以下是細胞生物學(xué)試劑的詳細介紹:
商品介紹:
AR231453是GPR119激動劑,能增強葡萄糖依賴的胰島素分泌和GLP-1釋放。 注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號:733750-99-7 純度:99.49% 分子式:C??H??FN?O?S 分子量:505.52 儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無菌去離子水)。
2) 對于懸浮細胞,500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞,要用不含EDTA的胰酶消化細胞,胰酶消化時間不宜過長或過短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時,加入細胞培養(yǎng)液,將細胞輕輕吹打下來,轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細胞,共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細胞,使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液(細胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細胞儀檢測(1小時內(nèi)檢測)。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組,正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析,繪制雙色散點圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標,PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時,活細胞僅有很低強度的背景熒光,早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光,晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測:
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞,細胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
土地叢毛單胞菌G蛋白偶合受體激1抗體Human TBCB ELISA Kit大鼠角化生長因子(KGF)免疫試劑盒
粉狀畢赤酵母促胃泌釋放肽抗體Human TBX21/T-bet ELISA Kit大鼠角化內(nèi)分泌因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)免疫試劑盒
麥根腐平臍蠕孢磷化G蛋白通路抑制蛋白1抗體Human TDGF1(TeRatocarcinoma-derived growth factor 1) ELISA Kit大鼠膠質(zhì)系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)免疫試劑盒
解烴棒桿菌腦糖原磷化抗體Human NPR2(Atrial natriuretic peptide receptor 2) ELISA Kit大鼠膠原吡啶交聯(lián)(PYD)免疫試劑盒
Fusarium venenatum NirenbergG基丁受體3抗體Human TAP1 ELISA Kit大鼠膠原C末端肽(CTX)免疫試劑盒
短小芽孢桿菌G基丁受體α3抗體Human TBCC ELISA Kit大鼠降鈣原(PCT)免疫試劑盒
草木樨中華根瘤菌GEN1蛋白抗體Human MTTP(Microsomal triglyceride transfer protein large subunit) ELISA Kit大鼠降鈣基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試劑盒
光滑青霉谷酰磷核糖基焦磷?;D(zhuǎn)移Human TBCD ELISA Kit大鼠降鈣(CT)免疫試劑盒
蜂房哈夫尼菌α-半乳糖苷抗體Human TBCA ELISA Kit大鼠堿性磷(ALP)免疫試劑盒
豌豆根瘤菌蛋白偶聯(lián)受體55抗體Human TARS2 ELISA Kit大鼠堿性成纖維生長因子6(bFGF-6)免疫試劑盒
香菇生長抑制DNA損傷基因45γ抗體 GADD45γHuman TARSL2 ELISA Kit大鼠堿性成纖維生長因子4(bFGF-4)免疫試劑盒
孟氏假單胞菌生長停滯特異性蛋白2家族3抗體Human TAF1L ELISA Kit大鼠堿性成纖維生長因子(bFGF)免疫試劑盒
麥根腐平臍蠕孢顆粒K抗體Human TAF1 ELISA Kit大鼠甲狀腺抗體(TAb)免疫試劑盒
灰葡萄孢菌*甘油磷二酯磷結(jié)構(gòu)域5抗體Human TAF3 ELISA Kit大鼠甲狀腺(T4)免疫試劑盒
球孢白僵菌γ谷酰轉(zhuǎn)移抗體Human TAF6L ELISA Kit大鼠甲狀腺球蛋白IgG抗體免疫試劑盒
克魯斯假絲酵母G1基丁A型受體α1抗體Human TAF5L ELISA Kit大鼠甲狀腺球蛋白(TG)免疫試劑盒
構(gòu)巢裸孢殼Emericella│nidulans 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.0%(GC)鹽益母草堿
地芽孢桿菌Geobacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5%(GC)去異波爾定
被孢霉屬Mortierella│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標準品土荊皮乙
GPR119激動劑(AR 231453)4EBP1 eIF4E結(jié)合蛋白抗體抗壞血 分析標準品
phospho-4EBP1(Ser64) 化4E結(jié)合蛋白1抗體抗壞血 ≥99.9998% (metals basis)
phospho-4EBP1(Thr37/46) 化4E結(jié)合蛋白1抗體苯 99.7%,無水級
phospho-4EBP1 (Ser65/Thr70) 化eIF4E結(jié)合蛋白抗體檸檬鉍銨 99%
5-HT 5-羥色抗體酰苯 99.95%,升華純化
5-HTR1A 5-羥色受體1A抗體對氨偶氮苯 分析標準品
5-HTR1B 5-羥色受體1B抗體偶氮熒光桃紅 Dye content 90 %
5-HTR2B 5-羥色受體2B抗體全反式-β-阿林胡蘿卜 96%