Btk激酶抑制劑(LFM-A13)

Btk激酶抑制劑(LFM-A13)公司*的產(chǎn)品：MyoD1/Myf3/FITC 熒光標(biāo)記肌原調(diào)節(jié)蛋白抗體IgG 牛至油 FCC
MYOG/Myogenin/FITC 熒光標(biāo)記肌紅蛋白抗體(肌生成)IgG2-苯 硫代異酯 99%
RIP3/FITC 熒光標(biāo)記受體結(jié)合絲氨蘇氨激3抗體IgG2-苯 硫代異酯 99%,FG
MYOZ/MYOZ1 /FITC 熒光標(biāo)記MYOZ抗體IgG廣藿香油

產(chǎn)品屬性：

中文名稱：Btk激酶抑制劑(LFM-A13)

英文名稱：LFM-A13

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg

發(fā)貨周期：1～3天
公司產(chǎn)品僅用于科研

商品介紹：

細(xì)胞生物學(xué)研究有以下幾個方面：

細(xì)胞生物學(xué)的研究內(nèi)容十分廣泛,主要包括：

①細(xì)胞核、染色體以及基因表達(dá)的研究；

②生物膜與細(xì)胞器的研究；

③細(xì)胞骨架體系的研究；

④細(xì)胞增殖及其調(diào)控；

⑤細(xì)胞分化及其調(diào)控；

⑥細(xì)胞的衰老與編程性死亡(凋亡)；

⑦細(xì)胞的起源與進(jìn)化；

⑧細(xì)胞工程.

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

塔賓曲霉人半乳糖6硫酯Bacillus chitinolyticus小鼠降鈣原(PCT)

堅強(qiáng)芽孢桿菌人艾杜糖硫酯Bacillus circulans小鼠胰島自身抗體(IAA)

解脂假絲酵母解脂變種人β葡萄糖苷Bacillus circulans小鼠胰島自身抗體(IAA)

肉桂鏈霉菌人β葡糖苷Bacillus circulans小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)

根瘤菌人β內(nèi)酰Bacillus circulans小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)

牡丹葡萄孢人β甘露糖苷Bacillus circulans小鼠白介7(IL-7)

羊毛狀絲齒菌人β半乳糖苷Bacillus circulans小鼠白介7(IL-7)

多主葡萄殼菌人αL艾杜糖苷Bacillus circulans小鼠褪黑(MT)

白淺灰鏈霉菌人α2抗纖溶Bacillus circulans小鼠褪黑(MT)

肉色栓菌人N-乙酰-β-D-基葡萄糖苷Bacillus circulans小鼠載脂蛋白H(Apo-H)

擬莖點霉屬人L解Bacillus circulans小鼠載脂蛋白H(Apo-H)

冬蟲夏草人5核苷Bacillus circulans小鼠熱休克因子1(HSF1)

莓實假單胞菌人1,3-βD葡葡糖苷Bacillus circulans小鼠熱休克因子1(HSF1)

豬丹絲菌人肌激Bacillus clarkii小鼠血小板因子3(PF-3)

松杉靈芝人靶向核糖核Bacillus clausii小鼠血小板因子3(PF-3)

枯草芽孢桿菌人蛋白激CBacillus coagulans小鼠白介2受體(IL-2R)

膜轉(zhuǎn)運蛋白XK抗體短裙竹蓀3-3人APP-PS1(M146L)雙基因轉(zhuǎn)染CHO細(xì)胞株

軟骨細(xì)胞蛋白39抗體短裙竹蓀3-5大鼠雪旺細(xì)胞

14-3-3E蛋白抗體塊菌中國倉鼠卵巢細(xì)胞野生型

核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子YY1抗體短裙竹蓀2號(毛竹林)人肺微血管內(nèi)皮細(xì)胞
Btk激酶抑制劑(LFM-A13)枯草芽孢桿 蜂斗菜內(nèi)酯A

米根霉 風(fēng)信子

 覆盆子酮

枯草芽孢桿 飛蓬酯乙

灰色變異鏈霉 飛蓬苷

德克薩斯萊茵海默氏 富馬酸

長枝木霉 扶桑甾

雜色曲霉 二氫歐山芹醋酸酯

枯草芽孢桿 二氫魚藤酮

雙孢蘑菇 二氫黃連堿

香菇 二氫草莓酸

罕見芽孢桿 二氫石蒜堿

澳型核果褐腐病 二氫

異常漢遜酵母 N,N’-二甲基蝙蝠葛堿化物

中國香柱 3,3'-O-二甲基鞣花酸 

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細(xì)胞，細(xì)胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)