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詳細介紹
商品介紹：
M11線粒體染色試劑盒是利用M 系列探針進行線粒體特異性染色的試劑盒。本試劑盒中的M11線粒體染色探針為紅色熒光標記的線粒體探針，具有579/599nm的大激發(fā)/發(fā)射波長。本品適合雙標實驗，因其紅色熒光與其他的綠色熒光探針具有良好的分辨率。 M系列探針是一種細胞滲透型的對活細胞中的線粒體體進行選擇性染色的一類新型熒光染料，該系列探針可以選擇性標記線粒體，包含標記線粒體的弱巰基反應(yīng)性的氯甲基官能團。只需簡單孵育細胞，即可穿過細胞膜并直接聚集在活性線粒體上?？捎行擞浕罴毎?。一旦線粒體被染色后，還能根據(jù)后續(xù)實驗的需求進行固定(醛類固定劑如)和透化(醛類去污劑如Triton X-100)，探針依然維持在細胞內(nèi)。 雖然傳統(tǒng)的線粒體熒光探針如TMR和羅丹明123，也能很容易的聚集在功能線粒體上，但是一旦線粒體膜電位喪失即會被洗掉，從而在一些需要細胞進行醛類固定或者包含線粒體能量狀態(tài)影響因子的實驗中，使其應(yīng)用大受限制，而M 系列探針不受線粒體膜電位影響。 M系列線粒體探針具有多種顏色可以選擇，可根據(jù)情況對樣品進行多色標記實驗。除了本試劑盒的紅色熒光探針，我公司還可以提供綠色、藍色、橙色等顏色的染色試劑盒。 儲存條件：染料-20℃避光保存；避免反復(fù)凍融；稀釋液2-8℃保存。 有效期：六個月。 |
以下是細胞生物學試劑的詳細介紹：
中文名稱 | 英文名稱 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 發(fā)貨周期 |
1000T|2000T | 1～3天 |
操作步驟：
1. 樣品染色
1) 將Binding Buffer（10×）稀釋成1×Binding buffer工作液備用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml無菌去離子水）。
2) 對于懸浮細胞，500-1000g離心5min收集細胞。
對于貼壁細胞，要用不含EDTA的胰酶消化細胞，胰酶消化時間不宜過長或過短，最好是在輕輕吹打可以使貼壁細胞吹打下來時，加入細胞培養(yǎng)液，將細胞輕輕吹打下來，轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)，500-1000g離心5min收集細胞。
3) 收集細胞后，加入預(yù)冷PBS溶液輕搖或用移液器輕柔吹打洗滌，離心收集細胞，共洗滌兩次。
4) 在細胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重懸細胞，使細胞濃度達到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl細胞懸液（細胞總數(shù)為1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，輕輕混勻，室溫避光孵育15min。
2. 樣品檢測
1) 流式細胞儀檢測：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混勻后使用流式細胞儀檢測（1小時內(nèi)檢測）。
建議設(shè)置經(jīng)凋亡誘導的正常細胞、PI單染和Annexin V-FITC單染3個對照組，正常細胞組可作為熒光補償調(diào)節(jié)去除光譜重疊和設(shè)定十字門的位置。結(jié)果可用CellQuest等軟件進行分析，繪制雙色散點圖（two-color dot plot），F(xiàn)ITC為橫坐標，PI為縱坐標。Annexin V-FITC和PI聯(lián)合使用時，活細胞僅有很低強度的背景熒光，早期凋亡細胞僅有較強的綠色熒光，晚期凋亡細胞有綠色和紅色雙重熒光。
2) 熒光顯微鏡檢測：
染色孵育后涂片，顯微鏡下觀察。使用熒光顯微鏡上的藍光和綠光通道分別觀察FITC和PI。被Annexin V-FITC結(jié)合的細胞顯示漿膜上有綠色光環(huán)。喪失細胞膜完整性的細胞，細胞核顯示紅色，膜上有綠色光環(huán)。
公司產(chǎn)品僅用于科研細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
江南卷柏（標準品）英文名稱： Fmoc chlorideβ腎上腺能受體激2抗體包裝25g
江藤苷英文名稱： Florisil®腺苷環(huán)化Gα蛋白/Gαs/olf抗體包裝5g
姜黃（標準品）英文名稱： Magnesium silicate adsorbent(Synthetic)周期蛋白G相關(guān)激抗體包裝1g
姜黃（標準品）英文名稱： Fluazifop-P-butyl solution糖基轉(zhuǎn)移8結(jié)構(gòu)域1抗體包裝5g
姜（標準品）英文名稱： Famoxadone solution環(huán)指蛋白27抗體包裝1g
降二氫辣椒堿英文名稱： Flufenoxuron透明質(zhì)結(jié)合蛋白1抗體包裝250mg
降香（標準品）英文名稱： FomesafenG蛋白偶聯(lián)受體激6抗體包裝5g
膠蒼術(shù)甙，羧基蒼術(shù)苷二鹽(標準品)英文名稱： FlutolanilRho GTP激活蛋白26抗體包裝1g
焦地黃乙甙A1英文名稱： FlusilazoleG蛋白α抑制蛋白1抗體包裝25g
焦地黃乙甙B1英文名稱： Fipronil生長停滯特異性蛋白6抗體包裝5g
焦性沒食子（標準品）英文名稱： Fenobucarb合成抗體包裝100ml
絞股藍（標準品）英文名稱： Fenpyroximate血型糖蛋白δ抗體包裝500ml
絞股藍皂苷(標準品)英文名稱： Fenoxaprop-p-ethyl糖皮質(zhì)激誘導亮拉鏈蛋白抗體包裝25g
絞股藍皂苷A(標準品)英文名稱： Amberlite® IRC-748γ-谷酰轉(zhuǎn)肽6抗體包裝5g
絞股藍皂苷XLIX（標準品）英文名稱： Amberlyst 15 ion-exchange resinG基丁受體δ/GABAA Rδ抗體包裝1g
鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>99%,BR去乙酰化Sirtuin-1試劑盒尿嘧啶;Uracil
芬克纖維微菌Cellulosimicrobium│funkei 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標準品去乙?；囸I激試劑盒鳥嘌呤;Guanine
鏈霉菌菌屬Streptomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR去唾液糖蛋白受體試劑盒L-鳥鹽鹽;L(+)-Ornith
線粒體紅色熒光染色試劑盒-M01Stenotrophomonas rhizophila （可定） 3-氟吡啶-4-酸頻哪酯胰凝乳蛋白Elisa
溜曲霉 10-樟腦磺酰氯腫廇蛋白P63Elisa
黑曲霉 1,7-二溴庚烷色P450 11A;BElisa
燕麥嗜酸西瓜亞種* 1,4-二氫-1,4-甲橋萘色P450 17Elisa
金黃硬皮馬勃 亞硫酸酯色P450 19Elisa
金黃色葡萄球金黃亞種 O'-(Carboxymethyl)fluoresceinamide色P450 21Elisa
乳酸乳球乳亞種 3-氟-2-甲氧基苯17β羥基類固脫氫Elisa
金黃色葡萄球金黃亞種 二(1-苯基-異喹啉)(乙酰酮)合銥(III)假尿苷酸合5Elisa
盤狀肉座 三[1-苯基異喹啉-C2,N]銥(III)假尿苷酸合6Elisa
大腸埃希氏 3,5-二-O-(對甲苯酰)-2-脫氧-Α-D-呋喃核糖氯轉(zhuǎn)化受體電位陽離子通道亞家族V成員6Elisa
黃曲霉 (S)-(+)-薄荷腦二苯基膦90kDa熱休克蛋白β1Elisa
長白山近藤氏酵母 4-(1-)吡啶HBsAg-preS1Elisa
噴泉鏈霉 Valnoctamide組織蛋白VElisa
pGAPZαA 氚代溴苯氫離子轉(zhuǎn)運ATP線粒體F1復(fù)合體β肽Elisa
無花果曲霉 2-(噻吩-2-基)乙基對甲苯磺酸酯CD24分子Elisa
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