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細胞凋亡的過程是細胞死亡中的研究熱門課題,接下來本文會講一下細胞死亡的原因及方式,以及相關的一些研究工具,希望對大家有所幫助!
一、細胞死亡的原因及方式
細胞死亡是生命現象不可逆停止及生命的結束,正常的組織中經常發(fā)生細胞死亡,是維持組織機能和形態(tài)所必須的,常見的細胞死亡原因及方式主要有以下幾種:
二、細胞凋亡的過程
細胞凋亡是1973年Kerr和Wyllin 先提出這一概念。細胞凋亡的過程大致可分為以下幾個階段:接受凋亡信號→凋亡調控分子間的相互作用→蛋白水解酶的活化(Caspase)→進入連續(xù)反應過程。
細胞處于不同的凋亡階段具有不同的生物學特征,典型的特征包括:1)細胞膜PS(磷脂酰絲氨酸)外翻;2)線粒體膜電位喪失;3)細胞核濃縮和斷裂。此外在各個不同的時期:
三、如何檢測晚期時的細胞特征?
細胞凋亡是個復雜的過程,針對凋亡時期不同,檢測的方法有所不同,如何檢測晚期時的細胞特征?
細胞凋亡晚期,染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產生大量的粘性3'-OH末端,可在脫氧核糖核苷酸末端轉移酶(TdT)的作用下,將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標記到DNA的3'-末端,從而可進行凋亡細胞的檢測,這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉移酶介導的缺口末端標記法(terminal-deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling,TUNEL)。由于正常的或正在增殖的細胞幾乎沒有DNA的斷裂,因而沒有3'-OH形成,很少能夠被染色。TUNEL實際上是分子生物學與形態(tài)學相結合的研究方法,對完整的單個凋亡細胞核或凋亡小體進行原位染色,能準確地反應細胞凋亡典型的生物化學和形態(tài)特征,在細胞凋亡的研究中被廣泛采用。
四、細胞凋亡晚期檢測工具
Abbkine的TUNEL法細胞凋亡檢測試劑盒【TUNEL凋亡檢測試劑盒 (綠色熒光),KTA2010;TUNEL凋亡檢測試劑盒 (橙色熒光),KTA2011】提供實驗所需的全套試劑組分以及優(yōu)化的實驗方案,適用于熒光酶標儀、熒光顯微鏡、流式細胞儀。適用于樣品類型:貼壁細胞,懸浮細胞,石蠟包埋組織切片,冰凍切片。
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