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癌癥患者及動(dòng)物腫瘤模型的腫瘤活檢標(biāo)本常常含有異質(zhì)的細(xì)胞群,包括正常組織、血液和癌細(xì)胞。目前腫瘤研究的主要瓶頸還停留在“從腫瘤組織中純化出高純度的腫瘤細(xì)胞"。
目前實(shí)驗(yàn)室里主要采用顯微切割技術(shù)與密度梯度離心法純化腫瘤細(xì)胞,但這樣的效果往往不是很理想,總是存在腫瘤細(xì)胞不純、分離效率較低、分離后腫瘤細(xì)胞狀態(tài)差等缺點(diǎn)。目前,也有采用流式細(xì)胞儀進(jìn)行腫瘤細(xì)胞分離的,但是成本較高。
Cell Biolabs新型腫瘤細(xì)胞分離試劑盒,操作簡(jiǎn)便且性價(jià)比高,無需特殊的技能,也無需昂貴的儀器,輕松分離克隆性腫瘤細(xì)胞。
許多實(shí)體瘤包含正常細(xì)胞和癌細(xì)胞的異質(zhì)群體。這些細(xì)胞群的分離是準(zhǔn)確評(píng)估正常細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞之間真正的基因型和表型差異的關(guān)鍵。我們的CytoSelect克隆性腫瘤細(xì)胞分離試劑盒使用專有的半固體瓊脂培養(yǎng)基來促進(jìn)實(shí)體瘤細(xì)胞形成菌落。菌落在6孔板或35mm培養(yǎng)皿中生長(zhǎng)。通過大小過濾將這些菌落從單個(gè)(即正常)細(xì)胞中分離出來。來自這些菌落的活細(xì)胞可以很容易地回收用于進(jìn)一步分析。
克隆性腫瘤細(xì)胞分離試劑盒實(shí)驗(yàn)原理:
大多數(shù)實(shí)體瘤細(xì)胞均能在軟瓊脂上生長(zhǎng)并形成克隆,利用該原理,可以將少量的腫瘤細(xì)胞從大多數(shù)非惡性細(xì)胞內(nèi)分離出來。該克隆性腫瘤細(xì)胞分離試劑盒首先對(duì)實(shí)體瘤進(jìn)行消化獲得單個(gè)細(xì)胞,然后將細(xì)胞置于半固體軟瓊脂中培養(yǎng)6-8天,待形成克隆后,使用細(xì)胞篩獲得腫瘤單細(xì)胞,以達(dá)到有效分離腫瘤細(xì)胞的克隆和不能形成克隆的單細(xì)胞。另外,由于腫瘤干細(xì)胞具有相似的特征,因此該腫瘤細(xì)胞分離試劑盒除了能用于實(shí)體瘤細(xì)胞的分析,也可以應(yīng)用于腫瘤干細(xì)胞的分離。
實(shí)驗(yàn)流程圖:
實(shí)驗(yàn)結(jié)果圖:
克隆形成、分離和重新鋪板:小鼠肺腫瘤被切除、切碎和消化后,按照500,000個(gè)細(xì)胞/孔接種到瓊脂基質(zhì)懸浮液中。圖A顯示了培養(yǎng)7天后的克隆集落形成(紅色箭頭顯示集落,黑色箭頭顯示單細(xì)胞)。圖B顯示獲得的克隆集落(單個(gè)細(xì)胞已被去除)。圖C展示了培養(yǎng)3天后重新鋪板的克隆集落(沒有預(yù)先進(jìn)行胰蛋白酶消化)。圖D展示了培養(yǎng)1天后重新鋪板的克隆形成菌落(在鋪板前對(duì)菌落進(jìn)行胰蛋白酶消化/滴定以產(chǎn)生單細(xì)胞懸浮液)。
Cell Biolabs作為細(xì)胞學(xué)分析檢測(cè)試劑盒生產(chǎn)商,為生物技術(shù)和研究類客戶提供基于細(xì)胞功能研究以及疾病等方面的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。主要涵蓋細(xì)胞研究、細(xì)胞信號(hào)通路和蛋白質(zhì)生物學(xué)、代謝研究、病原體和毒素、干細(xì)胞研究等領(lǐng)域。艾美捷科技是Cell Biolabs的中國(guó)代理商,為您提供優(yōu)質(zhì)的腫瘤細(xì)胞分離試劑盒。
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