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技術(shù)文章

Masson染色|茁彩生物

閱讀:151          發(fā)布時(shí)間:2025-3-4

Masson染色,也被稱為馬松染色,是一種經(jīng)典的結(jié)締組織染色方法,它利用不同分子量的染料滲透不同組織的特性,從而區(qū)分不同類型的纖維,主要用于顯示組織中的纖維和炎性因子。

Masson染色的原理主要基于不同組織成分對(duì)光線的吸收差異以及不同染色劑與組織成分的化學(xué)反應(yīng)。具體來(lái)說(shuō),該方法利用了一系列化學(xué)處理和不同染色劑的作用,使得膠原纖維產(chǎn)生色素沉淀,從而呈現(xiàn)出與周圍組織不同的顏色。小分子量的染料容易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織,而大分子量的染料則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)疏松、滲透性高的組織。

Masson染色常用的染料包括蘇木精、麗春紅(或酸性品紅)、磷鉬酸、苯胺藍(lán)等。這些染料需要按照一定的比例進(jìn)行配制,以獲得最佳的染色效果。例如,Regaud氏蘇木精的配制方法為:將蘇木精1g加入蒸餾水80ml內(nèi)加溫溶解,冷卻后加入95%酒精10ml和甘油10ml,放數(shù)日后即可應(yīng)用。Masson麗春紅酸性復(fù)紅液的配制方法為:麗春紅0.7g、酸性復(fù)紅0.3g加入蒸餾水99ml和冰醋酸1ml。

染色步驟

Masson染色的步驟通常包括切片脫蠟至水、鉻化處理(或去汞鹽沉淀)、染色、分化、復(fù)染、脫水、透明和封固等過(guò)程。具體來(lái)說(shuō):

  1. 將石蠟切片依次放入二甲苯、無(wú)水乙醇、90%乙醇等溶液中處理,以實(shí)現(xiàn)脫蠟至水。

  2. 進(jìn)行鉻化處理或去汞鹽沉淀(甲醛固定的組織此步可略)。

  3. 用自來(lái)水和蒸餾水洗切片。

  4. 用Regaud蘇木精染液或Weigert蘇木精液染核5~10分鐘。

  5. 充分水洗,如過(guò)染可用鹽酸酒精分化。

  6. 用蒸餾水洗切片。

  7. 用Masson麗春紅酸性復(fù)紅液染色5~10分鐘。

  8. 以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。

  9. 用1%磷鉬酸水溶液分化3~5分鐘。

  10. 不經(jīng)水洗,直接用苯胺藍(lán)或光綠液染色5分鐘。

  11. 以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。

  12. 用95%酒精、純凈酒精、二甲苯進(jìn)行透明處理,最后用中性樹膠封固。

染色結(jié)果

染色后,膠原纖維、粘液、軟骨等通常呈藍(lán)色(如使用光綠液染色則為綠色),胞漿、肌肉、纖維素、神經(jīng)膠質(zhì)等呈紅色,胞核呈黑藍(lán)色。這樣,通過(guò)顏色差異可以清晰地區(qū)分不同類型的纖維和組織成分。


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