Thiamphenicol glycinate HCl肝腸鈣粘連蛋白抗體包裝10g

蓮子心（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Ethyl 2,4-dihydroxy-6-methylnicotinate透明質(zhì)受體抗體包裝50g

兩面針（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Enduracidin17號(hào)染色體開放閱讀框82抗體包裝10MG

亮菌(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： (+)-Catechin hydrate轉(zhuǎn)錄因子LMCD1抗體包裝100mg

遼東楤木皂苷X(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱： (+)-Catechin hydrate抗原76抗體包裝500mg

了哥王（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (+)-Catechin富含亮重復(fù)序列LRP15抗體包裝1g

烈香杜鵑（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： Vitamin B6 Hydrochloride富含亮重復(fù)跨膜神經(jīng)元蛋白1抗體包裝250mg

烈香杜鵑油（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： vitamin B6層粘蛋白α2抗體包裝1g

林生續(xù)斷苷I英文名稱： Fidaxomicin內(nèi)皮脂肪抗體包裝250mg

林澤蘭內(nèi)酯B（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (+)-Bicuculline可溶性凝集樣氧化低密度脂蛋白受體1抗體包裝250mg

林澤蘭內(nèi)酯C（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (+)-Bicuculline層粘連蛋白β2抗體包裝100g

林澤蘭內(nèi)酯D（標(biāo)準(zhǔn)品）英文名稱： (?)-Huperzine A白衍生化學(xué)吸引抗體包裝500g

靈仙新苷英文名稱： EGC T易位蛋白2抗體包裝1g