關(guān)于高效液相色譜儀的保養(yǎng)你知道該怎么做嗎？

一、輸液系統(tǒng)的保養(yǎng)（高壓泵、溶劑輸送管路）

1. 流動(dòng)相的預(yù)處理

• 所有流動(dòng)相（包括水、有機(jī)溶劑、緩沖液）必須經(jīng)0.22μm 或 0.45μm 濾膜過(guò)濾，去除顆粒雜質(zhì)，避免堵塞泵頭、色譜柱或檢測(cè)器流通池。

• 水相或緩沖液需現(xiàn)配現(xiàn)用，避免微生物滋生（尤其夏季）；若需存放，需冷藏并在 3 天內(nèi)使用，使用前恢復(fù)至室溫并重新過(guò)濾。

• 有機(jī)溶劑需選擇色譜純級(jí)別，避免雜質(zhì)污染；混合流動(dòng)相需充分混勻，必要時(shí)超聲脫氣（或通過(guò)在線脫氣機(jī)），防止氣泡進(jìn)入泵體導(dǎo)致壓力波動(dòng)。

2. 泵的日常維護(hù)

• 若流動(dòng)相含緩沖鹽，需先用水沖洗 30 分鐘以上，去除鹽殘留（避免鹽結(jié)晶堵塞泵頭或色譜柱），再用甲醇 / 乙腈沖洗以保護(hù)密封圈。

• 每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用純有機(jī)溶劑（如甲醇、乙腈）或水沖洗泵和管路：

• 定期檢查泵的壓力波動(dòng)：正常情況下壓力應(yīng)穩(wěn)定（波動(dòng)≤5%），若壓力驟升（可能因堵塞）或驟降（可能因漏液），需立即停機(jī)排查。

• 長(zhǎng)期不用時(shí)，需用甲醇 / 乙腈充滿泵體和管路，防止密封圈干涸老化。

二、進(jìn)樣系統(tǒng)的保養(yǎng)（自動(dòng)進(jìn)樣器 / 手動(dòng)進(jìn)樣閥）

1. 樣品的預(yù)處理

• 樣品需經(jīng)0.22μm 濾膜過(guò)濾（或離心取上清），去除顆粒物，防止堵塞進(jìn)樣針、定量環(huán)或色譜柱。

• 避免樣品中含強(qiáng)腐蝕性成分（如強(qiáng)酸、強(qiáng)堿），以防損壞進(jìn)樣閥的密封件。

2. 自動(dòng)進(jìn)樣器的維護(hù)

• 定期清洗進(jìn)樣針和針座：每日實(shí)驗(yàn)后用甲醇沖洗，每周拆解針座超聲清洗（去除殘留樣品），防止交叉污染。

• 檢查進(jìn)樣針是否堵塞或磨損：若進(jìn)樣量不準(zhǔn)、壓力異常，需及時(shí)更換進(jìn)樣針（避免強(qiáng)行操作導(dǎo)致機(jī)械損壞）。

• 維護(hù)樣品盤(pán)和洗針液：洗針液需定期更換（通常為甲醇 - 水混合液），樣品盤(pán)若有漏液需及時(shí)清潔，防止腐蝕。

3. 手動(dòng)進(jìn)樣閥的維護(hù)

• 切換 “Load" 和 “Inject" 狀態(tài)時(shí)動(dòng)作要緩慢平穩(wěn)，避免劇烈操作導(dǎo)致閥內(nèi)轉(zhuǎn)子磨損。

• 每周用甲醇沖洗定量環(huán)和閥體：將進(jìn)樣閥置于 “Load" 狀態(tài)，通過(guò)進(jìn)樣針注入甲醇，反復(fù)推拉活塞沖洗，減少殘留。

三、色譜柱的保養(yǎng)（核心分離部件，需重點(diǎn)保護(hù)）

1. 使用前的準(zhǔn)備

• 新柱使用前需參考說(shuō)明書(shū)的 “活化方法"（如用低流速甲醇 / 乙腈沖洗 1 小時(shí)），去除柱內(nèi)保存液，平衡柱效。

• 避免突然切換高比例強(qiáng)溶劑（如從純水溶液直接切換到純甲醇），需梯度過(guò)渡，防止固定相收縮 / 膨脹導(dǎo)致柱床塌陷。

2. 使用中的注意事項(xiàng)

• 控制柱溫：根據(jù)樣品性質(zhì)設(shè)置合適柱溫（通常 30~40℃），避免溫度劇烈波動(dòng)（影響保留時(shí)間穩(wěn)定性）；高溫下避免使用高水相流動(dòng)相（可能導(dǎo)致固定相水解）。

• 控制 pH 范圍：硅膠基質(zhì)色譜柱通常耐受 pH 2~8（超出范圍會(huì)導(dǎo)致硅膠溶解），若需分析強(qiáng)酸性 / 堿性樣品，需選擇耐酸堿的色譜柱（如聚合物基質(zhì)柱）。

• 避免過(guò)載：進(jìn)樣量需匹配柱容量（通?！苤w積的 1%），過(guò)載會(huì)導(dǎo)致峰形拖尾、柱效下降。

3. 使用后的保存

• 若流動(dòng)相含緩沖鹽，先用 10% 甲醇 / 乙腈水溶液沖洗 30 分鐘，再用純甲醇 / 乙腈沖洗 30 分鐘（去除殘留有機(jī)物，保護(hù)固定相）。

• 反相柱（如 C18）長(zhǎng)期保存需充滿純甲醇 / 乙腈；正相柱需用正己烷 - 乙酸乙酯混合液保存，避免柱內(nèi)干涸。

• 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，用合適溶劑沖洗色譜柱：

• 拆下的色譜柱需兩端密封（套上保護(hù)帽），直立存放于陰涼處，避免陽(yáng)光直射和劇烈震動(dòng)。

四、檢測(cè)器的保養(yǎng)（根據(jù)類型針對(duì)性維護(hù)）

1. 紫外 - 可見(jiàn)檢測(cè)器（UV-Vis）

• 定期清潔流通池：若檢測(cè)基線漂移、噪聲增大，可能是流通池污染，需拆下流通池，用甲醇超聲清洗（避免用硬物刮擦窗口）。

• 保護(hù)氘燈：氘燈壽命通常為 1000~2000 小時(shí)，不用時(shí)及時(shí)關(guān)閉（避免頻繁開(kāi)關(guān)影響壽命）；若基線波動(dòng)大、能量過(guò)低，需更換新燈。

2. 熒光檢測(cè)器（FLD）

• 避免強(qiáng)光直射：熒光檢測(cè)器對(duì)光敏感，實(shí)驗(yàn)時(shí)需關(guān)閉樣品室門(mén)，防止雜散光干擾。

• 清洗流通池：若流動(dòng)相含高沸點(diǎn)組分（如甘油），易殘留污染流通池，需用丙酮或甲醇沖洗。

3. 蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）/ 示差折光檢測(cè)器（RID）

• ELSD 需定期清潔霧化器和漂移管（避免殘留樣品結(jié)晶），檢查氮?dú)鈮毫κ欠穹€(wěn)定。

• RID 需保持池溫恒定，避免流動(dòng)相組成劇烈變化（否則基線波動(dòng)大），流動(dòng)相需嚴(yán)格脫氣。

五、儀器整體的定期維護(hù)

• 每月檢查：各管路連接是否松動(dòng)（防止漏液），密封圈是否老化（如泵頭、進(jìn)樣閥處），及時(shí)更換磨損部件。

• 每季度校準(zhǔn)：通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)樣品校準(zhǔn)保留時(shí)間和峰面積（確保定量準(zhǔn)確性），檢查自動(dòng)進(jìn)樣器的進(jìn)樣精度（RSD 應(yīng)≤1%）。

• 長(zhǎng)期停機(jī)維護(hù)：若儀器停用超過(guò) 1 周，需沖洗系統(tǒng)（尤其是含緩沖鹽的管路），泵和色譜柱內(nèi)充滿保護(hù)溶劑，關(guān)閉電源并覆蓋防塵罩。

總結(jié)

HPLC 的保養(yǎng)核心原則是：“防污染、防堵塞、防磨損、勤清洗、巧保存"。通過(guò)規(guī)范流動(dòng)相和樣品預(yù)處理、及時(shí)沖洗殘留、定期檢查關(guān)鍵部件，可有效減少故障發(fā)生率，延長(zhǎng)儀器壽命，確保分析數(shù)據(jù)的可靠性。不同品牌儀器的細(xì)節(jié)可能略有差異，建議結(jié)合說(shuō)明書(shū)制定個(gè)性化保養(yǎng)計(jì)劃

高效液相色譜儀有哪些特點(diǎn)？