以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
Nifuroxazide是STAT抑制劑,是一種硝基呋喃類(lèi)抗生素,用于治療人類(lèi)和非人類(lèi)結(jié)腸炎和腹瀉。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):965-52-6 純度:98.0% 分子量:275.22 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
7-氧基-4’-羥基異黃(黃豆苷元雜質(zhì))(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Phloxine B三磷肌苷焦磷抗體包裝1g
7-羥基-4-基(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Eriochrome Red B吲哚2,3-雙加氧抗體包裝1g
7-羥基;傘形花內(nèi)酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Fast Red RL Salt白介19抗體包裝5g
7-乙基喜樹(shù)堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Fast Red Violet LB Salt抑制A/Inhibin α抗體包裝1g
8-O-乙酰山梔苷酯(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Amaranth胰島基因增強(qiáng)結(jié)合蛋白1/2抗體包裝25g
8-姜酚(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Brilliant ponceau 5R磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體包裝5g
808猩紅英文名稱(chēng): Phenosafranine磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體包裝1g
9-氧基喜樹(shù)堿英文名稱(chēng): Sirius Rose BB磷化白介-1受體相關(guān)激1抗體包裝5g
9’-丹酚B單酯英文名稱(chēng): Ruthenium Red干擾調(diào)節(jié)因子3包裝25g
9’’’-丹酚B單酯英文名稱(chēng): Erythrosin B磷化干擾調(diào)節(jié)因子3包裝5g
alpha-熊果苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Acid Red 88干擾調(diào)節(jié)因子7抗體包裝100g
Bullatine G(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Acid Red 183磷化干擾調(diào)節(jié)因子7抗體包裝25g
Cimiracemoside英文名稱(chēng): Acid Red 9磷化胰島受體底物-1抗體包裝1g
Clemaphenol A英文名稱(chēng): Malachite green磷化胰島受體底物-1抗體包裝25MG
Clematichinenoside C英文名稱(chēng): Brilliant green磷化胰島受體底物-1抗體包裝250mg
: =Y(jié)IM45827資源名稱(chēng): 諾卡氏菌 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品淋巴功能相關(guān)抗原2試劑盒金絲桃;Hypericin
希爾正青霉Eupenicillium│shearii 質(zhì)量規(guī)格:依諾沙星純含量≥60%亮酰-半胱酰肽試劑盒桔皮;Tangeretin
曼達(dá)帕姆發(fā)光桿菌Photobacterium│mandapamensis 質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于培養(yǎng) 亮富含重復(fù)絲/蘇蛋白激2試劑盒2-金剛烷;2-Adamantanon
STAT抑制劑(Nifuroxazide)熒光Cy3標(biāo)記大鼠IgM甘草(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
熒光Cy3標(biāo)記重組人白介-1受體拮抗劑甘草單銨鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光Cy3標(biāo)記血藍(lán)蛋白甘草二銨鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
熒光Cy3標(biāo)記雞卵白蛋白甘草異黃AHuman, Mouse
熒光Cy3標(biāo)記人血白蛋白甘木通(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
熒光Cy3標(biāo)記胰糜蛋白甘青青蘭(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
Alexa Fluor 555標(biāo)記羊IgG(流式同型對(duì)照)甘松(標(biāo)準(zhǔn)品)Human, Mouse, Rat
Alexa Fluor 555標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對(duì)照)甘遂(標(biāo)準(zhǔn)品)Human
熒光PE-Cy7標(biāo)記兔IgG(流式同型對(duì)照)甘西鼠尾草Human, Mouse