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詳細介紹
商品介紹：
SYTO 綠色活細胞核酸染料( Ex/Em: 500/530 nm, bound to DNA)是一種具有細胞膜透性的核酸染料，其在于核酸結(jié)合之后熒光強度會得到顯著增強。SYTO 綠色活細胞核酸染料可以用于染死的或者活的真核細胞的RNA 和DNA，在革蘭氏細菌中同樣也適用。新型SYTO 綠色活細胞核酸染料具有如下重要特性： 細胞膜透性，可以穿過幾乎所有的細胞膜，包括哺乳動物細胞和細菌。 摩爾吸光系數(shù)高，可見吸收光譜消光系數(shù)> 60,000 cm-1M - 1。 極低的熒光背景，未與核酸結(jié)合時，染料的量子產(chǎn)率通常<0.01。 與核酸結(jié)合之后，量子產(chǎn)率通常> 0.4。 SYTO 綠色活細胞核酸染料可以在不同的實驗應用中染活細胞或者固定細胞的核酸，能夠與配備了常規(guī)激光激發(fā)器或?qū)拵д彰鞴庠吹母鞣N熒光檢測設備匹配。 儲存：-20℃，避光，有效期6個月。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
500μL | 1～3天 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。
建議設置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
酰次烏頭原堿（標準品）英文名稱： Myokinase癌基因ERG3抗體包裝1g
?；昝仔?/span>O英文名稱： Phosphodiesterase II from Bovine Spleen豬源產(chǎn)腸性大腸桿菌K88-K99抗體包裝25g
酰芍藥苷(標準品)英文名稱： SuccinimideFAS凋亡抑制分子3抗體包裝5g
酰烏頭原堿（標準品）英文名稱： 5-Bromouridine纖維束1抗體包裝25g
酰新烏頭原堿（標準品）英文名稱： ADA buffer, disodium salt叉頭蛋白P3抗體包裝5g
酰氧化芍藥苷英文名稱： Albumin, from bovine Protease free免疫球蛋白G Fc段受體I包裝1g
比靈,右旋荷包牡丹堿（標準品）英文名稱： Aluminum stearate叉頭蛋白M1抗體包裝5g
蓽茇（標準品）英文名稱： Bismuth(III) nitrate pentahydrate磷化雷帕霉靶蛋白抗體包裝500ml
蓽澄茄（標準品）英文名稱： Calcium phosphate, dibasic, dihydrate磷化粘著斑激抗體包裝100ml
蓖麻子（標準品）英文名稱： Cerium(III) carbonate, hydrate絲聚合蛋白/中間絲蛋白抗體包裝25ml
蝙蝠葛堿(標準品)英文名稱： Chymotrypsinogen A肺鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白抗體（C端）包裝10g
蝙蝠葛諾林堿(標準品)英文名稱： Cibacron blue 3G-A凝血因子13抗體(纖維蛋白穩(wěn)定因子)包裝50g
蝙蝠葛蘇林堿(標準品)英文名稱： DEAE Dextran濾泡樹突分泌蛋白抗體包裝25g
扁柏雙黃(標準品)英文名稱： Fluridone纖維母生長因子13抗體包裝5g
扁桃苷/苦杏仁苷(標準品)英文名稱： Histamine骨骼肌肌球蛋白輕鏈2抗體包裝100g
淺灰鏈霉菌Streptomyces│griseolus 質(zhì)量規(guī)格：>97%,BR瘦試劑盒染料木;Genistein
白乳菇Lactarius│piperatus (L.) Pers. 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品受體型酪蛋白磷樣N試劑盒;
鴨瘟病毒Alphaherpesvirinae│Duck plague virus 質(zhì)量規(guī)格：≥99.0%受體TNFRSF結(jié)合絲蘇激2試劑盒七葉皂苷 IIb;Escin IIb
活細胞核酸染料-綠菁SYT黃桿 甲基四氫苯二甲酸酐(4:6)隱球Elisa
炭疽芽孢桿 1-苯基-4-甲基-3-吡唑烷酮B類清道夫受體2Elisa
盤孢屬 3,3-二甲基-2,3-二氫-1H-茚-1-酮白介28BElisa
孢小克銀漢霉原變種 溶劑橙2肽基精氨酸脫亞氨4Elisa
枯草芽孢桿 2,4-二氯吡啶微粒體甘油三酸酯轉(zhuǎn)運蛋白大亞基Elisa
泰國鹽球 對甲苯磺酰甘氨酸甲酯肝X受體βElisa
戴爾根霉 3-溴-5-氯-2-氟吡啶法尼酯X受體Elisa
泰國放線短鏈孢 鄰甲苯基縮水甘油?；?膽固?；D(zhuǎn)移Elisa
根瘤 肼單鹽酸鹽趨化因子c-c-基元配體19Elisa
弗蘭克氏 異煙酰乙酸乙酯α-pro-GDNFElisa
蘇云金芽孢桿蠟螟亞種 1-酸β-pro-GDNFElisa
賴氨酸芽胞桿屬 2-溴-1-(2,4-二基)乙酮豬肉銚蟲Elisa
中華靈芝（紫芝） 5-氟-2-甲氧基煙酸著絲粒蛋白Elisa
瓶形毛殼 4-溴-3-氟苯磺酰狼瘡抗凝IgG抗體Elisa
海洋桿 α--3,4-二氯苯乙酮狼瘡抗凝IgM抗體Elisa
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