去甲基化研究：m6A去甲基酶活性/抑制分析試劑盒解決方案

m6A的獲得或喪失可導致RNA病毒發(fā)生重大功能變化，從而改變其宿主細胞的融合/進入，復制，傳播，致病強度和免疫逃逸。m6A 在調節(jié)DNA復制、DNA損傷、RNA剪接、轉座、轉錄和細胞防御方面起著至關重要的作用。

關于去甲基化研究，Nature又出新文章“RNA demethylation increases the yield and biomass of rice and potato plants in field trials"。

該研究開發(fā)了利用RNA表觀遺傳修飾N6-甲基腺嘌呤（m6A）直接提高植物生物量、產量和抗逆的新技術。通過在水稻和馬鈴薯中引入FTO實現m6A RNA的去甲基化修飾，使得田間試驗的產品和生物量增加約50%。

在人類細胞中，m6A修飾可能由甲基轉移酶復合物 METTL3/METTL14 催化，并被 α-酮戊二酸 (α-KG) 和 Fe2+ 依賴性雙加氧酶如 FTO、ALKBH5 和TET樣酶去除，這個過程是動態(tài)可逆的。結果表明，METTL3和 α-KG /Fe2+ 依賴性雙加氧酶對生物的生長代謝和繁殖過程都發(fā)揮著重要作用。

測量m6A RNA甲基酶活性/抑制和去甲基酶活性/抑制水平將使我們能夠更好地了解腺嘌呤A、N6-甲基腺苷之間的關系。對RNA甲基化和RNA去甲基化的可逆循環(huán)的研究，將對調節(jié)胚胎發(fā)育和細胞生長方面起到廣泛的作用。

艾美捷 Epigenase m6A Demethylase Activity/Inhibition Assay Kit (Colorimetric)m6A去甲基化酶激活/抑制檢測試劑盒（比色法）——利用核提取物或純化的m6A去甲基化酶——FTO及ALKBH5，測定總m6A去甲基化酶的激活/抑制效果。該試劑盒適用于多數物種比如哺乳動物、植物、真菌和細菌等。

實驗原理

m6A底物包被在板上，m6A去甲基化酶結合在底物上，并將底物中的m6A去甲基化。底物中未被去甲基化的m6A可以被m6A抗體特異性識別，然后通過后續(xù)顯色系統(tǒng)增強免疫信號，zui終達到比色定量的目的。在試劑盒的組分中含有2ug/ml的FTO去甲基酶，通過添加不同濃度重組FTO酶，測定OD值。OD值與FTO酶活性成反比。

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