以下是細(xì)胞生物學(xué)試劑的詳細(xì)介紹:
商品介紹:
Amenamevir是一種helicase-primase抑制劑,對(duì)HSVs具有強(qiáng)效的抗病毒活性,EC50值為14ng/mL。 注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途! CAS號(hào):841301-32-4 別名:ASP2151 純度:98.0% 分子量:482.55 儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。 |
公司產(chǎn)品僅用于科研細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
二.細(xì)胞處理:
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
操作步驟:
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer(10×)稀釋成1×Binding buffer工作液備用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml無(wú)菌去離子水)。
2) 對(duì)于懸浮細(xì)胞,500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,要用不含EDTA的胰酶消化細(xì)胞,胰酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)或過(guò)短,最好是在輕輕吹打可以使貼壁細(xì)胞吹打下來(lái)時(shí),加入細(xì)胞培養(yǎng)液,將細(xì)胞輕輕吹打下來(lái),轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),500-1000g離心5min收集細(xì)胞。
3) 收集細(xì)胞后,加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌,離心收集細(xì)胞,共洗滌兩次。
4) 在細(xì)胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重懸細(xì)胞,使細(xì)胞濃度達(dá)到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細(xì)胞懸液(細(xì)胞總數(shù)為1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,輕輕混勻,室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測(cè)
1) 流式細(xì)胞儀檢測(cè):
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混勻后使用流式細(xì)胞儀檢測(cè)(1小時(shí)內(nèi)檢測(cè))。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導(dǎo)的正常細(xì)胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個(gè)對(duì)照組,正常細(xì)胞組可作為熒光補(bǔ)償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門(mén)的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進(jìn)行分析,繪制雙色散點(diǎn)圖(two-color dot plot),F(xiàn)ITC為橫坐標(biāo),PI為縱坐標(biāo)。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時(shí),活細(xì)胞僅有很低強(qiáng)度的背景熒光,早期凋亡細(xì)胞僅有較強(qiáng)的綠色熒光,晚期凋亡細(xì)胞有綠色和紅色雙重?zé)晒狻?/span>
2) 熒光顯微鏡檢測(cè):
染色孵育后涂片,顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍(lán)光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細(xì)胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細(xì)胞膜完整性的細(xì)胞,細(xì)胞核顯示紅色,膜上有綠色光環(huán)。
胡蘿卜苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): L-Kynurenine 磷化電壓門(mén)控性通道蛋白Kv4.2抗體包裝25g
胡麻屬苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sulfadimethoxine KT3 tag抗體包裝5g
湖北貝母(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Sulfadimethoxine 激肽釋放1抗體包裝1g
葫蘆巴(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Oseltamivir acid激肽釋放3/舒血管3抗體包裝25g
葫蘆巴堿(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): alpha-Arbutin 激肽釋放4抗體包裝5g
葫蘆巴堿鹽鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): alpha-Arbutin 組蛋白H3賴(lài)9基化1C抗體包裝100g
葫蘆A英文名稱(chēng): Cidofovir dihydrate 驅(qū)動(dòng)蛋白家族Member14蛋白抗體包裝25g
葫蘆B(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): AUY922Ki67蛋白抗體包裝5g
葫蘆D;葫蘆苦D英文名稱(chēng): Cefotetan acid 離子通道蛋白EAG1抗體包裝5g
葫蘆E(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): AZD-8055 轉(zhuǎn)染抑癌基因KLF6抗體包裝100g
槲寄生(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Plerixafor,AMD3100KLF樣轉(zhuǎn)錄因子8抗體包裝25g
槲皮苷(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): (D-Ala7)-Angiotensin I/II (1-7);A779胞質(zhì)接頭蛋白Keap1抗體包裝5g
槲皮(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Benzophenone磷化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗體包裝25g
槲皮-3-O-β-D-吡喃葡糖苷;槲皮-3-葡萄...英文名稱(chēng): Benzophenone磷化抑癌蛋白EZH2抗體包裝5g
槲皮-3-O-β-D-木糖甙(標(biāo)準(zhǔn)品)英文名稱(chēng): Pirenzepine dihydrochlorideAEG-1抗體包裝1g
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種Streptococcus│equi subsp.zooepidemicus 質(zhì)量規(guī)格:溶解性數(shù)據(jù)為19.8,分子量小于5000抗透明帶抗體試劑盒格列脲;Glibenclamide
: ATCC26282資源名稱(chēng): 米黑根毛霉 質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR抗天然脫氧核糖核抗體試劑盒高三尖杉酯堿;Homoharringto
醋化醋桿菌Acetobacter│aceti 質(zhì)量規(guī)格:≥98.5%(HPLC),BR,一合物抗糖蛋白抗體試劑盒高車(chē)前苷;Homoplantaginin
helicase-primase抑制劑(Amenamevir)載脂蛋白D抗體胃泌(Gastrin)檢測(cè)試劑盒Gastrin ELISA Kit
敏感離子通道1抗體胃泌(GAS)檢測(cè)試劑盒GAS ELISA Kit
雙鏈RNA腺苷脫抗體(C端)胃動(dòng)(MTL)檢測(cè)試劑盒MTL ELISA Kit
髓系、淋巴、混合系白血病易位因10抗體胃動(dòng)(MOT)檢測(cè)試劑盒MOT ELISA Kit
腺苷環(huán)化1抗體胃蛋白(PG)檢測(cè)試劑盒PG ELISA Kit
腺瘤樣息肉抗體胃蛋白(Pepsin)檢測(cè)試劑盒Pepsin ELISA Kit
溶血磷脂酰轉(zhuǎn)移抗體維生K1(VK1)檢測(cè)試劑盒VK1 ELISA Kit
錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體維生E(VE)檢測(cè)試劑盒VE ELISA Kit
磷化間變型淋巴瘤激抗體維生D3(VD3)檢測(cè)試劑盒VD3 ELISA Kit