Ac-YVAD-FMK(caspase 4 抑制劑)

Ac-YVAD-FMK(caspase 4 抑制劑)公司*的產(chǎn)品：phospho-c-Raf (Ser338) /FITC 熒光標(biāo)記化原癌因c-Raf抗體IgG硝四唑紫 98%
phospho C-Myc(pThr58/pSer62)/FITC 熒光標(biāo)記抗化致癌因C-Myc抗體IgG咪唑 99%
phospho C-Met/pHGFR(pTyr1365)/FITC 熒光標(biāo)記抗化原癌因c

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Ac-YVAD-FMK(caspase 4 抑制劑)

英文名稱：Caspase 4 Inhibitors Z-VAD-FMK

產(chǎn)品規(guī)格：20μl

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

枯草芽孢桿菌B淋巴淋巴瘤因子9抗體Human FREM1 ELISA Kit豚鼠血管緊張Ⅱ(ANG-Ⅱ)免疫試劑盒

枯草芽胞桿菌膽綠還原抗體Human Frizzled 8 ELISA Kit豚鼠纖溶抗纖溶復(fù)合物(PAP)免疫試劑盒

干酪乳桿菌BIVM蛋白抗體Human FRS3 ELISA Kit豚鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)免疫試劑盒

煙曲霉血型Lewis A抗原抗體Human Frizzled 7 ELISA Kit豚鼠嗜性粒陽離子蛋白(ECP)免疫試劑盒

耐輻射奇球菌粘蛋白/巖藻糖基轉(zhuǎn)移3抗體Human Frizzled 10 ELISA Kit豚鼠生長激(GH)免疫試劑盒

橢孢小隔指孢Bloom綜合征相關(guān)蛋白抗體Human Frizzled 9 ELISA Kit豚鼠腎(Renin)免疫試劑盒

蠶豆葡萄孢骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體Human FRK ELISA Kit豚鼠神經(jīng)蛋白聚糖(NCAN)免疫試劑盒

肉色諾卡氏菌磷化非受體性蛋白酪激ETK抗體Human FOXD4 ELISA Kit豚鼠前列腺E2(PGE2)免疫試劑盒

弗氏檸檬桿菌磷化促凋亡調(diào)節(jié)蛋白BNIP3抗體Human FOXQ1 ELISA Kit豚鼠皮質(zhì)(Cortisol)免疫試劑盒

枯草芽胞桿菌168B淋巴特異性激活OCT結(jié)合蛋白1抗體Human FOXP4 ELISA Kit豚鼠內(nèi)皮型一氧化氮合成(eNOS)免疫試劑盒

球孢毛霉核糖體合成蛋白BOP1抗體Human FOXD4L6 ELISA Kit豚鼠內(nèi)皮1(ET-1)免疫試劑盒

類芽胞桿菌調(diào)節(jié)中心體分離早期相關(guān)激BORA抗體Human FOXE3 ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒

腐霉萊姆病螺旋體抗體Human FOXG1 ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒

芽孢桿菌屬成熟相關(guān)蛋白BOULE抗體Human FOXH1 ELISA Kit豚鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒

側(cè)耳伸長因子結(jié)合蛋白抗體Human FOXL2 ELISA Kit豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒

果生鏈核盤菌特異性堿性蛋白Y2抗體Human FOXO4 ELISA Kit豚鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒

: 馴Yu資源名稱: 瓊氏不動桿菌 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRαN已?；咸擒赵噭┖袣浠⑵瑝A

地衣芽孢桿菌Bacillus│licheniformis 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRαL巖藻糖苷試劑盒7-羥基-5,8-二氧基黃烷

季也蒙畢赤酵母Pichia│guilliermondii 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRαL艾杜糖苷試劑盒10-羥基攀援山橙堿
Ac-YVAD-FMK(caspase 4 抑制劑)秦氏蜜環(huán) L-亮氨酰甘氨酸阿立新AElisa

草生毛霉 茶樹油癌胚抗原Elisa

芽孢桿屬 2-氨基-3-吡氨酰磷酸合成IElisa

龍舌蘭盤孢 3-羥基氨基脲敏感性氧化Elisa

鏈孢囊 2-羥基-5-硝基煙酸白蛋白Elisa

黑曲霉 2-溴-2′-乙酮白蛋白Elisa

玫瑰暗黃鏈霉 4--7-甲氧基喹啉白介-18結(jié)合蛋白Elisa

地中海中慢生根瘤* 乙酰酮鎂白介1αElisa

扣囊復(fù)膜孢酵母 1,3-二乙烯基-1,1,3,3-四甲基二硅氧烷鉑(0)白介2受體Elisa

鼠李糖乳桿 2-溴甲基-6-白念珠烯化Elisa

紅城紅球 聚氧化乙烯白三烯B4Elisa

根瘤 聚氧化乙烯白三烯B5Elisa

熱帶假絲酵母 聚氧化乙烯白三烯C4Elisa

大腸埃希氏定量質(zhì)控株* 聚氧化乙烯白三烯D4Elisa

群結(jié)腐霉 聚氧化乙烯白介1Elisa 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)